巴基斯坦哈里普尔和阿博塔巴德地区β-地中海贫血特征的高患病率与分子谱系：对区域携带者筛查计划的启示

《Egyptian Journal of Medical Human Genetics》：High prevalence and molecular spectrum of β-thalassemia trait in Haripur and Abbottabad districts of Pakistan: implications for regional carrier screening programs

本研究针对巴基斯坦北部哈里普尔和阿博塔巴德地区β-地中海贫血携带率缺乏可靠数据的现状，通过社区家庭调查结合ARMS-PCR技术，发现当地携带率高达28%，显著高于全国水平，并首次报道该地区存在IVS I-5与FSC 8/9复合杂合突变，为区域特异性筛查和遗传咨询提供了关键分子流行病学依据。

　　

在巴基斯坦，每100个新生儿中就有5-8个携带β-地中海贫血基因，全国约有980万携带者，每年新增5000名地中海贫血重症患儿。这种由HBB基因突变引起的遗传性血液疾病，给家庭和社会带来沉重负担。然而令人担忧的是，由于文化习俗中普遍存在的近亲结婚现象，加上农村地区遗传筛查服务覆盖不足，导致这些地区的地中海贫血患病风险持续攀升。

目前巴基斯坦的地中海贫血研究多集中在城市医疗中心，对农村和半城市地区的真实疾病负担知之甚少。特别是在北部的哈里普尔和阿博塔巴德地区，虽然当地居民普遍存在近亲通婚的传统，但缺乏系统的社区层面流行病学数据。这种数据缺口使得制定针对性的预防策略变得困难重重。

为了填补这一知识空白，来自哈里普尔大学医学实验室技术系的研究团队在《Egyptian Journal of Medical Human Genetics》上发表了一项重要研究。他们采用多阶段分层随机抽样方法，从两个地区的350个村议会中选取代表性样本，通过家庭问卷调查、血液学分析和分子检测，全面评估了当地β-地中海贫血的携带率和突变谱系。

研究人员采用的主要技术方法包括：基于社区的家庭问卷调查收集社会人口学数据和家族史；全自动血细胞分析仪进行血常规检测；高效液相色谱法进行血红蛋白电泳分析；等位基因特异性扩增阻滞突变系统PCR(ARMS-PCR)技术检测五种常见β-地中海贫血突变。

研究结果

地理分布与患病率

在228名社区参与者中，64人被确认为β-地中海贫血携带者，总携带率为28%(95% CI:22-34%)。地区间差异极为显著：阿博塔巴德地区的携带率高达42.9%，而哈里普尔地区仅为13.2%。这种明显的地区差异提示遗传负担分布不均，需要制定区域特异性的筛查策略。

人口学特征分析

携带者中女性比例(58%)高于男性(42%)，但性别差异的统计学意义有限(p=0.01)。值得注意的是，64%的婚姻为近亲结婚(主要是表亲联姻)，但89%的携带者并不知道家族中有地中海贫血病史，反映出基层遗传知识普及的严重不足。

血液学特征

β-地中海贫血携带者表现出典型的血液学特征：平均红细胞体积(MCV)为63fL，平均血红蛋白含量(MCH)为20.2pg，均显著低于正常人群。血红蛋白电泳显示携带者的HbA₂水平平均为5.0%(正常值<3.5%)，HbA水平降低至94%，部分携带者HbF水平轻度升高。

分子突变谱系

ARMS-PCR分析揭示了令人惊讶的突变复杂性：IVS I-5(G→C)是最常见的突变类型，占59%；FSC 8/9(+G)占23%；特别值得注意的是，17%的携带者同时携带这两种突变，表现为复合杂合状态。其他常见突变如IVS I-1(G→T)、Cd 41/42(-TTCT)和619-bp缺失在本研究人群中均未检测到。

讨论与结论

这项研究揭示了巴基斯坦北部地区β-地中海贫血携带率的真实负担，28%的社区携带率远高于全国5-8%的估计值，特别是阿博塔巴德地区42.9%的携带率表明该地区存在明显的遗传聚集现象。近亲结婚传统与遗传筛查服务不足的共同作用，可能是导致这一高携带率的重要原因。

分子水平上的发现更具启示意义：IVS I-5突变在当地的绝对优势(59%)与巴基斯坦其他地区的研究结果一致，但复合杂合子(同时携带IVS I-5和FSC 8/9突变)的发现是本研究的重要创新点。这类携带者虽然表型上与单一突变携带者无异，但他们的后代如果继承双突变，可能产生更复杂的临床表型。这一发现对遗传咨询和产前诊断提出了更高要求。

研究结果强调，单纯依靠血液学指标进行筛查存在局限性，因为地中海贫血特征与缺铁性贫血有相似的血液学表现。血红蛋白电泳和分子诊断的必要性在资源有限的环境中更加凸显。特别是在农村地区，加强基层医疗机构的血红蛋白电泳能力建设，结合区域性突变谱系特点设计靶向ARMS-PCR检测 panel，可能是成本效益较高的筛查策略。

该研究的局限性包括仅检测了常见突变类型，可能遗漏罕见突变；复合杂合子的临床意义需要进一步研究；家族史数据依赖受访者回忆可能存在偏差。未来需要更大样本量的研究，结合全HBB基因测序，全面揭示该地区的突变谱系。

这项研究为巴基斯坦制定国家地中海贫血控制计划提供了关键的区域性数据。研究结果强烈支持在高等教育机构和中学生中开展遗传知识普及，在婚姻登记环节引入强制性婚前筛查，以及在初级卫生保健层面整合分子诊断服务的必要性。只有通过这种多层次、针对性的干预策略，才能有效降低巴基斯坦日益增长的地中海贫血疾病负担。