mNGS技术在内源性眼内炎诊疗中的突破性价值：一项十年回顾性研究揭示肺炎克雷伯菌感染与视力预后的关键风险因素

《Journal of Microbiology, Immunology and Infection》：Clinical and Microbiological Insights into Endogenous Endophthalmitis: A Ten-Year Study Highlighting mNGS Efficacy

内源性眼内炎(EE)诊断困难且预后差。本研究通过10年临床数据分析，发现肺炎克雷伯菌(KP)是主要致病菌，宏基因组下一代测序(mNGS)灵敏度达97.6%，显著高于传统培养(47.6%)。mNGS指导的靶向治疗显著改善视力预后(P=0.002)，玻璃体切割术(PPV)也有积极效果。研究证实初始视力差和KP感染是不良预后的独立风险因素，为EE精准诊疗提供新策略。

　　

在眼科急症中，内源性眼内炎(Endogenous Endophthalmitis, EE)堪称"沉默的视力杀手"。这种疾病并非由外部创伤或手术引起，而是病原体通过血液循环从身体其他感染部位传播至眼内，突破血-眼屏障(Blood-Retinal Barrier, BRB)后引发的严重感染。尽管EE仅占所有眼内炎病例的2%-8%，但其致盲率极高，且随着糖尿病等基础疾病发病率上升，EE的患病率呈现明显增长趋势。

诊断EE面临巨大挑战。传统病原体培养方法灵敏度低、耗时长，且患者往往在就诊前已接受抗生素治疗，进一步降低检测阳性率。更棘手的是，不同地区的EE致病菌谱存在显著差异：西方国家以真菌感染为主，而东亚地区则革兰氏阴性(G-)细菌占主导地位，其中肺炎克雷伯菌(Klebsiella pneumoniae, KP)尤为常见。KP引起的EE进展迅速，预后差，常与肝脓肿和糖尿病等基础疾病相关，给临床治疗带来极大困难。

在这种背景下，复旦大学附属华山医院眼科团队开展了为期十年的回顾性研究，旨在揭示EE的临床特征、病原体分布规律，并评估新兴诊断技术——宏基因组下一代测序(metagenomic next-generation sequencing, mNGS)在EE诊疗中的价值。该研究结果发表在《Journal of Microbiology, Immunology and Infection》上，为EE的精准诊疗提供了重要证据。

研究团队采用多种关键技术方法开展此项研究。他们回顾性分析了2014年1月至2023年12月在复旦大学附属华山医院就诊的111例EE患者(121只眼)的临床资料，平均随访时间达18.37个月。在样本采集方面，根据患者病情严重程度，分别采集房水或玻璃体液进行检测。诊断技术包括传统微生物培养和mNGS检测，其中mNGS技术通过检测样本中所有DNA和RNA，无需培养即可快速识别病原体。治疗方面，患者接受玻璃体切割术(Pars Plana Vitrectomy, PPV)联合玻璃体内注射(Intravitreal Injection, IVT)或单独IVT治疗，并根据检测结果分为靶向治疗组和经验性治疗组。统计学分析采用SPSS软件，以P<0.05为有统计学意义。

基本特征

研究纳入的111例患者中，男性69例，女性52例，平均年龄56.92±13.82岁。糖尿病是最常见的合并症(57.9%)。右眼受累比例(43.8%)高于左眼(37.2%)。68.6%的患者有明确眼外感染灶，其中肝脓肿占47.1%，且主要集中于KP感染组。

病原体信息

在检出的病原体中，G-细菌占主导地位(68.6%)，其中KP是最常见的病原体(60.3%)。革兰氏阳性(G+)细菌占10.7%，以链球菌属为主(7.4%)。真菌感染占4.1%，主要为白色念珠菌(2.4%)。

mNGS与培养比较

在46例同时进行mNGS和培养的样本中，mNGS的阳性率(89.2%)显著高于传统培养(43.5%)。mNGS对G-细菌的检测率高达100%，而传统培养仅为45.5%。mNGS的灵敏度为97.6%，特异性与传统培养相当。值得注意的是，诺卡菌、伊丽莎白菌、戈登菌和马拉色菌等难以培养的病原体仅通过mNGS被检出。

预后分析

mNGS对临床治疗产生了重要影响。48例接受mNGS检测的患者中，29例(60.4%)根据结果调整了抗生素治疗方案。靶向治疗组视力改善显著(P=0.002)。手术治疗方面，PPV+IVT组视力改善明显(P<0.001)，而单纯IVT组改善不显著。

结局分析

多因素逻辑回归分析显示，初始视力差(OR: 20.622, 95% CI: 3.894-109.2)和KP感染(OR: 3.398, 95% CI: 1.096-10.538)是最终视力不良的独立危险因素。最终视力与初始视力呈正相关(r² = 0.6508, P < 0.0001)。

研究结论与讨论部分强调，EE是一种罕见但破坏性强的疾病，准确识别病原体是治疗成功的关键。本研究发现KP是EE的主要致病菌，与肝脓肿和糖尿病密切相关。mNGS作为一种新兴诊断技术，在EE诊疗中展现出显著优势：检测灵敏度高、不受前期抗生素使用影响、检测时间短(约48小时)，且能识别传统方法难以培养的病原体。

更重要的是，mNCS指导的靶向治疗能有效改善患者视力预后，避免广谱抗生素的过度使用，减少耐药菌产生。在治疗策略上，早期玻璃体切割术联合玻璃体内注药显示出更好的视力改善效果，挑战了传统Endophthalmitis Vitrectomy Study (EVS)的手术指征标准。

该研究的临床意义在于明确了EE预后的关键风险因素，为个体化治疗提供了依据。初始视力差和KP感染作为不良预后的独立预测因子，提示临床医生应对这类患者采取更积极的干预策略。mNGS技术的应用有望改变EE的诊断模式，从经验性治疗转向精准靶向治疗，最终改善患者视力预后。

尽管该研究存在单中心回顾性设计的局限性，但其为mNGS在EE诊疗中的应用提供了有力证据。随着检测技术的不断进步和成本的降低，mNGS有望成为EE诊断的重要工具，特别是在传统方法阴性的疑难病例中发挥关键作用。未来需要更多前瞻性多中心研究来进一步验证这些发现，并建立基于mNGS的EE诊疗规范。