E26转化特异性转录因子3在卵巢癌中起到关键作用：通过抑制原肌球蛋白2（tropomyosin 2）来促进Yes相关蛋白1（Yes-associated protein 1）所驱动的顺铂（cisplatin）耐药性

《Anti-Cancer Drugs》：E26 transformation-specific transcription factor 3 tips the balance: repressing tropomyosin 2 to fuel Yes-associated protein 1-driven cisplatin resistance in ovarian cancer

肝细胞癌中lenvatinib耐药机制研究发现NCOA5-AKT-mTOR通路激活是关键，联用mTOR抑制剂everolimus可逆转耐药并增强疗效。

　　肝癌是一种全球范围内较为常见的恶性肿瘤，尤其在肝细胞癌（HCC）中，其治疗难度较大，预后效果较差。随着医学研究的不断深入，多种靶向治疗药物被开发并应用于临床，其中lenvatinib作为一种多靶点酪氨酸激酶抑制剂，因其能够有效抑制血管内皮生长因子受体（VEGFR）和成纤维细胞生长因子受体（FGFR）等多种信号通路，被批准作为HCC的一线治疗药物。然而，尽管lenvatinib在治疗初期表现出良好的疗效，但其在临床应用中仍面临一个严峻的问题——药物耐受性。这种耐受性的出现不仅限制了药物的长期治疗效果，也对患者的生存质量产生了严重影响。因此，明确lenvatinib耐受性的分子机制，成为提高其治疗效果和延长患者生存期的关键。

本研究通过建立lenvatinib耐药的HCC细胞模型，探索了耐药性形成的具体机制。研究者首先对多种HCC细胞系进行了lenvatinib敏感性测试，发现Hep3B和Huh7细胞对lenvatinib表现出较高的敏感性。随后，通过逐步增加药物浓度，研究人员成功建立了具有耐药性的HCC细胞株，命名为Hep3B LEN-RE和Huh7 LEN-RE。这些细胞株在相同浓度的lenvatinib作用下，其增殖能力显著增强，表明耐药性的形成可能与某些基因的异常表达有关。

为了进一步明确耐药性的分子基础，研究团队采用了下一代测序技术，对耐药细胞与对照细胞进行了基因表达谱分析。结果显示，有531个基因在耐药细胞中发生了显著变化，其中NCOA5（核受体共激活因子5）的表达水平显著升高。这一发现提示NCOA5可能在lenvatinib耐药性中起着重要作用。为了验证这一假设，研究者通过病毒转染技术降低了NCOA5的表达水平，并观察其对细胞增殖和耐药性的影响。结果表明，NCOA5的表达下调显著增强了细胞对lenvatinib的敏感性，进一步支持了NCOA5在耐药机制中的关键作用。

此外，研究团队还通过Western blot技术检测了耐药细胞中多个信号通路相关蛋白的表达情况。结果显示，NCOA5的激活与AKT和mTOR信号通路的异常激活密切相关。具体来说，耐药细胞中AKT和mTOR的磷酸化水平显著升高，这表明NCOA5可能通过调控AKT-mTOR轴来促进细胞的耐药性。进一步的实验还发现，AKT的激活能够增强PD-L1的表达，而PD-L1是免疫逃逸的重要标志之一。因此，NCOA5可能通过多种机制共同作用，导致HCC细胞对lenvatinib产生耐受性。

为了探索逆转lenvatinib耐药性的可能策略，研究者还评估了lenvatinib与mTOR抑制剂everolimus的联合治疗效果。通过体外和体内实验，研究团队发现这种联合治疗能够显著增强对HCC细胞的抑制作用，特别是在耐药细胞模型中表现出更强的协同效应。这表明，通过抑制mTOR信号通路，可能有效阻断NCOA5介导的耐药机制，从而提高lenvatinib的治疗效果。同时，研究者还评估了lenvatinib与ERK抑制剂trametinib的联合治疗效果，发现这种组合在某些情况下也能显著增强治疗效果，尽管其作用机制可能与mTOR抑制剂有所不同。

为了进一步验证NCOA5在HCC患者中的表达情况及其与治疗反应的关系，研究者对临床样本进行了免疫组织化学分析。结果显示，耐药患者的肿瘤组织中NCOA5的表达水平显著高于对治疗敏感的患者。此外，生存分析表明，NCOA5高表达的HCC患者往往具有较差的预后。这些发现不仅揭示了NCOA5在HCC耐药性中的重要性，也为未来的临床治疗策略提供了新的思路。

在体外实验中，研究人员通过平板克隆实验和划痕实验评估了NCOA5表达变化对细胞增殖和迁移能力的影响。结果显示，NCOA5的表达下调显著抑制了细胞的增殖和迁移能力，表明该基因在细胞的生长和扩散过程中起着关键作用。而在体内实验中，研究人员将NCOA5表达下调的细胞植入免疫缺陷小鼠体内，发现其形成的肿瘤体积明显小于对照组，进一步支持了NCOA5在HCC进展中的作用。

为了评估联合治疗的效果，研究团队还建立了小鼠皮下肿瘤模型，并对不同治疗方案进行了比较。结果显示，lenvatinib与everolimus的联合治疗在抑制肿瘤生长方面表现出显著的协同效应，而单独使用lenvatinib或everolimus的效果相对较弱。这种联合治疗不仅在体外实验中表现出良好的效果，也在体内实验中得到了验证。此外，研究者还发现，这种联合治疗对小鼠体重没有明显影响，说明其具有较好的安全性。

综上所述，本研究通过建立lenvatinib耐药的HCC细胞模型，结合基因表达谱分析、Western blot检测和体内实验，揭示了NCOA5在lenvatinib耐药性中的关键作用。研究发现，NCOA5的激活能够促进AKT-mTOR信号通路的异常激活，从而导致HCC细胞对lenvatinib产生耐受性。而通过联合使用mTOR抑制剂everolimus，可以有效阻断这一通路，提高lenvatinib的治疗效果。这一发现为克服HCC对lenvatinib的耐药性提供了新的治疗策略，也为未来的临床研究和药物开发奠定了基础。

此外，本研究还对NCOA5在其他癌症中的作用进行了简要回顾。已有研究表明，NCOA5在乳腺癌等其他癌症中也表现出类似的耐药机制。在乳腺癌细胞中，NCOA5的表达下调能够显著抑制细胞的增殖和迁移能力，同时增强细胞的粘附性。这些发现提示NCOA5可能在多种癌症中具有相似的生物学功能，为跨癌种的研究提供了参考价值。

在临床应用方面，研究团队还对实际患者进行了分析，发现NCOA5的高表达与lenvatinib治疗的耐药性密切相关。这一发现不仅有助于理解lenvatinib耐药性的分子基础，也为未来的个体化治疗提供了依据。例如，对于NCOA5高表达的患者，可能需要在治疗方案中加入mTOR抑制剂，以提高治疗效果。而对于NCOA5低表达的患者，lenvatinib可能能够发挥更好的疗效。

从研究方法来看，本研究采用了多种实验手段，包括细胞培养、基因表达谱分析、Western blot检测、免疫组织化学分析和动物模型实验。这些方法的综合应用，不仅提高了研究的可靠性，也为深入理解耐药机制提供了多维度的证据。同时，研究团队还对实验数据进行了统计学分析，确保了研究结果的科学性和严谨性。

总的来说，本研究为理解HCC对lenvatinib的耐药机制提供了新的视角，并提出了一种有效的联合治疗策略。通过抑制NCOA5介导的AKT-mTOR通路，可以显著提高lenvatinib的治疗效果，从而为HCC患者带来更好的临床获益。这一发现不仅具有重要的理论意义，也为临床治疗提供了新的方向。未来的研究可以进一步探索NCOA5与其他耐药相关基因之间的相互作用，以及联合治疗方案在不同患者群体中的适用性和安全性。此外，研究团队还可以考虑开发针对NCOA5的特异性抑制剂，以期为HCC患者提供更精准的治疗方案。