CXCR7-TAGLN2蛋白复合物调控甲状腺乳头状癌侵袭转移的机制研究及治疗靶点探索

《Frontiers in Immunology》：CXCR7-TAGLN2 protein complex regulates invasion and metastasis in papillary thyroid carcinoma: a potential therapeutic target

本文揭示了CXCR7与TAGLN2在甲状腺乳头状癌（PTC）中协同作用的新机制，通过免疫组化、细胞共定位、共免疫沉淀及功能实验证实二者形成复合物，并通过激活TGF-β/Smad2信号通路促进PTC细胞侵袭转移，为靶向治疗提供了新策略。

　　

1 引言

甲状腺癌（TC）是全球最常见的内分泌系统恶性肿瘤，预计到2030年将成为全球第四大常见癌症。其中，甲状腺乳头状癌（PTC）是主要的组织学亚型，约占所有甲状腺癌病例的84%。尽管大多数PTC患者预后良好，但仍有5-10%的患者会发生远处或区域转移，并可能进展为放射性碘难治性（RAIR）疾病。RAIR-PTC的发展常与影响碘摄取和代谢的基因改变有关，导致治疗耐药。目前的靶向治疗，包括BRAF和MEK抑制剂，可以延长RAIR-PTC患者的无进展生存期，但对总生存期的影响有限，且常伴有显著的不良反应，从而影响生活质量。因此，迫切需要识别新的治疗靶点，以抑制PTC转移，从而改善患者生存结局和生活质量。

CXCR7是一种新近发现的非典型趋化因子受体，最初被归类为孤儿受体，其在体内主要与基质细胞衍生因子1（SDF-1，也称为CXCL12）结合。这种相互作用通过β-抑制蛋白（β-arrestin）介导的信号传导激活细胞内信号通路，包括AKT和MAPK通路，从而促进肿瘤进展并调节肿瘤微环境。CXCR7在多种人类恶性肿瘤中过表达，包括肺癌、结直肠癌、肝癌、前列腺癌和胃癌，其表达与侵袭性表型（如增殖、迁移和侵袭能力增强）相关。我们前期的研究表明，与癌旁非肿瘤组织相比，CXCR7在PTC组织中显著上调，且这种过表达与淋巴结转移相关。此外，沉默CXCR7可抑制PTC细胞的生长、增殖、侵袭和血管生成，同时促进细胞凋亡。这些发现表明CXCR7在PTC的发生发展和转移中起着关键作用。然而，CXCR7介导调控PTC发病机制的确切分子机制尚不清楚。

TAGLN2（Transgelin-2）是一种肌动蛋白结合蛋白，通过与肌动蛋白丝相互作用，在细胞骨架重塑中发挥关键作用。TAGLN2的表达升高在多种恶性肿瘤中均有报道，包括结直肠癌、膀胱癌、肺癌、宫颈鳞状细胞癌和乳腺癌。值得注意的是，Wang等人研究表明，TAGLN2在PTC中的高表达与淋巴结转移呈正相关，且TAGLN2过表达可促进PTC细胞增殖、迁移、侵袭和血管生成。此外，我们对过表达CXCR7的PTC细胞系进行的蛋白质组学分析显示，TAGLN2水平显著升高。这些观察结果提示，CXCR7可能参与了TAGLN2介导的PTC转移过程。然而，CXCR7与TAGLN2相互作用以调控PTC侵袭和转移的具体机制仍未明确。

本研究旨在评估CXCR7和TAGLN2在PTC组织（实验组）和结节性甲状腺肿组织（对照组）中的免疫组化表达，探讨它们与PTC临床病理特征的关系，并评估其表达水平之间的相关性。随后，培养PTC细胞系，利用免疫荧光共定位和共免疫沉淀实验检测CXCR7和TAGLN2蛋白在细胞内的相互作用。最后，采用慢病毒共转染技术沉默TAGLN2并同时过表达CXCR7，进而评估PTC细胞的迁移和侵袭能力，以阐明CXCR7通过与TAGLN2相互作用调控PTC侵袭和转移的分子机制。

2 材料与方法

2.1 临床组织样本与病理资料

收集2017年1月至2020年8月期间在兰州大学第一医院接受手术切除的64例甲状腺乳头状癌患者（实验组）和24例结节性甲状腺肿患者（对照组）的石蜡包埋组织标本。制备组织切片用于免疫组化分析。所有标本的使用均获得兰州大学第一医院伦理委员会批准，且所有病例均有完整的临床资料。

2.2 免疫组织化学染色（SP法）

组织样本经石蜡包埋后，切成4 μm厚的切片。病理切片经 overnight 烘烤后，依次在二甲苯中脱蜡，并通过梯度乙醇系列复水。通过在柠檬酸钠缓冲液中煮沸切片5分钟进行抗原修复。使用3%过氧化氢阻断内源性过氧化物酶活性。为减少非特异性结合，切片在室温下用10%山羊血清白蛋白封闭1小时，然后在4°C下与CXCR7（1:100）和TAGLN2（1:200）一抗孵育过夜。随后，切片依次与生物素标记的二抗（山羊抗兔IgG）和辣根过氧化物酶标记的链霉亲和素在37°C下各孵育30分钟。每次孵育步骤之间，用PBS洗涤切片三次（每次5分钟）。使用二氨基联苯胺（DAB）作为显色剂进行信号检测，随后用苏木精复染细胞核。最后，切片通过梯度酒精系列脱水并封片。

采用免疫反应评分（IRS）系统进行定量分析。IRS计算公式如下：IRS = 染色强度（SI）× 阳性细胞百分比（PP）。SI按四分制评分：0（阴性）、1（弱阳性）、2（中度阳性）、3（强阳性）。PP分类为：0（阴性）、1（1–25%）、2（26–50%）、3（51–75%）、4（76–100%）。对每个样本，随机选择不同区域的三个代表性视野进行IRS评估，记录平均IRS值作为最终评分。IRS < 3定义为低表达，而IRS ≥ 3视为高表达。

2.3 细胞培养与试剂

人甲状腺乳头状癌细胞系TPC-1和BCPAP购自武汉普诺赛生命科技有限公司。细胞在添加了10%胎牛血清和1%青霉素-链霉素溶液的RPMI-1640培养基中培养。所有培养基和补充剂均购自Biological Industries（以色列）。

使用的一抗如下：兔多克隆抗磷酸化Smad2（p-Smad2）、兔多克隆抗Smad2、兔多克隆抗GAPDH、兔多克隆抗CXCR7、兔多克隆抗TAGLN2以及小鼠单克隆抗TAGLN2。Protein A/G PLUS-琼脂糖购自Santa Cruz Biotechnology（美国），Gαppen环肽-TRITC购自Sigma-Aldrich（美国）。

2.4 免疫荧光共定位

处于对数生长期的细胞消化成单细胞悬液，接种到96孔玻璃底板中。细胞汇合后，用4%多聚甲醛固定，0.2% Triton X-100透化，并用含5%牛血清白蛋白（BSA）的PBS封闭。加入一抗（CXCR7, 1:500; TAGLN2, 2 μg/mL），4°C孵育过夜。洗涤后，细胞与绿色荧光染料标记的二抗在37°C避光孵育45分钟。细胞核用DAPI复染，丝状肌动蛋白用红色荧光标记的鬼笔环肽（5 μg/mL）在室温避光标记40分钟。每次孵育后，均用PBS充分洗涤细胞。使用荧光显微镜进行荧光成像。

2.5 共免疫沉淀实验

按照制造商说明书，处于对数生长期的细胞用预冷的磷酸盐缓冲盐水（PBS）洗涤，并在冰上使用IP裂解缓冲液裂解。收集上清液，留取一小部分用于Western blot分析。剩余裂解液与1 μg CXCR7抗体在4°C孵育过夜。加入预处理过的蛋白A/G琼脂糖珠以结合抗体-蛋白复合物，随后在4°C轻柔摇晃孵育2小时。通过离心沉淀琼脂糖珠，用裂解缓冲液洗涤，然后在5× SDS上样缓冲液中煮沸变性。使用BCA法测定蛋白浓度。蛋白质通过SDS-PAGE分离，并通过湿转法转移到聚偏二氟乙烯（PVDF）膜上。膜用5%脱脂牛奶封闭，并与TAGLN2（1:1000）和CXCR7（1:1000）一抗在4°C孵育过夜。用TBST洗涤后，加入相应的二抗，再次洗涤。使用增强化学发光（ECL）试剂显示免疫反应条带。

2.6 细胞转染与瞬时转染

针对TAGLN2的短发夹RNA（shRNA）序列和阴性对照shRNA由上海吉凯基因化学技术有限公司构建。将人全长CXCR7互补DNA（cDNA）克隆到GV341载体中用于过表达（OE），同时设置过表达阴性对照。根据制造商方案，使用预包装有Polybrene（终浓度：5 μg/mL）的慢病毒颗粒转导TPC-1和BCPAP细胞。基于平衡转导效率和细胞活力的初步优化实验，TPC-1细胞的最佳感染复数（MOI）设为20，BCPAP细胞设为10。

2.7 细胞迁移与侵袭实验

使用置于24孔板中的Transwell小室（8 μm孔径）进行细胞迁移和侵袭实验。对于侵袭实验，上室膜预先包被Matrigel（BD Biosciences），用无血清1640培养基按1:9稀释至终浓度约0.8-1.2 mg/mL。将5 × 10⁴个细胞接种于上室（无血清培养基），下室加入含10%胎牛血清（FBS）的培养基。孵育24小时后，移除上室中未迁移或未侵袭的细胞。膜下表面的迁移或侵袭细胞用4%多聚甲醛固定20分钟，并用结晶紫染色30分钟。在显微镜下随机选择视野计数穿膜细胞数。

2.8 Western blotting

简要来说，细胞（TPC-1和/或BCPAP）用含有蛋白酶和磷酸酶抑制剂的RIPA裂解缓冲液裂解。离心后，取等量蛋白质（20-30 μg）通过SDS-PAGE分离，转移到PVDF膜上，用5%脱脂牛奶封闭，然后与p-Smad2（1:1000）、Smad2（1:1000）和GAPDH（1:5000）一抗孵育。随后，膜与HRP标记的二抗孵育，使用ECL试剂显示蛋白条带。使用ImageJ软件量化条带强度，并归一化至内参（GAPDH）。

2.9 生物信息学分析

为研究CXCR7和TAGLN2在PTC中的临床相关性和预后价值，通过UCSC Xena Hub回顾性获取了来自癌症基因组图谱（TCGA）数据库的510例PTC病例的转录组和临床数据。以转录本每百万读数（TPM）标准化的转录组数据作为ssGSEA计算的基础。具体而言，使用R语言（版本4.4.2）中的GSVA包计算了Hallmark、基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）基因集的ssGSEA分数。随后，进行相关性分析以评估CXCR7和TAGLN2的转录丰度与其各自ssGSEA分数之间的关联。通过Kaplan-Meier（K-M）生存分析进一步评估CXCR7和TAGLN2表达水平的预后意义。

2.10 统计方法

使用SPSS（版本23.0）分析内部数据，使用R（版本4.4.2）分析TCGA数据。Fisher精确检验主要用于PTC与良性甲状腺组织之间的比较，以及与临床病理特征（淋巴结转移、年龄、性别、肿瘤大小、包膜浸润、多灶性）的关联分析，尤其是在期望频数较低时。卡方检验在适用情况下使用。Spearman相关性分析评估CXCR7和TAGLN2蛋白表达之间的关系。所有关联分析均报告效应量（比值比，ORs）及其95%置信区间（CIs）。使用单因素方差分析（one-way ANOVA）及事后检验评估对照组、沉默组和过表达组之间的组间差异。数据以均值±标准差表示。双侧p<0.05认为有统计学意义。使用TCGA PTC数据库的转录组和临床数据。Spearman相关性分析CXCR7/TAGLN2基因表达与TGF-β通路基因集（Hallmark, GO, KEGG）的关系。通过Kaplan-Meier曲线（按中位表达量分层）评估总生存期。

3 结果

3.1 CXCR7和TAGLN2在PTC中的表达水平及临床预后意义

在PTC组织中，CXCR7和TAGLN2的阳性表达率分别为84.38%（54/64）和79.69%（51/64），显著高于良性甲状腺对照组织。使用Fisher精确检验，CXCR7的比值比为124.200（95% CI: 15.016~1027.265, p < 0.001），TAGLN2的比值比为90.231（95% CI: 11.131~731.464, p < 0.001）。

为评估CXCR7和TAGLN2在PTC中的临床预后意义，我们对TCGA甲状腺乳头状癌（PTC）患者队列进行了Kaplan-Meier生存分析。CXCR7的高表达与PTC患者较差的总生存期显著相关。Kaplan-Meier生存曲线显示，CXCR7高表达患者的总生存期短于低表达患者，趋势具有统计学意义（p=0.017）。相比之下，虽然TAGLN2表达在我们内部队列中与淋巴结转移显著相关，但其在TCGA队列中与患者总生存期的关联无统计学意义（p=0.308）。这表明TAGLN2可能通过侵袭和转移促进肿瘤侵袭性，但其在该数据集中对总生存期的直接预后价值不明显。

3.2 CXCR7和TAGLN2表达与PTC临床病理特征的相关性

我们检测了CXCR7和TAGLN2表达水平与PTC临床病理特征的关系。CXCR7和TAGLN2的高表达与淋巴结转移显著相关（p < 0.05），但与其他临床病理参数（包括年龄、性别、肿瘤大小、包膜浸润或多灶性）无关。Fisher精确检验确定，CXCR7和TAGLN2的高表达与淋巴结转移显著相关。CXCR7的比值比为6.800（95% CI: 1.313-35.230, p = 0.016），TAGLN2的比值比为6.111（95% CI: 1.489-25.087, p = 0.011）。此外，相关性分析显示，PTC组织中CXCR7和TAGLN2表达水平之间存在显著正相关（R = 0.353, p = 0.004）。

3.3 共免疫沉淀实验确定细胞内CXCR7和TAGLN2存在相互作用

为确定CXCR7和TAGLN2是否在细胞内相互作用，进行了共免疫沉淀（Co-IP）实验。使用CXCR7抗体或IgG作为阴性对照，对TPC-1细胞的总蛋白提取物进行免疫沉淀。所得免疫复合物通过Western blotting使用CXCR7和TAGLN2抗体进行分析。与IgG对照相比，在CXCR7免疫沉淀物中检测到明显更强的TAGLN2信号，表明CXCR7和TAGLN2在PTC细胞中形成蛋白复合物。

3.4 免疫荧光共定位确定CXCR7和TAGLN2蛋白的细胞内定位关系

进行免疫荧光共定位染色以评估CXCR7和TAGLN2的亚细胞分布。CXCR7和TAGLN2用绿色荧光标记，细胞骨架用罗丹明标记的鬼笔环肽染色。CXCR7和TAGLN2的荧光信号在细胞内显示出相似的空间分布模式，提示两种蛋白具有一致的亚细胞定位。

3.5 研究“过表达”CXCR7和“沉默”TAGLN2基因共转染对PTC细胞侵袭和转移功能的影响

为探索CXCR7和TAGLN2在PTC中的功能相互作用，我们建立了稳定的TAGLN2敲低（KD）细胞系，并将其与CXCR7过表达（OE）相结合。

迁移实验：在TPC-1和BCPAP细胞系中均进行了Transwell迁移实验。在TPC-1细胞中，与空载体对照（NC+NC）相比，沉默TAGLN2显著减少了细胞迁移（NC+NC vs. NC+KD: 197.00 ± 2.082 vs. 128.00 ± 1.000, p < 0.001）。类似地，BCPAP细胞中TAGLN2敲低导致迁移显著减少（NC+NC vs. NC+KD: 348 ± 42.5 vs. 153.3 ± 36, p = 0.001）。此外，在TAGLN2敲低背景下引入CXCR7过表达（OE+KD），与单独KD组相比，显著增加了TPC-1和BCPAP细胞的迁移（NC+KD vs KD+OE: TPC-1: 128.00 ± 1.000 vs. 178.00 ± 4.509, p < 0.001; BCPAP: 153.3 ± 36 vs. 266 ± 34.8, p = 0.011）。这些在两种PTC细胞系中一致的结果强烈提示，CXCR7通过抵消TAGLN2的抑制效应促进PTC细胞迁移和侵袭。

侵袭实验：接下来我们评估了细胞侵袭。在TPC-1细胞中，与对照组相比，TAGLN2沉默显著降低了侵袭（NC+NC vs. KD+NC: 106.00 ± 4.583 vs. 57.00 ± 1.732, p < 0.001）。在BCPAP细胞中也观察到类似现象，TAGLN2敲低显著降低了侵袭（NC+NC vs. KD+NC: 285 ± 37.5 vs. 122 ± 12.5, p < 0.001）。在TAGLN2沉默细胞中共同表达CXCR7（KD+OE）后，与单独TAGLN2沉默组相比，两种细胞系的细胞侵袭均显著增加（NC+KD vs KD+OE: TPC-1: 57.00 ± 1.732 vs. 70.00 ± 5.132, p = 0.009; BCPAP: 122 ± 12.5 vs. 226 ± 19.5, p = 0.009）。

3.6 生物信息学分析进一步评估CXCR7与TAGLN2相互作用的相关信号通路

我们通过系统性大数据挖掘对CXCR7和TAGLN2在肿瘤中表达的生物学决定因素进行了初步分析。使用来自CCLE数据库的12个甲状腺癌细胞系的测序数据和来自TCGA数据库的510例甲状腺癌病例的数据，计算了Hallmark、GO（生物过程）和KEGG基因集的ssGSEA分数。随后进行了CXCR7和TAGLN2的转录丰度与这些基因集ssGSEA分数之间的相关性分析。结果显示，在TCGA队列中，TGF-β信号通路（涵盖Hallmark、GO（BP）和KEGG基因集）与CXCR7和TAGLN2的转录水平均呈正相关，提示CXCR7和TAGLN2的生物学效应可能受TGF-β信号通路调控。

3.7 CXCR7/TAGLN2-TGF-β/Smad2轴促进PTC侵袭性

我们的研究结果阐明了一种新机制，即CXCR7和TAGLN2主要通过经典的TGF-β/Smad2信号通路协同促进PTC进展。在TPC-1和BCPAP细胞系中的功能实验一致表明，沉默TAGLN2显著减弱了细胞迁移和侵袭，突出了TAGLN2在支持这些侵袭性表型中的作用。关键的是，在TAGLN2敲低细胞中重新表达CXCR7挽救了这些抑制效应，表明CXCR7通过抵消TAGLN2的抑制作用促进迁移和侵袭。从机制上讲，这些功能观察得到了Western blot分析的有力支持。在两种细胞系中，TAGLN2敲低导致磷酸化Smad2（p-Smad2）水平显著降低，证实了TAGLN2对TGF-β信号通路基础激活的贡献。此外，在TAGLN2沉默细胞中重新引入CXCR7恢复了p-Smad2水平，证明CXCR7 actively promotes TGF-β/Smad2 signaling。因此，我们确定CXCR7和TAGLN2的功能轴，通过激活Smad2通路，是PTC侵袭性的关键驱动因素，这一机制在两种不同的PTC细胞模型中得到了一致验证。

4 讨论

趋化因子是一个小分泌蛋白家族，通过结合特定受体调节细胞迁移，形成一个影响肿瘤发展的复杂网络。越来越多的证据强调了趋化因子及其受体在肿瘤发生中的关键作用，特别是在引导癌细胞从原发部位向远处器官迁移方面。在肿瘤微环境（TME）中，由肿瘤细胞和基质细胞产生的趋化因子作用于靶细胞，调节TME，驱动肿瘤特异性免疫反应，并促进肿瘤侵袭、转移、血管生成以及对化疗和放疗的抵抗。

趋化因子系统，特别是SDF-1/CXCR7轴，在协调肿瘤微环境和调节癌细胞行为方面起着关键作用。SDF-1是淋巴细胞的有效趋化剂，在甲状腺癌中异常表达，有助于肿瘤发生，并可作为潜在的预后生物标志物。作为SDF-1的清道夫受体，CXCR7微调TME内的趋化因子梯度，从而影响肿瘤细胞的方向性迁移，并可能调节免疫细胞浸润。我们前期的研究已确定CXCR7是PTC发生发展、侵袭和转移的关键促进因子，突出了其在疾病进展中的重要性。为进一步阐明CXCR7介导效应的分子机制，我们采用全面的蛋白质组学方法，使用iTRAQ结合2DLC-MS/MS分析了过表达CXCR7的PTC细胞相对于未转染对照的蛋白质表达变化。这项无偏分析鉴定出几个显著上调的蛋白质，包括FN1、BSG、PPL、SERPINB5、TAGLN2和CD147。其中，TAGLN2因其在CXCR7过表达时显著上调以及在PTC转移中的作用了解有限而引起我们特别关注。这一观察结果引导我们研究TAGLN2作为CXCR7促转移效应的潜在介质和候选治疗靶点。

TAGLN2最初被鉴定为一种参与稳定肌动蛋白应力纤维的细胞骨架蛋白，现已发展成为癌症生物学中的多功能调节因子，有助于驱动肿瘤发生和疾病进展的多种过程。TAGLN2表达升高在多种恶性肿瘤中常见，包括膀胱癌、胰腺癌、结直肠癌、肾细胞癌、食管癌、胆管癌和胃癌，并且与增强的肿瘤细胞增殖、侵袭、转移和上皮-间质转化（EMT）相关。这些效应主要是通过调节关键信号通路介导的，强调了TAGLN2整合多种细胞信号和协调复杂细胞反应的能力。在PTC中，TAGLN2也高表达，并通过至少部分激活Rap1/PI3K/AKT信号通路促进细胞迁移和侵袭。虽然这些发现突出了TAGLN2在PTC进展中的重要性，但CXCR7与TAGLN2之间的相互作用，以及它们在调控PTC侵袭和转移中潜在协同作用的详细分子机制仍知之甚少。这一知识空白为未来研究提供了一个关键方向，旨在阐明驱动PTC转移的分子网络并识别新的治疗靶点。

我们最初的分析侧重于表征CXCR7和TAGLN2在PTC组织中的表达模式，揭示了与癌旁非肿瘤甲状腺组织相比，两种蛋白均显著上调。此外，CXCR7和TAGLN2的高表达水平与PTC患者的淋巴结转移显著相关，为它们参与PTC进展提供了有力证据。鉴于淋巴结转移是PTC不良预后的公认预测因子，这些发现强调了CXCR7和TAGLN2的临床相关性，并提示它们作为预后生物标志物的潜在用途。CXCR7和TAGLN2的协同过表达，及其与转移性疾病的关联，暗示了它们在促进PTC侵袭和转移中的协同作用，而非独立贡献。

CXCR7和TAGLN2与淋巴结转移的显著关联强调了它们在侵袭性PTC背景下的临床相关性。为进一步研究其预后价值，我们使用TCGA PTC患者数据进行了Kaplan-Meier生存分析。我们的分析显示，CXCR7的高表达与较差的总生存期显著相关（p = 0.017），表明CXCR7水平升高可预测PTC患者较差的临床结局。这一发现与我们体外研究中观察到的CXCR7的促侵袭和促转移作用一致，并突出了其作为高危PTC预后生物标志物的潜力。相比之下，我们的生存分析未发现TAGLN2表达水平与患者总生存期之间存在统计学显著相关性（p = 0.308）。虽然TAGLN2在机制上与细胞侵袭相关，但其在该TCGA队列中对总生存期的直接预后价值不显著。这一观察结果可能归因于几个因素：首先，TAGLN2的主要作用可能是促进肿瘤进展的早期阶段，如侵袭和向淋巴结播散，这与其与转移的相关性一致。其对长期总生存期的直接影响可能不那么明显或受其他因素影响。其次，考虑到PTC通常预后良好，识别对总生存期有显著影响的预后标志物具有挑战性，TAGLN2的效应可能更微妙、依赖于背景或在特定患者亚组中显现。可能需要进一步的研究，例如使用更大的、分层的队列或通过将TAGLN2与其他标志物结合分析，来充分阐明其预后意义。

为探索CXCR7和TAGLN2在PTC转移中关联的机制基础，我们研究了直接蛋白质-蛋白质相互作用的可能性。免疫荧光共定位分析证明了CXCR7和TAGLN2在PTC细胞内的空间邻近性，提示可能存在物理相互作用。这一观察结果通过共免疫沉淀实验得到证实，该实验验证了PTC细胞中存在包含CXCR7和TAGLN2的蛋白复合物。CXCR7和TAGLN2之间直接分子相互作用的鉴定建立了一个关键的机制联系，表明这些蛋白可能作为一个复合物发挥作用，以调控PTC侵袭和转移的基础细胞过程。这种相互作用可能调节两种蛋白的信号特性，导致下游通路激活增强，从而促进细胞迁移、侵袭和存活。这些发现为未来研究表征CXCR7-TAGLN2复合物的结构和功能特征，以及开发旨在破坏其形成或活性的靶向策略奠定了基础，可能为PTC提供改进的治疗方法。

TGF-β信号转导是肿瘤进展的核心调节因子，对癌细胞施加多效性影响，共同促进恶性行为。通过自分泌和旁分泌信号机制，TGF-β调节上皮细胞表型，增强肿瘤细胞侵袭和播散，促进干细胞样特性，并有助于化疗耐药。鉴于TGF-β在癌症发病机制中的明确作用，我们探索了其调控CXCR7和TAGLN2在PTC中协同活性的潜力。这一假设的临床意义得到了Zhang等人研究结果的支持，他们证明TGF-β1和磷酸化Smad3（p-Smad3）在PTC组织中的表达水平显著高于正常甲状腺组织，且TGF-β1表达与淋巴结转移呈强正相关。这些数据表明TGF-β信号在驱动PTC侵袭特征中起关键作用。结合现有的将TGF-β信号与TAGLN2和