基于单克隆抗体的非洲猪瘟病毒K145R蛋白免疫优势表位鉴定及其诊断价值分析

本研究成功制备6株针对非洲猪瘟病毒（ASFV）K145R蛋白的单克隆抗体（mAbs），通过ELISA、Western blot和免疫荧光（IFA）验证其特异性，首次鉴定出关键线性B细胞表位133TWAKIVEEG141，并发现色氨酸（W134135

　　

亮点

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  成功制备6株抗K145R蛋白的高特异性单克隆抗体
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  首次精确鉴定出线性B细胞表位¹³³TWAKIVEEG¹⁴¹
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  发现色氨酸（W¹³⁴）和丙氨酸（A¹³⁵）为表位结合核心残基
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  表位在间接ELISA中可区分ASFV阳性/阴性血清

讨论

非洲猪瘟（ASF）作为新兴病毒病，给全球养猪业造成巨大经济损失。中国近期出现的低毒力ASFV变异株（如基因II型HRb1/2020和基因I型SD-DY-I/2021）给疫情监测带来新挑战——这些毒株常引发慢性或亚临床感染，使得基于抗体的检测手段尤为重要。本研究发现K145R蛋白在各类流行毒株中序列高度保守，其缺失不影响病毒复制能力，因此特别适合作为区分感染与免疫（DIVA）疫苗的配套诊断抗原。表位精细定位揭示的¹³³TWAKIVEEG¹⁴¹表位为开发肽基诊断试剂提供了新靶点。

结论

本研究首次系统阐明K145R蛋白的免疫优势表位特征，所获单克隆抗体及表位信息不仅深化了对病毒抗原结构的认知，更为ASFV血清学检测技术升级提供了关键实验依据。表位特异性验证结果提示¹³³TWAKIVEEG¹⁴¹序列具备开发高特异性诊断试剂的潜力。

作者贡献声明

董明超：研究设计、论文撰写与修订；李芳：数据验证与实验监督；郭太杰：数据可视化与验证；刘静丽：实验数据采集；步志高：研究指导；刘任强：数据可视化与生物信息学分析；王婉：方法建立与实验操作；侯乐子：抗体验证；朱远茂：技术支持；孙恩成：资源协调；Weldu Tesfagaber：实验参与。