利用YY超雄技术及amh基因验证培育耐盐粉红罗非鱼全XY群体的研究

《Aquaculture》：Generating YY supermales and validating amh as the sex-determining gene in salt-tolerant pink tilapia

本综述系统阐述了通过开发LG23染色体上的性别连锁DNA标记，结合17β-雌二醇（E2）诱导性逆转技术，成功培育YY超雄鱼并生产生长性能提升9.93%的全XY群体。研究通过qRT-PCR和CRISPR/Cas9基因敲除实验验证了amh基因在性别决定中的核心作用，为水产养殖提供了可持续的遗传控制方案。

　　

亮点

粉红罗非鱼性连锁 indel 标记的验证

通过设计位于amh基因上游的引物，我们在LG23染色体上开发出性连锁DNA标记。该标记在XX、XY和YY个体中分别呈现1295 bp、1295/1134 bp混合条带及1134 bp单一条带（图1）。对192尾雄性和192尾雌鱼的基因分型显示，分子性别鉴定准确率达96.88%，为全雄群体选育提供了关键技术支撑。

YY超雄鱼的规模化生产

通过投喂含17β-雌二醇（E₂，120 mg/kg）的饲料对5-30日龄仔鱼进行性逆转，获得214尾XY生理雌鱼。将其与XY雄鱼交配后，在10个家系中培育出231尾YY超雄鱼。其中5尾YY超雄鱼与XX雌鱼交配产生的全XY子代，平均体重较混养群体提升9.93%，较全雌群体显著增加29.30%。值得注意的是，一个XY家系中仅85.3%个体表现为雄性表型，提示性别决定机制存在家系特异性变异。

amh基因的功能验证

qRT-PCR分析显示amh在雄性性腺中特异性高表达。通过CRISPR/Cas9技术敲除amh基因后，XY基因型个体出现性逆转现象，直接证实amh是粉红罗非鱼的主要性别决定基因。这一发现为理解鱼类性别分化通路提供了新视角。