灵芝孢子粉增强新冠疫苗效果：激活IFN-α通路提升抗病毒免疫应答的中药佐剂新机制

本研究针对疫苗效力随时间减弱的问题，探索了灵芝孢子粉（GLSP）作为COVID-19疫苗佐剂的潜力。通过单细胞多组学技术发现，GLSP通过促进髓系细胞扩增、增强I型干扰素（IFN-α）反应及优化B/T细胞受体克隆选择，显著提升中和抗体水平，为开发安全有效的口服疫苗佐剂提供了新策略。

　　

随着新冠疫苗的大规模接种，疫苗保护效力随时间推移而下降已成为全球公共卫生领域面临的共同挑战。尽管加强针接种能在一定程度上恢复免疫力，但其持久性仍不理想。传统疫苗佐剂如铝佐剂虽广泛应用，但存在引发Th2免疫偏倚、神经毒性及过敏风险等问题；而新型佐剂如AS03和MF59则可能伴随睡眠障碍、局部反应等安全性担忧。因此，开发能系统激活免疫应答且安全稳定的新型佐剂迫在眉睫。

在这一背景下，传统中药的活性成分展现出独特优势。灵芝（Ganoderma lucidum）作为传统药用真菌，其孢子粉（GLSP）已被证明具有免疫调节和抗肿瘤活性，但作为人类流行病学疫苗佐剂的作用尚不明确。为此，研究人员在《Journal of Advanced Research》发表了这项研究，探讨GLSP作为COVID-19疫苗加强针佐剂的潜力及其作用机制。

研究团队招募195名志愿者，随机分为对照组和GLSP干预组，所有受试者均接种科兴CoronaVac疫苗加强针，干预组同步口服GLSP六个月。通过微量中和试验检测中和抗体抑制率，并利用单细胞转录组（scRNA-seq）、V(D)J测序（scVDJ-seq）和染色质可及性测序（scATAC-seq）等多组学技术，结合液相色谱-质谱分析（UPLC-QTOF-MS/MRM-MS）进行成分鉴定和定量，并通过分子对接和体外实验验证活性成分。

研究结果显示，在基线免疫力中等的人群中，GLSP干预使接种后90天的中和抗体抑制率显著提升。单细胞分析揭示GLSP扩大了髓系细胞比例，特别是经典单核细胞（CM）亚群（CM_S100A和CM_HLA-D），并增强了其与T、B细胞的互作。GLSP还促进先天与适应性免疫细胞产生更强的IFN-α反应：在先天免疫方面，增强与IFN-α刺激相关的转录因子活性和染色质开放性；在适应性免疫方面，诱导BCR和TCR的基因使用偏好和克隆扩增，从而强化抗病毒免疫。

机制上，GLSP上调了单核细胞中干扰素刺激基因（ISG）的表达，并通过调节转录因子（如STAT1、STAT2、IRF7、IRF9）活性和染色质可及性增强IFN-α应答。B细胞和T细胞分析表明，GLSP促进 na?ve B细胞（Bn_ISG15）和活化CD8⁺ T细胞（CD8 Tem_CMC1、CD8 Te_KLRD1）扩增，这些细胞表现出更强的IFN应答和抗病毒特征。BCR/TCR谱分析显示，GLSP干预后富集的克隆具有更高的病毒抗原结合亲和力和IFN信号活性。

化学 profiling 和功能验证锁定三萜类成分灵芝酸H（GH）为关键活性化合物，其能有效结合TLR7/8、STING等IFN通路关键靶点，并在体外促进IFN-α分泌和ISG15表达。分子对接表明GH与已知激动剂共享结合位点，提示其作为新型IFN通路激动剂的潜力。

该研究结论表明，GLSP作为一种安全的口服佐剂，能通过多组学水平促进稳健的IFN-α介导的抗病毒状态，从而抵消疫苗效力衰减。其通过调控先天和适应性免疫的多重机制增强疫苗应答，为传统中药在现代疫苗佐剂开发中的应用提供了坚实证据，也为应对未来传染病挑战提供了新思路。