AXL受体激活通过抑制NLRP3炎症小体改善肝脏免疫微环境以减轻缺血再灌注损伤

《Cellular & Molecular Biology Letters》：AXL activation governs the liver microenvironment to protect ischemia–reperfusion injury by suppressing NLRP3 inflammasome

本研究针对肝脏缺血再灌注（I/R）损伤中巨噬细胞焦亡与免疫微环境紊乱的机制问题，通过激活AXL受体调控IRE1-XBP1s-NLRP3通路，揭示其抑制巨噬细胞焦亡并促进M2型极化的新机制，为临床干预肝移植术后损伤提供潜在治疗靶点。

　　

肝脏手术和移植过程中难以避免的缺血再灌注（I/R）损伤，是导致术后肝功能衰竭和移植物功能障碍的主要原因。这一病理过程涉及复杂的炎症反应，其中巨噬细胞介导的焦亡（pyroptosis）被认为是关键驱动因素。然而，焦亡如何影响巨噬细胞重编程和肝脏微环境，以及是否存在关键分子靶点可调控这一过程，仍是未解之谜。近期发表在《Cellular & Molecular Biology Letters》的研究论文，由刘登等人揭示了AXL受体 tyrosine kinase在调控肝脏免疫微环境中的核心作用，为减轻I/R损伤提供了新的理论依据和治疗策略。

研究人员通过临床肝移植样本分析、小鼠I/R模型构建、细胞缺氧/复氧（H/R）处理、巨噬细胞清除实验以及AXL激动剂（Gas6）和抑制剂（R428）的干预，结合蛋白质免疫印迹、流式细胞术、免疫荧光和电子显微镜等技术，系统阐明了AXL-NLRP3轴在肝脏I/R中的调控机制。

AXL抑制与NLRP3激活在临床和小鼠I/R模型中显著相关

通过对肝移植患者样本的分析，发现磷酸化AXL（p-AXL）水平在移植后显著降低，且与肝损伤指标（ALT、AST）升高及NLRP3、C-Casp-1、C-GSDMD等焦亡蛋白表达增加呈负相关。小鼠I/R模型进一步证实，p-AXL在再灌注6小时时最低，而焦亡蛋白表达此时最高，提示AXL抑制可能与NLRP3炎症小体激活共同促进I/R损伤。

AXL激活抑制NLRP3介导的焦亡并减轻肝损伤

使用AXL天然配体Gas6激活AXL可显著减少小鼠肝坏死面积、降低ALT/AST水平，并抑制NLRP3、C-Casp-1、C-GSDMD表达及IL-1β、IL-18释放；而AXL抑制剂R428则加剧上述损伤。表明AXL激活通过抑制NLRP3炎症小体活性减轻I/R损伤。

AXL主要调控巨噬细胞而非肝细胞的焦亡过程

体外H/R实验显示，肝细胞主要表现为凋亡而非焦亡，且AXL调控对其焦亡影响不显著；而巨噬细胞则明显发生焦亡，且AXL激活显著抑制其NLRP3激活及细胞因子释放。扫描电镜清晰显示巨噬细胞膜孔形成特征，而肝细胞未见类似变化。

AXL调控肝细胞焦亡依赖于巨噬细胞

体内实验发现，巨噬细胞清除后，AXL激活或抑制不再影响肝细胞焦亡蛋白表达。共培养实验进一步证实，仅当巨噬细胞经Gas6处理时，肝细胞焦亡被抑制；而肝细胞自身AXL调控对焦亡无影响。表明AXL通过巨噬细胞间接调控肝细胞损伤。

AXL激活改善肝脏免疫微环境并促进巨噬细胞M2极化

Gas6处理降低促炎因子（TNF-α、IL-6）水平，增加抗炎因子（IL-4、IL-10）分泌，减少中性粒细胞浸润，并促进单核来源巨噬细胞（MoDMs）向Ly6c^low修复表型转化。流式细胞术显示AXL激活增加CD206⁺ M2型巨噬细胞比例，且该效应在巨噬细胞清除后消失。

AXL通过抑制IRE1-XBP1s-NLRP3通路促进M2极化

机制研究表明，AXL激活抑制内质网应激关键分子IRE1-XBP1s通路，进而降低NLRP3转录激活。使用XBP1s抑制剂4μ8C可逆转R428诱导的焦亡和M1极化；而XBP1s激动剂IXA4则拮抗Gas6的保护作用。证实AXL通过IRE1-XBP1s-NLRP3轴驱动巨噬细胞向M2表型转化。

结论与意义

该研究首次揭示AXL在肝脏I/R损伤中通过抑制IRE1-XBP1s-NLRP3通路，减少巨噬细胞焦亡并促进其向M2型极化，从而改善肝脏免疫微环境。这不仅深化了对免疫代谢重编程机制的理解，还为临床干预肝移植损伤提供了新靶点——AXL激动剂Gas6或可作为潜在治疗策略，通过调控巨噬细胞功能状态减轻I/R相关炎症损伤。