单分子质量光镊技术最佳实践指南:实现高精度生物分子定量分析的新策略
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时间:2025年10月15日
来源:Nature Protocols 16
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本研究针对质量光镊(MP)技术中单分子光学对比度测量的优化难题,系统提出了提升质量分辨率、定量检测限和重现性的标准化方案。通过界面修饰与参数优化,使单次检测时间缩短至10分钟,为生物大分子组装体研究提供了强有力的技术支撑。
在质量光镊(Mass Photometry, MP)技术中,通过检测单个分子在玻璃-水界面产生的微小光学对比度,可实现生物分子混合物的质量分辨定量分析。本指南详细阐述了如何优化和验证这一方法:作为一种强大的技术手段,MP不仅能解析生物分子的四级结构动态,其性能核心在于精准捕获界面单分子信号。虽然理论上该技术仅受光子散粒噪声限制,但实际操作中需综合考虑实验参数与检测体系设计。本文重点探讨影响MP性能的关键因素,并逐步演示如何在不牺牲技术便捷性的前提下,优化质量分辨率、定量检测限、结果重现性及样品浓度范围。典型样本分析耗时<10分钟,若需进行玻璃表面胺化修饰则额外增加2小时。
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