基于重组抗体的食蟹猴IL-8血清高灵敏度ELISA检测方法的建立与验证

《Analytical Biochemistry》：A Sensitive ELISA Made with Recombinant Antibodies for Cynomolgus IL-8 in Serum

本文开发并验证了一种用于定量检测食蟹猴血清中白细胞介素-8（IL-8）的灵敏酶联免疫吸附测定法（ELISA）。该方法采用两种重组抗体和替代基质，构建夹心ELISA，其定量下限（LLOQ）达4.69 pg/mL，并具备良好准确度与精密度，且不受基质干扰，为食蟹猴非临床研究提供了可靠分析工具。

　　

Highlight

Animal Ethics

所有动物实验均遵循ARRIVE指南，并依据《动物（科学程序）法案1986》及相关指南操作。研究方案已获得上海药物研究所（批准号：2022-12-GLK-33用于抗体生成；2023-08-CDSER-07用于血清采集）和中山药物创新研究所（批准号：略）机构动物护理与使用委员会的正式批准。

Calibration curve

使用在10% PNRS-DB中制备的、浓度范围从4.69 pg/mL到300 pg/mL的七个非零标准品来构建校准曲线。浓度-响应关系采用权重因子为1/Y²的五参数逻辑模型进行拟合。验证期间获得的所有校准曲线（N=6）均符合接受标准（见补充表S3）。一个典型的ELISA校准曲线如图2所示。

X轴代表校准品的标称浓度。

Discussion

细胞因子参与所有炎症疾病的效应阶段，既是治疗靶点，也是疾病严重程度的生物标志物。在临床实践中，细胞因子的定量分析对于理解生理和病理过程至关重要，并可用于辅助诊断、治疗和预后判断。例如，在COVID-19研究中，细胞因子水平的变化与疾病严重程度相关，监测这些水平有助于评估患者状况。

CRediT authorship contribution statement

Leting Yang: 撰写初稿，可视化，验证，软件，方法学。

Qiuping Qin: 审阅与编辑，监督，形式分析，概念化。

Xia Han: 撰写初稿，验证，软件，方法学。

Yuhao Wang: 验证，方法学。

Xiao Zhu: 验证，软件，方法学。

Yan Chen: 监督，概念化。

Junjiu Xu: 监督，概念化。

Likun Gong: 监督，概念化。

Funding

我们感谢中山市人民政府和中国科学院上海药物研究所为“中山药物创新研究所”的建立所提供的实验经费和设备支持。

Declaration of Competing Interest

作者声明不存在相关的财务或非财务利益冲突。没有收到为协助准备本手稿的任何资助。作者声明不存在任何已知的、可能影响本报告工作的竞争性财务利益或个人关系。