阿尔及利亚黑种草籽超临界CO2萃取油：抗脲酶与抗丁酰胆碱酯酶活性表征及机制研究

本研究针对传统萃取方法在保留黑种草生物活性方面的局限，采用Box-Behnken实验设计优化超临界CO2萃取工艺。阿尔及利亚研究人员发现最佳条件（250 bar, 35°C, 195 min）下提取率达37.006%，亚油酸含量达75.9%。该萃取物展现出显著抗脲酶（IC50=3.61±0.25 μg/ml）和抗丁酰胆碱酯酶活性（IC50=35.15±0.59 μg/ml），分子对接证实亚油酸与脲酶高亲和力结合。该研究为神经退行性疾病及胃肠疾病治疗提供了新型天然抑制剂来源。

　　

通过Box-Behnken实验设计，研究人员系统优化了从阿尔及利亚黑种草（Nigella sativa L.）种子中提取油脂的超临界二氧化碳（CO₂）工艺参数。他们探索了压力（100-250 bar）、温度（35-55 °C）和提取时间（180-210 分钟）的不同组合。最终，在250 bar、35 °C下萃取195分钟，获得了最高提取率，达到37.006%。

利用气相色谱-质谱联用（GC-MS）技术分析油脂脂肪酸组成，结果显示亚油酸（Linoleic acid）是提取物中的主要成分，在250 bar、35 °C、195分钟的最佳条件下，其含量最高可达75.9%。

研究进一步评估了这些提取物的生物活性，重点考察了它们抑制脲酶（Urease）和丁酰胆碱酯酶（Butyrylcholinesterase, BChE）的能力。在抗脲酶活性方面，最佳IC₅₀值（半最大抑制浓度）为3.61 ± 0.25 μg/ml，来自250 bar、35 °C、195分钟的提取物；而在抗丁酰胆碱酯酶活性方面，最佳IC₅₀值为35.15 ± 0.59 μg/ml，来自100 bar、55 °C、195分钟的提取物。

为了深入揭示其作用机制，科研人员还进行了分子对接分析，模拟了黑种草籽提取物中已鉴定的生物活性分子与脲酶之间的相互作用模式和结合亲和力。结果表明，亚油酸（C18:2 9Z, 12Z）与脲酶展现了最有利的结合能力。

值得注意的是，以往的相关研究大多局限于使用传统方法制备的提取物。本研究首次揭示了超临界CO₂萃取技术所获黑种草油的潜力，其可能具备独特的植物化学成分谱和更强的生物活性，从而为开发新型天然疗法提供了新的科学见解。