miR-302a-3p通过靶向抑制FGF-16加重糖尿病肾病肾小管炎症与氧化损伤的机制研究

《BMC Endocrine Disorders》：Dysregulation of miR-302a-3p in diabetic nephropathy and its role in inflammatory response

本研究针对糖尿病肾病(DN)中肾小管损伤机制不清的问题，聚焦miR-302a-3p/FGF-16调控轴，通过临床样本检测与体外实验验证，发现miR-302a-3p在DN患者血清中显著高表达且具有诊断价值(AUC=0.9168)，其通过靶向抑制FGF-16加剧高糖诱导的HK-2细胞凋亡、ROS生成及炎症因子释放，为DN的精准诊断与靶向治疗提供了新靶点。

　　

糖尿病肾病作为糖尿病最严重的微血管并发症之一，正成为全球终末期肾病的主要病因。长期高血糖会引发肾脏氧化应激、炎症反应与细胞凋亡等病理过程，最终导致肾功能不可逆损伤。尽管现有治疗手段（如血糖控制、RAAS抑制剂等）能延缓疾病进展，但无法根治。因此，探索糖尿病肾病核心发病机制，寻找有效的早期诊断标志物与干预靶点，已成为临床与基础研究的迫切需求。

在该背景下，非编码RNA尤其是微小RNA（miRNA）的调控作用备受关注。已有研究表明，miR-302a-3p在糖尿病患者中异常高表达，且其上游调控因子VEGF可能参与肾脏微血管病变与炎症微环境调节，但该分子在糖尿病肾病中的具体功能及机制尚不明确。与此同时，成纤维细胞生长因子16（FGF-16）作为FGF家族成员，在多种疾病中表现出组织保护作用，但在糖尿病肾病肾小管损伤中的角色仍有待揭示。为此，Lv等人在《BMC Endocrine Disorders》发表研究，系统揭示了miR-302a-3p通过靶向抑制FGF-16加重糖尿病肾病肾小管炎症与氧化损伤的作用机制。

本研究主要采用以下关键技术方法：收集53例DN患者与43例健康对照的血清样本，通过RT-qPCR检测miR-302a-3p表达；利用ROC曲线评估其诊断价值；构建高糖诱导的HK-2细胞模型，通过CCK-8、流式细胞术、ELISA和ROS检测分别评估细胞活力、凋亡、炎症因子和氧化应激水平；采用双荧光素酶报告基因实验验证miR-302a-3p与FGF-16的靶向关系；通过基因沉默（siRNA）及功能回复实验明确FGF-16在miR-302a-3p介导的细胞损伤中的核心作用。

The level of miR-302a-3p in DN patients and its potential diagnostic value for DN

研究结果显示，DN患者血清中miR-302a-3p水平显著高于健康对照组（P<0.0001）。ROC曲线分析显示其诊断DN的AUC值为0.9168，灵敏度与特异性分别达92.31%和76.14%，表明miR-302a-3p具备作为DN无创诊断标志物的潜力。

The level of miR-302-3p in HG-induced

在高糖诱导的HK-2细胞中，miR-302a-3p表达随时间延长而上升；转染miR-302a-3p抑制剂后可显著逆转其高表达（P<0.0001），成功构建基因干预模型。

The role of miR-302a-3p in HG-induced damage to HK-2 cells

高糖处理导致HK-2细胞活力下降、凋亡增加、ROS积累及促炎因子水平升高；而抑制miR-302a-3p可显著改善上述细胞损伤表型，说明该分子在高糖环境下具有促损伤作用。

FGF-16 is a direct target of miR-302a-3p

生物信息学预测与双荧光素酶报告实验证实miR-302a-3p可直接靶向FGF-16的3'UTR区域。临床样本中FGF-16表达下调且与miR-302a-3p水平负相关；细胞实验中miR-302a-3p模拟物可抑制FGF-16表达，而抑制剂则反之，明确二者调控关系。

The downregulation of FGF-16 reversed the effects of miR-302a-3p silencing on renal tubule repair

功能回复实验表明，敲低FGF-16可完全逆转miR-302a-3p抑制剂对HK-2细胞的保护作用，证实FGF-16是miR-302a-3p介导肾小管损伤的核心下游效应分子。

本研究结论指出，miR-302a-3p通过直接靶向抑制FGF-16，加剧高糖诱导的肾小管上皮细胞炎症反应、氧化应激与凋亡，从而推动糖尿病肾病进展。该发现不仅深化了对糖尿病肾病分子机制的理解，也为开发以miRNA为靶点的诊断工具与治疗策略提供了理论依据。尽管研究揭示了miR-302a-3p在早期糖尿病肾病中的作用，但其在疾病不同阶段的功能差异及临床转化潜力仍需通过多中心大样本研究与动物模型进一步验证。