不同体型犬类DNA双链断裂修复效率的年龄相关性研究

本研究探讨了年龄和体型如何影响家犬原代成纤维细胞DNA双链断裂（DSB）修复效率。研究人员通过使用依托泊苷诱导DSB，并在2小时（NHEJ修复）和24小时（HR修复）后检测γ-H2AX焦点，发现老年犬细胞在早期修复阶段损伤更多，而老年大型犬在晚期HR修复途径中存在缺陷，为理解年龄相关性基因组不稳定性提供了新见解。

　　

衰老与基因组不稳定性增加相关，这一现象主要由DNA损伤随时间的积累所驱动。在各类DNA损伤中，双链断裂（DSB）尤为有害，并与年龄相关的功能衰退和疾病密切相关。本研究旨在探究年龄和体重如何影响家犬原代成纤维细胞中DSB修复（DSBr）的效率，家犬这一物种在寿命和体重上存在显著的种内差异。实验分离了来自幼年和老年大型及小型犬的原代成纤维细胞。研究人员用100 μM的依托泊苷处理细胞以诱导DSB，随后在两个恢复时间点（2小时和24小时）进行分析，这两个时间点分别对应DSBr的两条主要通路：快速的非同源末端连接（NHEJ）和慢速的同源重组（HR）。通过免疫荧光染色标记γ-H2AX焦点，并使用共聚焦显微镜采集图像。研究发现，在2小时恢复期，两类体型的老年犬细胞平均荧光强度均更高，这表明其DNA损伤量更大，但暗示了尽管体型不同，老年犬通过NHEJ修复机制的效率可能相似。研究还显示，在24小时恢复期，老年大型犬的细胞平均荧光强度更高，这表明与HR相关的较慢修复阶段在来自老年大型犬的细胞中似乎存在缺陷。这些发现支持了衰老与基因组维持功能受损相关的更广泛理论，并确立了家犬作为研究年龄相关性基因组不稳定性细胞机制的宝贵模型。