E2F1通过转录激活lncRNA HOTAIR调控KLF16/Klotho表观沉默在血管钙化中的作用及机制

来自国内的研究人员针对慢性肾脏病（CKD）中高磷诱导的血管钙化机制展开研究，发现转录因子E2F1通过激活lncRNA HOTAIR表达，招募KDM1A和EZH2表观抑制KLF16/Klotho轴，从而缓解血管平滑肌细胞钙化。该研究为CKD相关血管钙化提供了新的治疗靶点。

　　

背景：血管钙化是慢性肾脏病（CKD）患者的重要并发症，与高磷血症密切相关，但其机制尚未完全阐明。本研究主要探讨了转录因子E2F1通过靶向长链非编码RNA HOTAIR在高磷（Pi）诱导的血管钙化中的新作用和机制。

方法：通过RT-qPCR和蛋白质印迹分析评估E2F转录因子家族多个成员在体内外模型中的差异表达。采用茜素红S染色、Ca²⁺含量测定和碱性磷酸酶（ALP）活性评估人主动脉平滑肌细胞（HASMCs）的钙化情况。利用细胞组分分离和荧光原位杂交（FISH）检测HOTAIR的亚细胞定位。通过染色质免疫沉淀（ChIP）、荧光素酶报告基因和RNA免疫沉淀（RIP）实验验证E2F1/HOTAIR在Krüppel样因子16（KLF16）/Klotho轴中的作用。测定小鼠血清肌酐（Scr）和尿素氮（BUN）浓度以评估肾功能，并评估小鼠主动脉环的血管钙化。

结果：E2F1在高磷处理的HASMCs中显著下调，并被证实是HOTAIR的转录激活因子。过表达E2F1可减轻高磷诱导的HASMCs钙化，而沉默HOTAIR则逆转这一效应。HOTAIR作为赖氨酸特异性去甲基化酶1A（KDM1A）和zeste同源物2增强子（EZH2）的支架，参与了对KLF16的表观遗传抑制。KLF16进而作为Klotho的转录抑制因子，从而抑制高磷触发的HASMCs钙化。此外，过表达E2F1减轻了高磷诱导小鼠胸主动脉的钙沉积，而沉默HOTAIR则推翻了这一保护作用。

结论：由E2F1转录激活的HOTAIR通过调控KLF16/Klotho轴对血管钙化发挥保护作用，该机制涉及KDM1A和EZH2的招募。这些发现为CKD治疗提供了潜在的新靶点。