新型INSM1(SP493)免疫组化检测技术在肺神经内分泌肿瘤诊断中的高敏感性与特异性验证

《Diagnostic Pathology》：Novel immunohistochemical assay utilizing the INSM1 (SP493) antibody demonstrates high specificity and sensitivity in detecting primary neuroendocrine lung neoplasms

本研究针对肺神经内分泌肿瘤传统诊断标志物（如Synaptophysin、Chromogranin A、CD56）敏感性与特异性不足的挑战，开发并验证了基于INSM1(SP493)抗体的新型免疫组化检测方法。研究通过对391例肺肿瘤组织微阵列分析，证实INSM1(SP493)的敏感性与特异性分别达96.8%和92.3%，显著优于传统标志物。该技术为肺神经内分泌肿瘤的精准诊断提供了更可靠的工具，尤其适用于小活检样本的鉴别诊断。

　　

肺神经内分泌肿瘤（Neuroendocrine Neoplasms, NENs）是肺部肿瘤中一类具有特殊生物学行为的疾病，包括小细胞肺癌（SCLC）、大细胞神经内分泌癌（LCNEC）、典型类癌和非典型类癌等亚型。这类肿瘤的准确诊断对治疗选择和预后判断至关重要，但传统依赖的形态学特征在低分化肿瘤或小活检样本中常显不足。目前临床常用的免疫组化标志物如Synaptophysin（突触素）、Chromogranin A（嗜铬粒蛋白A）和CD56虽广泛应用，却各有局限：Synaptophysin敏感但特异性低，Chromogranin A在低分化肿瘤中表达缺失率高，CD56则易在非神经内分泌肿瘤中交叉表达。这些缺陷促使研究人员探索更优的诊断标志物。

近年来，胰岛素瘤相关蛋白1（INSM1）作为神经内分泌分化的关键转录因子受到关注。其在胚胎神经内分泌发育中起核心作用，且在多种神经内分泌肿瘤中稳定表达，尤其对低分化肿瘤显示高敏感性。罗氏组织诊断（Roche Tissue Diagnostics）开发了基于INSM1(SP493)克隆的新型免疫组化检测方法，本研究旨在系统评估其诊断效能，并与传统标志物及另一INSM1克隆（MRQ-70）对比，以验证其临床适用性。

研究团队通过组织微阵列（TMA）技术，对391例肺肿瘤样本（包括156例神经内分泌肿瘤和220例非神经内分泌肿瘤）进行多标志物平行检测。关键实验技术包括：

1. 1.
   免疫组化染色：使用BenchMark ULTRA全自动染色平台，分别以OptiView DAB和ultraView Universal DAB检测试剂盒优化INSM1(SP493)及其他标志物（INSM1(MRQ-70)、Synaptophysin(SP11)、Chromogranin A(LK2H10)、CD56(MRQ-42)）的染色条件；
2. 2.
   样本队列构建：采用商业化TMA（来源包括Pantomics Inc.、US Biolab、Biocore USA），涵盖SCLC、类癌、腺癌（ADCA）、鳞癌（SCC）等亚型，并经H&E染色和附加标志物（TTF-1、Napsin A、p40）复核诊断；
3. 3.
   病理评估：由专业病理学家盲法评分，以核染色（INSM1）或胞质/膜染色（传统标志物）阳性为判定标准，计算敏感性、特异性及准确性。

研究结果

INSM1(SP493)抗体展示最优诊断效能

在神经内分泌肿瘤组中，INSM1(SP493)的敏感性达96.8%（151/156），特异性为92.3%（203/220），准确性94.1%。其核染色模式清晰、背景干扰低，且染色强度优于INSM1(MRQ-70)（敏感性94.9%，特异性94.1%）。

传统标志物表现逊于INSM1

Synaptophysin(SP11)、Chromogranin A(LK2H10)和CD56(MRQ-42)的敏感性分别为82.9%、78.7%和85.4%，均显著低于INSM1(SP493)。其中，Chromogranin A在低分化肿瘤中漏检率高，而Synaptophysin在17.2%的肺腺癌中出现假阳性，提示其特异性不足。

INSM1在部分非神经内分泌肿瘤中的表达

10.5%（10/95）的肺鳞癌病例显示弱INSM1阳性，但多呈局灶性弱表达，提示诊断时需结合p40等鳞癌标志物排除误导。此外，未分化癌中INSM1阳性率较高（42.9%），反映其可能潜藏神经内分泌分化特征。

结论与讨论

本研究证实INSM1(SP493)抗体在肺神经内分泌肿瘤诊断中兼具高敏感性与特异性，其核染色模式更易判读，尤其适用于小活检样本。与传统标志物相比，INSM1(SP493)能更可靠地识别低分化肿瘤（如SCLC），且交叉反应率低。尽管部分鳞癌存在弱表达，但通过联合TTF-1、p40等标志物可有效鉴别。

研究的局限性包括使用TMA而非完整组织切片、缺乏转移性肿瘤评估及大细胞神经内分泌癌（LCNEC）样本。但内部数据表明INSM1(SP493)在LCNEC中同样表达，与既往研究一致。未来需扩大样本类型、分析染色强度与分化程度的关系，以进一步优化诊断策略。

综上，INSM1(SP493)免疫组化检测为肺神经内分泌肿瘤的精准诊断提供了高效工具，建议将其纳入常规病理检测组合，以提升诊断置信度。本研究发表于《Diagnostic Pathology》，为神经内分泌肿瘤的分子病理学发展提供了重要依据。