选定的民族药用植物与甲硝唑联合使用对耐甲硝唑的幽门螺杆菌（H. Pylori）的协同作用及其尿素酶抑制机制

《South African Journal of Botany》：Synergistic effects of selected ethnomedicinal plants with Metronidazole against resistant H. Pylori, and their urease inhibition mechanism

本研究评估了传统药用植物对耐甲硝唑幽门螺杆菌的临床分离株的疗效，发现甲酸和乙醚提取物Terminalia chebula及Nigella sativa的MIC分别为125 μg/mL和250 μg/mL，并显示与甲硝唑协同作用。通过GC-MS鉴定出关键活性成分如thymoquinone和chebulinic acid，证实其非竞争性尿酶抑制机制。该研究为开发新型抗幽门螺杆菌疗法提供了依据。

　　近年来，胃部疾病尤其是胃溃疡的治疗面临严峻挑战，主要原因是幽门螺杆菌（*Helicobacter pylori*）的耐药性不断上升。其中，对甲硝唑（Metronidazole）的耐药性尤为突出，使得传统治疗方法的效果逐渐减弱。因此，寻找新的治疗策略和有效的替代疗法成为当务之急。在这一背景下，本研究评估了多种民族药用植物对耐药性幽门螺杆菌的治疗潜力，特别是它们在抗菌活性、尿素酶抑制机制以及与甲硝唑协同作用以逆转耐药性方面的表现。

本研究聚焦于多种具有传统药用价值的植物，包括薄荷（*Mentha longifolia*）和龙胆（*Gentiana lutea*）等，这些植物在印度、巴尔干地区以及中亚等地被广泛使用。在不同文化中，这些植物被认为具有治疗胃部疾病、胃溃疡和癌症的潜力。例如，薄荷在传统医学中被用于缓解胃部不适，而龙胆的根部则被认为有助于刺激食欲、促进消化和改善消化道健康。此外，黑种草（*Nigella sativa*）和印度木棉（*Terminalia chebula*）等植物也被广泛应用于多种疾病，如糖尿病、癌症、溃疡和炎症等。研究还发现，这些植物的提取物在不同溶剂中表现出不同的生物活性，其中甲醇提取物和乙酸乙酯提取物在抑制耐药性幽门螺杆菌方面表现尤为突出。

为了评估这些植物提取物的抗菌活性，研究采用了平板扩散法（disc diffusion assays）和微量稀释法（microbroth dilution method）。其中，平板扩散法用于测定最小抑菌浓度（MIC）和对当前抗溃疡抗生素的耐药性。结果显示，甲醇提取物和水提取物在抑制甲硝唑耐药性临床分离株方面表现出显著的抗菌活性，MIC值为125 μg/mL。此外，乙酸乙酯提取物和水提取物在抑制幽门螺杆菌耐药性分离株方面也表现出一定的效果，MIC值为250 μg/mL。这些数据表明，某些植物提取物可能在对抗耐药性幽门螺杆菌方面具有潜在的应用价值。

在探讨植物提取物与甲硝唑的协同作用时，研究采用了一个检查板方法（checkerboard approach），以评估两者的相互作用类型。结果显示，植物提取物与甲硝唑之间存在完全的协同作用，这表明它们的联合使用可能提高幽门螺杆菌的清除率。此外，时间-杀灭动力学（time-kill kinetics）研究进一步揭示了这种协同作用是时间和浓度依赖性的。这为未来的联合用药策略提供了理论依据，也表明植物提取物可能在临床治疗中发挥重要作用。

尿素酶抑制机制的评估是本研究的另一重点。幽门螺杆菌的尿素酶被认为是其重要的致病因子之一，它能够引发强烈的免疫反应，吸引吞噬细胞，并促进细胞因子的释放。为了评估植物提取物的尿素酶抑制能力，研究采用了靛酚蓝比色法（Indophenol spectrophotometric method）和林纳韦伯-伯克曲线（Lineweaver-Burk plots）。结果显示，印度木棉的甲醇提取物在尿素酶抑制方面表现出最强的活性，其IC50值为169.23 ± 1.91 μg/mL，并显示出非竞争性抑制机制。其次是印度木棉的乙酸乙酯提取物和黑种草的甲醇提取物，它们的IC50值分别为174 ± 2.76和178.10 ± 3.52 μg/mL。这些数据表明，植物提取物在抑制尿素酶方面具有不同的效果，且其抑制机制可能因植物种类和提取物类型而异。

此外，研究还对植物提取物的化学成分进行了分析，使用气相色谱-质谱联用技术（GC-MS）对其中的活性成分进行了定量。结果显示，提取物中包含多种具有生物活性的化合物，如百里酚（thymol）、肉豆蔻酸甲酯（methyl palmitate）、硫代奎宁（thymoquinone）、莰烯（cymene）、姜烯（curcumene）、没食子酸（pyrogallol）、诃子酸（chebulinic acid）、诃子苷酸（chebulagic acid）和诃子酸（chebulic acid）。这些化合物的化学组成与提取物的生物活性之间存在一定的相关性，表明植物的药用价值可能与其化学成分密切相关。

综上所述，本研究发现某些民族药用植物提取物在对抗耐药性幽门螺杆菌方面具有显著的抗菌活性和尿素酶抑制能力，并且与甲硝唑的协同作用能够提高幽门螺杆菌的清除率。这些结果为未来的胃溃疡治疗策略提供了新的思路，也表明植物提取物可能作为标准抗生素的替代或辅助药物，在临床实践中发挥重要作用。然而，尽管已有一定的研究进展，关于这些植物提取物如何逆转甲硝唑耐药性以及其尿素酶抑制机制的详细探讨仍需进一步深入。因此，本研究的发现不仅填补了相关领域的知识空白，也为寻找新的治疗方案提供了科学依据。