基于TurboID邻近标记技术揭示线虫E颗粒完整性与小RNA稳态调控新机制

本研究针对秀丽隐杆线虫生殖颗粒中E颗粒的形成机制与功能未知的问题，通过TurboID邻近标记技术结合RNAi反向遗传筛选，鉴定出E颗粒新型组装起始因子EGC-2和EGC-3，发现其通过调控EGO/PICS复合体核周定位维持E-class siRNA生成与piRNA稳态，为生物分子凝聚体组装机制研究提供了新范式。

　　

生殖颗粒是由RNA和蛋白质组成的生物分子凝聚体，在RNA代谢和转录后基因调控中发挥关键作用。秀丽隐杆线虫（C. elegans）生殖颗粒包含多种亚结构，例如P颗粒、Mutator foci、Z颗粒、SIMR foci、P-bodies、D颗粒和E颗粒。其中E颗粒在生殖颗粒内具有特定空间排布，并参与一类特殊小干扰RNA（siRNA）的生成。然而，E颗粒的形成机制及其功能尚不明确。本研究采用TurboID邻近标记技术联合RNAi反向遗传筛选，发现两个新型E颗粒组分EGC-2（C27B7.5）和EGC-3（F59G1.8），它们作为E颗粒组装的起始因子，缺失后会破坏E颗粒富集的EGO复合体（负责E-class siRNA生成）和PICS复合体（参与piRNA生物合成）的核周定位。小RNA组学分析表明，EGC-2和EGC-3均促进5′端E-class siRNA产生，而EGC-3会抑制piRNA积累。该研究揭示了EGC-2/EGC-3在维持E颗粒结构完整性和小RNA稳态中的重要作用，同时为生物分子凝聚体的组装机制研究提供了高效技术策略。