银叶巴豆精油通过调控抗氧化酶活性改善牛卵巢组织玻璃化冷冻效果的研究

《Cryobiology》：Morphological changes in ovarian follicles, stromal cells, and extracellular matrix in cryopreserved cattle ovarian tissue and the beneficial effects of Croton argyrophyllus Kunth essential oil

本研究首次发现银叶巴豆精油（CaEO）可显著提升玻璃化冷冻牛卵巢组织中前腔卵泡存活率，通过增加胶原纤维密度和调节CAT/SOD/GPX等抗氧化酶活性，为生殖细胞冷冻保存技术提供了新型天然抗氧化剂方案。

　　

¹化学试剂与卵巢来源

本研究所用试剂与培养介质均购自Sigma-Aldrich公司（美国密苏里州），特殊标注除外。

从当地屠宰场获取成年混种母牛卵巢（10对），先用70%酒精冲洗10秒，再用含抗生素的无菌0.9%生理盐水清洗两次，最后置于4℃生理盐水中转运至实验室。

²CaEO对卵泡形态与发育的影响

所有玻璃化冷冻处理组的正常卵泡比例均较未冷冻组下降，但添加0.1、1.0或10.0 μg/mL CaEO的冷冻液显著提高了正常卵泡占比（图1A）。此外，冷冻组织中的发育卵泡比例更高。

³讨论

本研究首次证实CaEO能通过缓解氧化应激提升卵泡健康率。氧化应激是冷冻过程中细胞损伤的主因，此前研究表明抗氧化剂对维持卵泡结构至关重要——它可阻止线粒体损伤累积（这会导致ATP合成中断和凋亡通路激活）。有趣的是，尽管CaEO组卵泡激活率无显著变化，但其胶原纤维密度在0.1-10 μg/mL浓度组明显增加，提示CaEO可能通过稳定细胞外基质（ECM）来支持组织完整性。更高浓度的CaEO（1-10 μg/mL）还显著提升了硫醇含量，这可能是其清除自由基能力的直接体现。而不同浓度CaEO对CAT（过氧化氢酶）、SOD（超氧化物歧化酶）和GPX（谷胱甘肽过氧化物酶）活性的差异化调节，说明其具备浓度依赖性的抗氧化调控特性。

⁴结论

CaEO通过三重机制提升冷冻效果：维护卵泡结构完整性、增加胶原纤维网络密度、精准调节抗氧化酶系统。这项发现为开发基于植物精油的生殖细胞冷冻保护剂提供了新思路。