miR-4793-3p通过靶向RNF169调控铁死亡和侵袭性成为乳腺癌预后新标志物

《World Journal of Surgical Oncology》：miR-4793-3p predicts poor prognosis and regulates ferroptosis and invasiveness of breast cancer via targeting RNF169

本研究针对乳腺癌预后预测难题，聚焦miR-4793-3p的临床价值与作用机制。研究人员通过分析133例患者样本发现，miR-4793-3p在肿瘤组织中显著下调，且低表达与恶性亚型、TNM分期、淋巴结转移及不良预后密切相关。实验证实该分子通过靶向RNF169抑制JAK2/STAT3信号通路，进而调控铁死亡（ferroptosis）和细胞恶性行为。该研究为乳腺癌提供了新的预后标志物和治疗靶点。

　　

当谈到乳腺癌，我们面对的是一个日益严峻的全球健康挑战。尤其在中国，患者发病年龄更早、晚期病例比例更高的特点，使得寻找有效的预后指标和治疗靶点显得尤为迫切。乳腺癌的分子分型——包括Luminal A、Luminal B、HER2阳性和三阴性乳腺癌（TNBC）——在很大程度上决定了患者的命运。其中，三阴性乳腺癌因缺乏特异性治疗靶点，成为预后最差的亚型。尽管近年来治疗手段不断进步，但由于发病机制的复杂性，乳腺癌的长期生存率仍不理想。

在这一背景下，铁死亡（ferroptosis）作为一种新发现的细胞死亡方式，逐渐成为癌症研究的热点。与传统的细胞凋亡不同，铁死亡是由铁依赖的脂质过氧化累积引发的，这一过程在多种癌症包括乳腺癌的发生发展中扮演着重要角色。同时，微小RNA（miRNA）作为基因表达的关键调控者，已被证明在多种癌症中具有作为生物标志物的潜力。

常燕等人的研究团队将目光投向了一个特定的miRNA分子——miR-4793-3p。他们从GEO数据库中的两个乳腺癌相关数据集（GSE235355和GSE148848）中筛选出15个候选miRNA，并通过初步验证最终锁定了miR-4793-3p作为研究对象。这一选择并非偶然：既往研究已提示该分子在结直肠癌、胃癌和肝癌中均显示出重要意义。

研究人员首先在133例乳腺癌患者的组织样本中验证了miR-4793-3p的表达模式。结果令人振奋：与正常组织相比，肿瘤组织中的miR-4793-3p显著下调。更为重要的是，这种下调在恶性程度更高的分子亚型（如HER2阳性和三阴性乳腺癌）中更为明显。临床数据分析显示，低水平的miR-4793-3p与肿瘤分化差、TNM分期晚、淋巴结转移等不良临床特征密切相关。五年随访数据进一步证实，miR-4793-3p低表达患者的总体生存率显著较差，多因素分析表明该分子是独立的预后因素。

为了深入探索其功能机制，研究团队进行了一系列细胞实验。他们发现过表达miR-4793-3p能够显著抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，同时促进铁死亡过程。通过生物信息学预测和实验验证，他们确定了RNF169作为miR-4793-3p的直接靶标。RNF169是一种E3泛素连接酶，在DNA损伤修复中发挥作用，但其在乳腺癌中的具体功能尚不明确。实验表明，miR-4793-3p通过靶向抑制RNF169，进而影响JAK2/STAT3信号通路的活性，最终调控乳腺癌细胞的恶性行为和铁死亡过程。

本研究综合运用了临床样本分析、生物信息学预测和细胞分子生物学实验技术。研究人员从GEO数据库获取乳腺癌相关miRNA表达数据集，通过实时荧光定量PCR（qPCR）检测组织样本中miRNA表达，利用CCK-8法评估细胞增殖，Transwell实验分析细胞迁移和侵袭能力，并通过检测活性氧（ROS）、谷胱甘肽（GSH）、丙二醛（MDA）和Fe²⁺水平评估铁死亡状态。Western blotting用于分析相关蛋白表达，双荧光素酶报告基因实验验证了miR-4793-3p与RNF169的靶向关系。

miR-4793-3p在乳腺癌组织中的表达及临床意义

研究人员发现miR-4793-3p在乳腺癌组织中显著下调，且在恶性程度更高的分子亚型（HER2阳性和TNBC）中表达水平更低。临床关联分析显示，低水平的miR-4793-3p与肿瘤分化差、晚期TNM分期、淋巴结转移等不良病理特征显著相关。生存分析进一步证实，miR-4793-3p低表达患者五年总体生存率明显较差，多因素Cox回归分析确定其为独立预后因素。

miR-4793-3p与RNF169的靶向关系

通过生物信息学数据库预测和实验验证，研究确认RNF169是miR-4793-3p的直接靶标。双荧光素酶报告基因实验显示，miR-4793-3p可显著抑制RNF169的荧光素酶活性。在乳腺癌细胞中过表达miR-4793-3p可降低RNF169的mRNA和蛋白水平，而这一效应可被RNF169过表达载体所逆转。

RNF169介导miR-4793-3p在乳腺癌细胞中的肿瘤抑制作用

功能实验表明，过表达miR-4793-3p可抑制乳腺癌细胞的增殖、迁移和侵袭能力，而同时过表达RNF169可逆转这些效应。这表明miR-4793-3p通过靶向RNF169发挥其肿瘤抑制功能。

miR-4793-3p/RNF169轴对乳腺癌细胞铁死亡的调控

研究发现miR-4793-3p过表达可促进活性氧（ROS）和丙二醛（MDA）的产生，降低谷胱甘肽（GSH）活性，提高Fe²⁺浓度。同时，它下调了SLC3A2、GPX4、FTH1和ACSL4等抗铁死亡蛋白的表达，而上调了促铁死亡标志物PTGS2。这些效应均可被RNF169过表达所逆转，表明miR-4793-3p通过靶向RNF169调控铁死亡过程。

JAK2/STAT3信号通路在miR-4793-3p/RNF169轴中的潜在作用

机制研究表明，miR-4793-3p过表达可抑制JAK2/STAT3信号通路活性，而这一效应可被RNF169过表达所逆转。使用JAK2抑制剂AG490处理细胞可模拟miR-4793-3p过表达的效应，抑制细胞增殖、迁移和侵袭，并促进铁死亡，证实JAK2/STAT3信号通路在miR-4793-3p/RNF169轴调控网络中的关键作用。

该研究系统阐述了miR-4793-3p在乳腺癌中的表达特征、临床意义及作用机制。研究结果表明，miR-4793-3p作为一个潜在的肿瘤抑制因子，通过靶向RNF169调控JAK2/STAT3信号通路，影响乳腺癌细胞的增殖、侵袭和铁死亡过程。这一发现不仅为乳腺癌提供了新的预后生物标志物，也为开发针对miR-4793-3p/RNF169轴的靶向治疗策略提供了理论依据。

特别值得关注的是，该研究将铁死亡这一新兴概念与miRNA调控网络相结合，为理解乳腺癌的发病机制提供了新视角。研究揭示的分子机制——miR-4793-3p通过调控RNF169影响JAK2/STAT3信号通路，进而调节铁死亡和肿瘤恶性行为——为乳腺癌治疗提供了多个潜在的干预靶点。

然而，研究也存在一定局限性。例如，不同乳腺癌亚型中miR-4793-3p预后价值的统计学差异可能受样本量限制未能完全显现；JAK2/STAT3信号通路与RNF169之间的直接调控关系仍需进一步验证。未来研究需要在更大样本量和多中心背景下验证这些发现，并深入探索RNF169作为E3泛素连接酶如何精确调控JAK2/STAT3信号通路的分子细节。

总的来说，这项发表在《World Journal of Surgical Oncology》上的工作为乳腺癌的预后评估和靶向治疗开辟了新的方向，特别是为恶性程度较高的乳腺癌亚型提供了潜在的治疗策略。随着进一步研究的深入，miR-4793-3p及其相关信号通路有望成为乳腺癌精准医疗的重要组成部分。