睾丸癌抗原ACRBP：对其HLA-A2限制性肽的细胞毒性反应以及其在卵巢癌中的免疫特征

《Human Vaccines & Immunotherapeutics》：Cancer-testis antigen ACRBP: Cytotoxic response to its HLA-A2 restricted peptide and immune features in ovarian cancer

本研究通过体外诱导HLA-A*0201限制性ACRBP肽特异性细胞毒性T淋巴细胞（CTLs），并在SCID小鼠模型中验证其体内抗卵巢癌（OC）疗效，证实Pep-CTL能显著抑制肿瘤生长、促进肿瘤细胞凋亡，并通过ELISPOT检测到18.91% OC患者对ACRBP肽的T细胞应答。单细胞RNA测序和TCGA数据进一步揭示高ACRBP表达肿瘤细胞存在MHC和 chemokines下调，导致免疫逃逸，且与化疗耐药性相关。这些结果为ACRBP肽疫苗的优化及联合免疫治疗策略提供理论基础。

　　本研究聚焦于卵巢癌（Ovarian Cancer, OC）中一种名为ACRBP的癌睾抗原（Cancer-Testis Antigen, CTA）的免疫治疗潜力。ACRBP，也被称为OY-TES-1或CT23，属于CTA家族成员，其在正常成人卵巢上皮组织中不表达，但在多种恶性肿瘤中存在异常表达，包括卵巢癌。这使得ACRBP成为开发癌症疫苗和细胞免疫治疗策略的潜在靶点。已有研究表明，ACRBP在卵巢癌组织中的表达与肿瘤细胞的增殖、转移以及化疗敏感性密切相关，提示其在癌症免疫治疗中的重要性。

在本研究中，研究人员首次验证了ACRBP的特定表位肽ALLVLCYSI在体外能够诱导产生具有细胞毒性的T细胞（Cytotoxic T Lymphocytes, CTLs），并进一步探索了该肽诱导的T细胞对卵巢癌的体外和体内抗肿瘤效果。研究通过将ALLVLCYSI肽与来自卵巢癌患者的外周血单个核细胞（Peripheral Blood Mononuclear Cells, PBMCs）共培养，利用酶联免疫斑点（ELISPOT）检测方法评估了患者T细胞对肽的反应性。结果表明，约18.91%的患者对ALLVLCYSI肽产生了特异性T细胞反应，这为开发基于ACRBP的肿瘤疫苗提供了初步依据。

为了进一步评估ALLVLCYSI肽诱导的CTL在体内的抗肿瘤效果，研究团队在携带人卵巢癌OVCAR-3细胞的SCID小鼠模型中进行了实验。通过定期监测肿瘤体积和组织重量，研究发现ALLVLCYSI肽诱导的CTL能够显著抑制肿瘤生长，与对照组相比，治疗组的肿瘤体积和重量均明显减少，且抑制率达到了49.75%。此外，通过免疫组织化学（Immunohistochemistry, IHC）检测，研究发现治疗组中CD8+ T细胞和颗粒酶B（Granzyme B）的浸润程度显著高于对照组，这表明这些CTL能够有效识别并攻击肿瘤细胞。

为了更深入地了解ACRBP在肿瘤细胞中的表达及其对免疫反应的影响，研究团队利用单细胞RNA测序（scRNA-seq）技术分析了8名卵巢癌患者的肿瘤组织数据。结果显示，ACRBP高表达的肿瘤细胞簇在表达MHC分子和趋化因子方面显著低于其他细胞簇，这可能与肿瘤细胞的免疫逃逸机制有关。同时，通过分析TCGA数据库中308例卵巢癌患者的bulk RNA测序数据，发现高ACRBP表达的肿瘤样本在MHC I分子、抗原呈递相关基因以及趋化因子的表达水平显著低于低ACRBP表达的样本，进一步支持了ACRBP与免疫逃逸之间的关联。

此外，研究还探讨了ACRBP在肿瘤治疗中的作用，发现高ACRBP表达的肿瘤细胞往往对化疗反应较差，且表现出更强的增殖能力。这表明，ACRBP不仅在肿瘤细胞的生长和转移中发挥作用，还可能通过抑制抗原呈递和趋化因子表达，干扰免疫系统对肿瘤的识别和攻击。因此，针对ACRBP的免疫治疗策略需要考虑如何克服这些免疫逃逸机制，以提高治疗效果。

本研究的结果为未来基于ACRBP的免疫治疗策略提供了重要的理论依据和实验支持。通过体外和体内实验，研究团队验证了ALLVLCYSI肽诱导的CTL在抗卵巢癌中的潜力，并通过单细胞和bulk数据揭示了ACRBP在肿瘤细胞中的表达模式及其对免疫反应的影响。这些发现不仅有助于理解ACRBP在卵巢癌中的生物学功能，也为优化免疫治疗方案、增强治疗效果提供了新的思路。未来的研究可以进一步探索如何通过联合治疗策略，如增强趋化因子产生、改善抗原呈递能力或阻断免疫检查点分子，来提高基于ACRBP的免疫治疗的临床效果。