脂质体递送DK14查尔酮类似物：三阴性乳腺癌治疗新策略

《Journal of Drug Delivery Science and Technology》：Liposomal Delivery of DK14 Chalcone Analogue: A Promising Therapeutic Strategy Against Triple-Negative Breast Cancer

本研究针对三阴性乳腺癌(TNBC)治疗困境，开发了新型查尔酮化合物DK14的纳米脂质体递送系统。研究人员通过薄膜水化法制备DK14-liposomes，系统评估其理化特性及抗肿瘤活性。结果表明该制剂可显著增强DK14水溶性(包封率89.32%)，并通过调控BAX/BCL-2/Caspase-3和PI3K/AKT/mTOR通路诱导TNBC细胞凋亡，同时展现抗血管生成特性。该研究为克服疏水性抗癌药物递送难题提供了创新解决方案。

　　

在乳腺癌的分子分型中，三阴性乳腺癌(TNBC)因其雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)和人表皮生长因子受体2(HER2)的缺失而成为最具侵袭性的亚型。这类患者不仅面临高复发风险，且由于治疗靶点的缺乏，化疗仍是主要手段，但伴随严重毒副作用和易产生耐药性。更为严峻的是，TNBC转移病例的中位生存期仅约一年，而非转移病例也仅三年半左右，凸显开发新型疗法的紧迫性。

查尔酮类化合物因其灵活的修饰骨架和显著抗癌活性成为研究热点。卡塔尔大学研究团队专利保护的DK14化合物虽在前期研究中展现出对抗TNBC的强大潜力，但其水溶性极低(<0.1 mg/mL)严重限制了生物利用度。为此，研究人员创新性地采用纳米脂质体技术，构建了DK14脂质体递送系统，相关成果发表于《Journal of Drug Delivery Science and Technology》。

研究团队采用薄膜水化结合探头超声技术制备纳米脂质体，通过动态光散射、高效液相色谱等技术系统表征制剂性质，并运用MTT法、细胞划痕、软琼脂克隆形成等实验评估抗肿瘤活性，同时通过蛋白质印迹分析和鸡胚绒毛尿囊膜(CAM)实验探讨分子机制及抗血管生成效应。

3.1. DK14溶解度

RP-HPLC分析证实DK14在水中的溶解度低于仪器检测限，属于 practically insoluble 级别，这为脂质体包封提供了必要性依据。

3.2. DK14-脂质体的尺寸和Zeta电位

制剂表征显示DK14-liposomes平均粒径为136.8±1.64 nm，PDI为0.191，Zeta电位-1.1 mV。纳米级尺寸有利于延长体内循环时间，而轻微负电荷可促进癌细胞内存作用。

3.3. DK14在脂质体中的包封效率

得益于DK14的强疏水性，其脂质体包封率高达89.32%，表明脂质双分子层为药物提供了理想驻留位置。

3.4. DK14-脂质体的释放曲线

体外释放研究表明，DK14从脂质体中呈现缓释特性，72小时释放约61%，一周内达91%，且无突释现象，有利于维持稳定血药浓度。

3.5. DK14-脂质体的细胞毒性研究

MTT实验显示，DK14-liposomes在72小时对MDA-MB-231和MDA-MB-436细胞的IC₅₀值显著低于游离DK14。特别值得注意的是，在正常乳腺上皮细胞MCF-10A上，脂质体制剂显示出更高的安全性，选择性指数(SI)最高达10.78。

3.6. 形态学研究

显微镜观察发现DK14-liposomes处理的TNBC细胞出现皱缩、细胞-细胞粘附丧失等典型凋亡形态，而正常细胞形态保持完整。

3.7. 细胞迁移分析

细胞划痕实验证实，DK14-liposomes在4μM和8μM浓度下对TNBC细胞迁移的抑制效果显著优于游离药物，暗示其抗转移潜力。

3.8. 集落形成研究

软琼脂克隆形成实验表明，DK14-liposomes处理四周后，TNBC细胞集落数量和大小均显著减少，证明其抑制肿瘤生成能力。

3.9. DK14-脂质体靶基因探索

蛋白质印迹分析揭示DK14-liposomes可上调促凋亡蛋白Bax，下调抗凋亡蛋白Bcl-2，并激活Caspase-3。同时，该制剂还能显著抑制PI3K/AKT/mTOR通路中p-AKT和p-mTOR的磷酸化水平。

3.10. 血管生成研究

CAM实验显示，DK14-liposomes能显著减少鸡胚血管生成面积，表明其具有抗血管生成特性，可能通过抑制VEGF通路实现。

该研究成功构建了DK14纳米脂质体递送系统，有效解决了药物溶解度难题。制剂不仅展现了优越的抗TNBC活性，通过调控多条信号通路诱导细胞凋亡、抑制迁移和血管生成，还显著提升了对正常细胞的安全性。脂质体作为临床转化最成熟的纳米载体，其良好的生物相容性和可工业化生产特性，为DK14的后续开发奠定了坚实基础。未来通过体内药代动力学和毒理学研究，这一创新制剂有望成为TNBC治疗的新希望。