靶向L132P KRT12突变等位基因的局部siRNA治疗Meesmann角膜上皮营养不良及疾病生物标志物解析

《Journal of Controlled Release》：Topical mutant allele-specific siRNA delivery for treatment of Meesmann epithelial corneal dystrophy and elucidation of disease biomarkers

本研究首次证实局部应用纳米颗粒递送的等位基因特异性siRNA（K12L132P-9）可有效沉默MECD小鼠模型（Krt12+/hL132P）中致病性KRT12突变转录本，通过硅稳定杂化脂质纳米粒（sshLNP）载体实现角膜上皮特异性递送，不仅恢复角膜厚度，更显著降低内质网应激（UPR）等疾病生物标志物表达水平，为常染色体显性遗传性角膜营养不良的局部基因治疗提供了突破性方案。

　　

Highlight

角膜因其表面积小、易于观察和操作的特点，成为基因治疗极具吸引力的靶点。然而，角膜的屏障功能（如泪液稀释、眨眼清除和细胞间紧密连接）使局部给药面临巨大挑战。硅稳定杂化脂质纳米粒（sshLNP）技术成功克服了这些障碍，实现了siRNA在角膜上皮的高效递送。

Characterization of sshLNPs

未复合的sshLNPs平均粒径为97±0.22纳米，分散指数（PDI）为0.16±0.01，zeta电位为70.25±2.0毫伏。凝胶阻滞实验显示，siRNA与sshLNP复合后完全滞留，表明复合率极高。通过Quant-iT试剂盒测定，sshLNP对siRNA的包封效率达到98.89%。

Discussion

本研究首次在人类化MECD小鼠模型中证实，局部应用纳米颗粒递送的等位基因特异性siRNA能够有效改善疾病表型。这种改善体现在已知及新发现的MECD生物标志物的表达变化上，同时角膜上皮厚度也恢复至正常水平。我们未经过修饰、具有直接临床转化潜力的siRNA，精准靶向疾病相关突变等位基因，为角膜营养不良的局部治疗开辟了新途径。

Conclusion

本研究首次报道了局部递送的等位基因特异性siRNA能够在人类化角膜营养不良小鼠模型中改善疾病状态。这通过MECD已知及新型生物标志物的可测量变化，以及角膜上皮形态和厚度的恢复得以证明。我们的研究结果为推进MECD及其他影响视觉质量的角膜营养不良的局部siRNA治疗带来了巨大希望。