可可豆荚壳乙醇提取物乳凝胶的急性皮肤毒性测试及抗炎活性研究：一种安全有效的天然抗炎新策略

本研究针对合成抗炎药物长期使用导致的胃肠道副作用问题，开发了基于可可豆荚壳乙醇提取物的乳凝胶制剂。通过OECD标准的急性皮肤毒性和刺激性测试，证实该制剂安全无刺激；在角叉菜胶和完全弗氏佐剂(CFA)诱导的小鼠急慢性炎症模型中，1%-3%浓度的乳凝胶显著降低足跖厚度、延长热板潜伏期、减少淋巴细胞和PMN细胞浸润，证明其具有显著的抗炎镇痛效果，为天然抗炎药物的开发提供了新选择。

　　

炎症是机体应对有害刺激产生的生物反应，虽然合成抗炎药物如非甾体抗炎药(NSAIDs)广泛应用，但长期使用会导致上胃肠道黏膜损伤等副作用。因此，开发天然、安全、有效的抗炎替代药物成为研究热点。可可豆(Theobroma cacao L.)作为传统药用植物，其豆荚壳富含儿茶素、原花青素等黄酮类化合物，具有显著的抗氧化和抗炎特性，但以往研究多集中于口服应用，对其局部外用制剂的安全性和有效性缺乏系统评估。为此，印度尼西亚泗水大学药学院的研究团队在《Phyton-International Journal of Experimental Botany》上发表论文，首次全面评估了可可豆荚壳乙醇提取物乳凝胶的皮肤安全性和抗炎活性。

研究团队采用96%乙醇浸渍法提取可可豆荚壳活性成分，通过GC-MS和UHPLC-HRMS分析鉴定出包括乙醇、1,2,3-丙三醇、5-羟甲基糠醛、芳樟醇氧化物等在内的44种化合物，总黄酮含量达14.1 ± 1.3 mg QE/g。随后制备了1%、2%、3%三种浓度的乳凝胶制剂，并对其pH、铺展性、粘度、均一性等理化指标进行标准化控制。

关键技术方法包括：1) 采用OECD指南规范的急性皮肤毒性试验（2000 mg/kg BW剂量）和皮肤刺激性试验评估安全性；2) 通过角叉菜胶诱导急性炎症和CFA诱导慢性炎症的小鼠模型；3) 使用热板法测定疼痛潜伏期并计算最大可能效应(% MPE)；4) 采用游标卡尺测量足跖厚度并计算水肿抑制率；5) 通过组织切片HE染色观察表皮厚度及淋巴细胞、PMN细胞浸润情况。

急性皮肤毒性测试结果表明：所有浓度的乳凝胶均未引起皮肤红斑、水肿或可逆性毛发改变，14天观察期内无死亡现象，皮肤半数致死剂量(LD₅₀)大于2000 mg/kg BW，根据全球化学品统一分类和标签制度(GHS)属于第5类或未分类物质，表明该制剂具有较低的皮肤毒性。

急性皮肤刺激性测试显示：所有组别的原发性刺激指数均为0（0-0.4范围），组织学观察显示皮肤结构完整，无表皮增厚或损伤，淋巴细胞和PMN细胞计数无显著差异，证实该制剂无皮肤刺激性。

角叉菜胶诱导的急性炎症研究显示：3%浓度乳凝胶能有效降低足跖厚度、延长热板潜伏期（% MPE达10.83±7.19，与阳性对照双氯芬酸钠相当）、减少表皮厚度和PMN细胞浸润。组织学观察显示阴性对照组出现角化过度、表皮增生和急性水肿，而治疗组表皮结构明显改善。

CFA诱导的慢性炎症模型证实：1%浓度乳凝胶表现出最佳抗炎效果，显著降低足跖厚度（水肿抑制率50.90±8.10%）、增加疼痛潜伏期（% MPE 45.89±4.94）、减少表皮厚度以及淋巴细胞和PMN细胞数量（分别为23.88±1.52和5.80±1.83）。值得注意的是，高浓度(3%)效果反而低于低浓度(1%)，研究人员推测可能与多种多酚成分的协同抗炎和疼痛调节作用的复杂平衡有关。

研究结论表明，可可豆荚壳乙醇提取物乳凝胶是一种安全无刺激的外用制剂，能有效缓解急慢性炎症反应，其作用机制可能与黄酮类化合物（如儿茶素、表儿茶素、原花青素）抑制NF-κB依赖的促炎细胞因子产生、降低COX-2(环氧化酶-2)介导的前列腺素合成以及调节TRPV1(瞬时受体电位香草酸亚型1)通道活性有关。尽管该研究未明确鉴定具体活性化合物及其分子机制，但为开发天然抗炎药物提供了重要理论基础和实践依据。这种基于农业废弃物的增值利用策略，不仅为炎症治疗提供了新的局部给药选择，也符合可持续发展理念，具有重要的科学价值和应用前景。