基于烟草叶绿体工程的犬瘟热病毒核衣壳蛋白植物源亚单位疫苗研发

《Plant Cell, Tissue and Organ Culture (PCTOC)》：Plant-based vaccine development: tobacco chloroplast engineering for Canine distemper virus antigen expression

本研究针对犬瘟热病毒(CDV)疫苗的安全性与有效性需求，来自阿根廷的研究团队通过叶绿体工程技术在烟草中高效表达野生型CDV毒株(Arg26)的核衣壳蛋白(NP)。结果表明NP蛋白在叶片中积累量达0.64 mg/g鲜重(占总量白4.82%)，纯化后可诱导小鼠产生强烈的Th2型体液免疫应答，为开发经济高效的CDV亚单位疫苗提供了新策略。

　　

犬瘟热病毒(Canine distemper virus, CDV)作为一种高传染性病原体，可引发家犬及其他食肉动物的致死性疾病。为应对日益增长的疫情，研究人员利用烟草叶绿体生物反应器系统，成功表达了阿根廷野生毒株Arg26的核衣壳蛋白(nucleocapsid protein, NP)。通过基因枪轰击法将NP表达盒整合至质体基因组， Southern blot检测证实转基因稳定整合且达到同质化状态。

转基因植株与野生型相比未出现表型差异。NP蛋白主要以可溶形式存在于不同叶龄的叶片中，虽存在部分降解，但全长重组蛋白积累量达0.64 mg/g鲜重，相当于总蛋白量的4.82%。经镍亲和层析纯化后，蛋白得率为0.09 mg/g鲜重。在异源免疫方案中（皮下初免-口服加强），未添加黏膜佐剂的NP粗提物即可激发小鼠产生以Th2型IgG亚类为特征的强效体液免疫应答。该研究证实叶绿体表达系统能高效生产具有免疫原性的CDV抗原，为开发经济型亚单位疫苗奠定了技术基础。