综述：NETosis在乳腺癌中的作用：机制见解与生物标志物潜力

《Breast Cancer Research》：The role of NETosis in breast cancer: mechanistic insights and biomarker potential

本综述系统阐述了中性粒细胞胞外诱捕网（NETosis）在乳腺癌进展中的关键作用，包括其促进转移、免疫逃逸和治疗抵抗的机制。文章重点探讨了NET相关生物标志物（如citH3、MPO-DNA复合物）的诊断价值，并评估了靶向NETosis的治疗策略（如DNase I、PAD4抑制剂）的临床转化潜力，为乳腺癌精准治疗提供新视角。

　　

NETosis机制与分子标记

中性粒细胞胞外诱捕网（NETs）是由中性粒细胞释放的网状结构，由解聚的染色质、组蛋白和抗菌蛋白（如中性粒细胞弹性蛋白酶NE、髓过氧化物酶MPO）组成。NETosis存在三种主要途径：自杀性NETosis（由PMA诱导，依赖NADPH氧化酶产生活性氧ROS）、重要NETosis（由活化血小板触发，细胞保持活性）和线粒体NETosis（释放线粒体DNA）。其中，肽酰精氨酸脱亚胺酶4（PAD4）介导的组蛋白H3瓜氨酸化（citH3）是NETosis的关键分子标记。

NETs在乳腺癌进展、转移和治疗抵抗中的作用

NETs通过多种机制驱动乳腺癌恶性进展：①诱导上皮间质转化（EMT），下调E-钙黏蛋白，上调N-钙黏蛋白和波形蛋白；②通过NF-κB信号通路激活IL-8分泌，形成炎症正反馈循环；③捕获循环肿瘤细胞（CTCs）并促进其外渗，DNase I处理可抑制此过程；④通过降解紧密连接蛋白（如claudin-5）破坏血脑屏障，促进脑转移；⑤释放VEGF-A、MMP-9等促血管生成因子；⑥上调PD-L1表达，抑制T细胞功能，导致免疫逃逸。化疗药物（如多柔比星）可通过诱导IL-1β促进NETosis，进而激活TGF-β信号通路，引发治疗抵抗。

转移前微环境中NETosis的作用

NETs通过降解细胞外基质（ECM）成分（如层粘连蛋白）和招募免疫抑制细胞（如MDSCs），塑造肺、肝、骨等器官的转移前微环境（PMN）。在肺部，乙酰胆碱诱导的NETosis促进肿瘤细胞通过β1-整合素黏附；在肝脏，肿瘤来源的细胞外囊泡（EVs）激活肝窦内皮细胞分泌CX3CL1，招募CX3CR1+巨噬细胞促进NET形成；在骨骼，NETs释放的NE和MPO增强破骨细胞活性，形成溶骨性微环境。靶向NETosis（如DNase I、PAD4抑制剂GSK484）在动物模型中显著抑制转移。

乳腺癌亚型中的NETosis机制

NETosis活性呈现亚型特异性：三阴性乳腺癌（TNBC）具有高炎症性TME，N2型肿瘤相关中性粒细胞（TANs）通过G-CSF和TGF-β信号驱动NETosis，促进EMT和免疫抑制；HER2阳性肿瘤中，NETs通过VEGF-A介导血管生成；腔型乳腺癌免疫活性较低，NETosis作用较弱，但TGF-β可能参与内分泌治疗抵抗。

NETosis生物标志物的临床潜力

citH3、MPO-DNA复合物和循环游离DNA（cfDNA）可作为乳腺癌诊断和预后生物标志物。MPO-DNA水平与肝转移风险相关，而NET相关基因签名可预测免疫治疗响应。检测技术如微流控平台、表面增强拉曼散射（SERS）和机器学习模型提高了NET标志物的检测灵敏度。但临床转化仍需解决标准化问题。

患者来源类器官（PDOs）与先进模型

PDOs能保留肿瘤异质性和TME特征，已成功应用于TNBC和HER2阳性乳腺癌研究。免疫增强型PDOs整合中性粒细胞后，可实时观察NET形成及其对肿瘤细胞侵袭的影响。类器官模型证实NET成分（如NE）可激活TGF-β信号，促进EMT。这些模型为筛选NET靶向药物（如DNase I、PAD4抑制剂）提供了高通量平台。

NETosis与TANs的相互作用

TANs可分为抗肿瘤N1型和促肿瘤N2型，后者在G-CSF和TGF-β刺激下易发生NETosis。NETs通过IL-10/STAT3通路上调PD-L1，增强N2型TANs的免疫抑制功能，形成恶性循环。靶向TANs代谢重编程或抑制NETosis可逆转免疫抑制。

NET检测技术的进展

传统方法（如免疫荧光、ELISA）存在通量和标准化局限。微流控技术仅需10μL血液即可实现高灵敏度NET定量；纳米生物传感器可检测NET相关miRNA（如miR-21）；机器学习模型能识别NETosis相关长链非编码RNA（lncRNA），预测预后准确性超85%。这些技术有望应用于乳腺癌动态监测。

靶向NETosis与免疫检查点的联合策略

NETs通过PD-L1表达导