提取介质对医疗器械致敏性LuSens检测方法的影响研究

本文系统探讨了不同提取介质（如生理盐水、DMSO、含血清培养基等）对医疗器械浸提液在LuSens检测（OECD TG 442D）中细胞毒性和荧光素酶诱导作用的影响。研究发现ISO 10993-12:2021推荐的提取介质基本适用于该体外方法，但含胎牛血清（FBS）的培养基会干扰细胞活性检测。研究为医疗器械皮肤致敏性体外评估新方法（NAMs）的标准化提供了关键参数优化依据。

　　

^重点

^化学品

本研究选用的提取介质包括：生理盐水（由捷克国家公共卫生研究所培养基制备与实验室玻璃器皿清洗部门自制）、乙醇（EtOH）、二甲基亚砜（DMSO）、达尔贝科改良 Eagle 培养基（D-MEM）、胎牛血清（FBS）、芝麻油、棉籽油、聚乙二醇二甲基丙烯酸酯（PEG）（均购自Sigma-Aldrich）以及橄榄油（Carl ROTH公司）。

^测试样品

商业可用样品来自......

^结果

在预研初期，我们评估了所选提取介质本身对LuSens细胞系的毒性效应及潜在荧光素酶诱导作用，以确定其本底值（表2a）。所有介质均未引发超过阈值的荧光素酶活性。值得注意的是，所有测试油类均倾向于滞留于细胞表面且未诱发细胞毒性。因此后续仅选择LLNA:DA中常用的芝麻油进行......

^讨论

过去25年间，基于新方法（NAMs）替代动物实验在REACH法规（EC, 2006）下的化学品毒理学评估中已成功实施。然而在医疗器械领域，这类包含数千种成分的复杂异质性产品尚未实现非动物检测方法的监管同步（Myers等，2017；Pellevoisin等，2021）。主要障碍在于......

^{作者贡献声明}

L. Svobodova： 原始撰写、可视化、方法论构建；E. Pacalova： 数据分析与整理；K. Kejlova： 原始撰写与课题监督；A. Vlkova： 实验监督与形式化分析；M. Dvorakova： 文稿审阅与编辑；M. Rucki： 研究监督与概念设计；D. Jirova： 整体监督；H. Bendova： 项目指导。

^{利益冲突声明}

作者声明存在以下可能构成竞争利益的财务/人事关系：

L. Svobodova, E. Pacalova, K. Kejlova, A. Vlkova, M. Rucki, M. Dvorakova, D. Jirova, H. Bendova 获得ERDF/ESF项目"国家公共卫生研究所替代毒理学方法研发教育国际竞争力"（编号CZ.02.1.01/0.0/0.0/16_019/0000860）资助。

^致谢

本研究由ERDF/ESF项目"国家公共卫生研究所在替代毒理学方法研发教育中的国际竞争力"（编号CZ.02.1.01/0.0/0.0/16_019/0000860）及捷克卫生部科研机构概念发展项目"国家公共卫生研究所（编号75010330）"共同资助。