综述：长链非编码RNA在HBV感染和肝细胞癌进展中的当前进展和作用

《Genes & Diseases》：Current progress and role of lncRNAs in HBV infection and progression of hepatocellular carcinoma

本综述系统阐述了长链非编码RNA（lncRNA）在乙型肝炎病毒（HBV）感染及其所致肝细胞癌（HCC）中的关键作用。文章重点探讨了HBV相关lncRNA（如HULC、HOTAIR、MEG3）的表达调控、功能机制（如作为ceRNA、表观遗传调控），及其在病毒复制、免疫应答、肿瘤增殖与转移中的双向调控功能，并展望了其作为新型诊断生物标志物和治疗靶点的潜力。

　　

引言

长链非编码RNA（lncRNA）是长度超过200个核苷酸的非编码RNA分子，它们作为重要的调控因子，参与广泛的生理和病理过程。在乙型肝炎病毒（HBV）感染引起的慢性肝病及肝细胞癌（HCC）进展中，lncRNA的表达谱发生显著改变，这些改变不仅影响病毒的复制和宿主免疫应答，更在肝癌的发生、发展中扮演着关键角色。

lncRNA在病毒感染和宿主-病原体相互作用中的作用

病毒感染会深刻影响宿主细胞的转录组，其中包含大量lncRNA。研究表明，许多lncRNA在病毒感染后被诱导表达，这些lncRNA可根据其调控方式分为干扰素（IFN）依赖性和IFN非依赖性两类。例如，lncRNA ACOD1能被多种病毒（如VSV、VACV、HSV-1）诱导，其表达不依赖于IFN-I信号通路，而是部分依赖于核因子κB（NF-κB）信号。lncRNA ACOD1通过直接结合代谢酶GOT2并增强其胞浆催化活性，从而促进病毒复制。另一方面，病毒也会“劫持”一些宿主lncRNA（即病毒劫持lncRNA）来利于自身生存，例如流感A病毒（IAV）特异性地诱导VIN的表达。

lncRNA对宿主转录组和免疫反应的影响

lncRNA是宿主抗病毒免疫反应的重要调节器。在病毒感染早期，病毒RNA被模式识别受体（PRR）识别，触发先天免疫反应，导致大量lncRNA的差异表达。这些lncRNA进而通过调控PRR相关信号、转录因子活化与核转位、细胞因子（如IFN、肿瘤坏死因子-α（TNF-α））的产生、Janus激酶/信号转导与转录激活因子（JAK/STAT）信号通路以及干扰素刺激基因（ISG）的转录等多个层面，精细调控宿主的免疫应答。某些lncRNA，如血清中的uc001ncr和AX800134，显示出作为HBV阳性HCC早期诊断新型生物标志物的潜力。

病毒感染中lncRNA参与的免疫失调

lncRNA在免疫调节中表现活跃。在HBV感染背景下，lncRNA CD160在CD8⁺ T细胞中高表达，通过招募组蛋白去乙酰化酶11（HDAC11）形成复合物，结合到IFN-γ和TNF-α的启动子区域，抑制这两种关键细胞因子的产生，从而削弱CD8⁺ T细胞的免疫应答，促进病毒免疫逃逸。树突状细胞中的lncRNA（lnc-DC）则通过Toll样受体9/STAT3（TLR9/STAT3）信号通路影响树突状细胞的分化和免疫功能。

lncRNA与HCC增殖的相关性

大量研究已将众多lncRNA与HCC的发展联系起来。在HBV相关HCC中，许多lncRNA的表达受到HBx蛋白的调控。例如，高表达于肝癌中的HULC，其表达可被HBx与cAMP反应元件结合蛋白（CREB）共同促进，进而通过下调邻近的抑癌基因p18来促进肝癌细胞增殖。HOTAIR的表达也与HBV复制及HBx有关，它与polo样激酶1（Plk1）协同作用，参与致癌相关的表观遗传重编程。相反，一些具有肿瘤抑制功能的lncRNA，如MEG3和Dreh，在HCC中常常表达下调。MEG3的下调与慢性乙型肝炎（CHB）患者的肝纤维化相关，而Dreh则能与波形蛋白（Vimentin）结合，抑制其表达，从而在HBx介导的肝癌中抑制肿瘤生长和转移。

lncRNA在HCC中的免疫逃逸和诊断潜力

lncRNA通过调控下游靶基因和癌症相关信号通路，影响肿瘤细胞的增殖、迁移、侵袭、自噬和凋亡。此外，循环lncRNA（如UCA1、LINC00152、HULC等）在HCC患者血清中水平异常，与肿瘤分期、分级、大小及患者预后密切相关。将某些血清lncRNA（如LRB1）与甲胎蛋白（AFP）联合检测，可显著提高HCC早期诊断的敏感性和准确性。因此，lncRNA有潜力作为预测HCC治疗效果（包括手术、放化疗、免疫治疗）的生物标志物，并为个体化诊疗提供支持。

与HBV相关的lncRNA

大多数与HBV感染相关的lncRNA促进肿瘤发生，仅有极少数抑制肿瘤形成。这些lncRNA可通过多种机制影响HBV复制，例如作为竞争性内源RNA（ceRNA）吸附抗病毒microRNA（miRNA），将转录因子转运至病毒启动子，或移除病毒共价闭合环状DNA（cccDNA）上的表观遗传沉默标记。lncRNA DLEU2被HBx结合后，可共同募集到cccDNA上，取代EZH2 on病毒染色质，从而激活病毒转录和复制。

lncRNA与HBV HBx蛋白的相互作用

HBx蛋白是HBV编码的关键调控蛋白，通过反式激活多种生长调控基因和激活NF-κB、p53、Wnt等信号通路参与HCC发生。HBx能够直接或间接调控众多lncRNA的表达。例如，HBx可增强LINC01152的表达，进而升高信号转导与转录激活因子3（Stat3）、磷酸化Stat3（p-Stat3）和白介素-23（IL-23）的水平，在HBV相关HCC的发展中起重要作用。HBx也能上调lncRNA SNHG20的表达，后者通过抑制PTEN，导致HCC细胞增殖增加和凋亡减少。

lncRNA与HBV相互作用及HCC进展的机制

lncRNA通过复杂的分子网络参与HBV相关HCC的进展。例如，lncRNA ATB作为转化生长因子-β（TGF-β）信号的中介，被HBx通过诱导自噬和TGF-β表达而上调，进而结合IL-11 mRNA并激活STAT3信号，促进HCC转移。lncRNA HOXD-AS1则通过竞争性结合miR-130a-3p，解除其对SRY相关高迁移率族盒4（SOX4）的抑制，进而激活EZH2和基质金属肽酶2（MMP2），促进HCC转移。

lncRNA检测的新兴工具与挑战

CRISPR/Cas9基因编辑技术、RNA测序（RNA-seq）等高通量技术的发展极大地促进了lncRNA的鉴定和功能研究。CRISPR筛选能够大规模、精确地扰动lncRNA表达，是发现其功能和研究其机制的有力工具。RNA-seq则能无偏倚地检测和量化整个转录组中的lncRNA，包括其不同的剪接变体。然而，lncRNA研究仍面临挑战，如其表达水平通常较低、结构复杂、功能多样且具有细胞区室特异性，这为可靠检测和功能验证带来了困难。开发稳定、特异的lncRNA生物标志物用于HCC的早期诊断和预后评估仍需更多努力。

结论

lncRNA在HBV感染和HCC进展中发挥着多方面的关键调控作用。它们既是病毒与宿主相互作用的重要界面，也是肝癌发生发展的驱动因子。对HBV相关lncRNA的深入研究，不仅有助于阐明病毒致癌和免疫逃逸的新机制，也为开发基于lncRNA的早期诊断方法和靶向治疗策略开辟了新的前景。尽管面临技术挑战，但随着研究工具的不断进步，lncRNA有望在未来HCC的精准医疗中扮演越来越重要的角色。