基于氨基酸吸附剂的分散固相萃取技术用于血清中反义寡核苷酸的高效提取

本文首次系统评估了五种氨基酸修饰硅胶吸附剂在反义寡核苷酸（ASO）分散固相萃取（dSPE）中的应用。研究通过优化吸附/解吸溶剂的pH值、盐类型/浓度、有机溶剂组成等参数，建立了基于弱离子交换机制的绿色萃取方法。该方法仅使用10 mM醋酸铵溶液（pH 4吸附/pH 11解吸）即可实现91±1%的血清样品回收率，为基因治疗药物监测提供了简单高效的新策略。

　　

亮点

选定吸附剂特性解析

合成吸附剂通过元素分析进行表征，表2数据通过碳氮含量增加证实了氨基酸的成功键合。由于空间位阻效应，氨基酸配体的覆盖密度低于氨基初始密度（表2）。小分子氨基酸（如丙氨酸Ala）可实现比大体积氨基酸（如色氨酸Trp）更高的覆盖密度。

与已发表dSPE方法的横向对比

目前仅有少数研究报道dSPE用于治疗性寡核苷酸（ON）提取。现有文献涉及聚离子液体、交联两性离子聚离子液体包覆的磁性纳米颗粒在dSPE和磁性dSPE中的应用。此外，氨基和羧基功能化的硅胶吸附剂也有使用。这些方法能高效分离不同修饰类型的ON，但需使用离子对试剂或有机溶剂。本研究创新性地采用氨基酸吸附剂，仅通过pH调控实现高效萃取，在环保性和操作简便性方面展现显著优势。

结论

本研究首次系统评估五种氨基酸吸附剂用于ASO的dSPE提取。所有吸附剂均基于弱离子交换机制，即带正电荷的氨基/氨基酸基团与带负电ON之间的静电吸引。解吸通过降低吸附剂表面正电荷实现，因此仅需调节醋酸铵溶液pH即可驱动整个吸附/解吸过程。甲硫氨酸修饰吸附剂表现最佳，其疏水侧链可增强与修饰ON的相互作用。方法成功应用于人血清样本提取，回收率达91±1%，为ASO监测提供了绿色、高效的新平台。