亚洲新种白橙丝盖菇（Inocybe alboaurantiaca）的形态学与系统发育学研究

本文报道了来自亚洲（日本和巴基斯坦）的丝盖菇科新种白橙丝盖菇（Inocybe alboaurantiaca），通过形态学与nrITS、nrLSU区域系统发育分析证实其分类地位。该种以白色至黄橙色子实体、圆锥形至亚钟形且不开裂的菌盖、具钝疣状突起的结节状担孢子（8.90 × 6.06 μm）和短胖梭形囊状体为特征，与欧洲主流概念的纤维丝盖菇（I. fibrosa）亲缘最近但存在显著遗传分化（nrITS差异45 bp，nrLSU差异25 bp），为森林生态系统中外生菌根（ECM）真菌多样性研究提供了重要新证据。

　　

引言

外生菌根（ECM）真菌是森林生态系统的重要组成部分，对维持全球森林生态功能具有关键作用。丝盖菇科（Inocybaceae）作为伞菌目（Agaricales）中分类多样性最高的科之一，主要与壳斗科（Fagaceae）、松科（Pinaceae）和杨柳科（Salicaceae）植物形成ECM共生关系。该科最初仅包含Auritella、Inocybe和Tubariomyces三个属，后经系统修订提升Inosperma和Mallocybe两个亚属为属级分类单元，并新增Nothocybe和Pseudosperma属，目前共包含7个属。

丝盖菇属（Inocybe s.s.）是丝盖菇科中物种最丰富的属，其特征包括具厚壁结晶的囊状体（metuloid cystidia）、无坏死色素的透明担子，以及杏仁形至椭球形、近圆柱形、角形或结节状的担孢子。目前全球公认约1000种，但实际物种数量可能达3000–5000种，表明该属仍存在大量未描述类群。本研究基于形态解剖和分子系统学分析，报道了来自亚洲日本和巴基斯坦的丝盖菇新种。

材料与方法

采样地点包括巴基斯坦开伯尔普赫图赫瓦省斯瓦特地区（34°20′24″N–35°33′00″N, 72°04′48″E–72°30′00″E）和日本东京市西东京区（35°43′48″N, 139°00′00″E）。斯瓦特地区具有多样的植物地理特征，涵盖亚热带湿润气候到高山草甸生态系统；西东京区为湿润亚热带气候（柯本气候分类Cfa），年平均气温14.5°C，年降水量1648 mm。

标本采集后记录生态特征并拍摄原位照片，使用蒙塞尔色卡标准化颜色描述。采用5% KOH和1% Congo red对组织切片进行复水染色，梅尔泽试剂检测淀粉质反应。使用Piximeter 5.10软件测量显微结构，担孢子和囊状体测量基于40个读数，表示格式为（a–）b–c（–d），其中b–c包含90%测量值。标本保存于巴基斯坦拉合尔大学植物标本馆（LAH）和东京大学森林植物标本馆（TOFO）。

DNA提取采用CTAB法，使用引物对ITS1F+ITS4和LR0R+LR5分别扩增nrITS和nrLSU区域。PCR反应体系25 μl，热循环参数：94°C初始变性1分钟，53°C退火1分钟（30循环），72°C延伸1分钟（初始）和8分钟（最终）。测序由TsingKe生物技术公司完成，序列提交至GenBank和MycoBank。

序列比对采用MAFFT在线服务，手动校正使用BioEdit。通过MrModeltest确定最佳进化模型（GTR+I+G）。最大似然法（ML）分析在W-IQ-TREE平台进行，支持度评估采用超快速自举法（UFBoot）和SH近似似然比检验（SH-aLRT）；贝叶斯推断（BI）分析使用MrBayes 3.2.7，运行150万代，采样频率1000代，燃烧率25%。支持度阈值设定为SH-aLRT ≥ 70%，后验概率（PP）≥ 0.70，UFBoot ≥ 70%。

结果

系统发育分析显示，白橙丝盖菇的nrITS序列与瑞典样本I. ambigua（BJ910730）相似度87%，与爱沙尼亚和德国的I. fibrosa（EL2599, MD-2023）相似度86%。UNITE数据库比对结果与此一致。nrLSU序列与爱沙尼亚I. fibrosa（EL2599, GB/EL25-99）相似度95%。nrITS数据集包含64条序列，具有651个变异位点、389个简约信息位点和379个保守位点；nrLSU数据集包含17条序列，具有623个变异位点、198个简约信息位点和3756个保守位点。

白橙丝盖菇与欧洲I. fibrosa在nrITS和nrLSU区域分别存在45 bp和25 bp差异。在系统发育树中，该种形成独立分支，作为欧洲I. fibrosa的姐妹群，支持率高达99/1.00/100（SH-aLRT/PP/UFBoot）。

分类学处理

白橙丝盖菇（Inocybe alboaurantiaca Sana and Kiran sp. nov.）模式标本保存于LAH（LAH38556），GenBank登录号：ITS=PQ805433，LSU=PV489868；MycoBank编号875331。

该种与近缘种I. fibrosa的区别在于：菌盖圆锥形至亚钟形具宽脐突，表面平滑仅边缘略纤丝状，白色至黄橙色（10YR 8/8），无菌幕残留；菌柄圆柱形基部稍膨大；囊状体短胖梭形。生态分布上，I. fibrosa分布于欧洲苔藓覆盖的冰碛物生境，而新种发现于亚洲栎属（Quercus）和松属（Pinus）林下。

子实体中型至大型。菌盖直径40–65 mm，圆锥形至亚钟形具脐突，初期白色后变为浅橙色（10YR 8/4）至黄橙色（10YR 8/8），中部平滑边缘微纤丝状；菌褶直生，排列亚离生至密，白色后变黄橙色；菌柄50–90 × 8–15 mm，圆柱形基部稍膨大，白色受伤后变黄橙色。

担孢子（6.90–）7.90–9.97（–10.79）×（4.42–）5.63–6.47（–7.71）μm，平均8.90 × 6.06 μm，Q=1.58，结节状具钝疣（高0.9–1.5 μm）；担子20–33 × 6–9 μm，棍棒状具2–4小梗；侧生囊状体与缘生囊状体同型，35–69 × 10–22 μm，厚壁具结晶顶端；菌盖皮层为黏皮状菌丝（直径4–10 μm）；柄皮层具油质菌丝（直径7–9 μm）。

生态与分布

生于巴基斯坦斯瓦特地区栎属为主的混交林下土壤，以及日本西东京市鹅耳枥（Carpinus）附近土壤。副模式标本：巴基斯坦LAH38557（ITS=PQ858028, LSU=PV489871）；日本TOFO 100201（ITS=LC832005）。

讨论

白橙丝盖菇的发现印证了亚洲地区丝盖菇属的物种多样性。其与欧洲I. fibrosa的遗传分化（nrITS差异13–14%）远超真菌种内变异阈值（>3%），结合形态差异（菌盖形状、颜色和纹饰）和地理隔离，支持其独立物种地位。

历史上Sowerby（1814）描述的Agaricus fibrosus和Gillet（1874）命名的I. fibrosa均缺乏分子数据，但根据原始描述，前者具裂状菌盖和狐红色脐突，后者具波浪状裂缘和线形菌褶，均与新种明显不同。瑞典的I. ambigua（Romagnesi 1979）虽具相似菌柄和菌褶，但其菌盖深红棕色（12–20 mm）且生于沼泽地，生态形态特征显著差异。

该种在巴基斯坦和日本的跨分布可能源于两地共通的ECM宿主（栎属、松属）和相似的湿润亚热带气候。此前巴基斯坦报道的I. napipes也在日本有分布，提示东亚与南亚间存在真菌地理联系。

结论

通过整合形态学、生态学和多基因系统发育证据，本研究确立了白橙丝盖菇作为丝盖菇属新分类单元的地位，为亚洲ECM真菌多样性研究提供了关键数据，凸显了跨区域合作在真菌分类学中的重要性。