基于APTES化学交联法的超灵敏ELISA检测技术的开发与验证及其在HDV血清学诊断中的应用

本研究开发了一种基于3-氨丙基三乙氧基硅烷（APTES）化学交联法的超灵敏酶联免疫吸附测定（ELISA）技术，用于检测人血清中丁型肝炎病毒（HDV）抗体。该技术通过优化抗原固定方法，显著提升了检测灵敏度（可检测109倍稀释样本）和特异性（96.25%-97.08%），曲线下面积（AUC）达0.98843（p<0.001）。研究为HDV感染早期诊断提供了快速、可靠的解决方案，对临床实践具有重要推广价值。

　　

亮点

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  开发了基于APTES化学交联的超灵敏ELISA技术，用于检测抗-HDV。
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  该方法可在30分钟内完成检测，灵敏度极高（可检测10⁹倍稀释样本）。
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  通过ROC曲线、分布曲线和标准差法确定了三种临界值（0.8201、0.7232、0.7285）。
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  特异性达96.25%-97.08%，灵敏度为96.36%，AUC为0.98843（p<0.001）。

讨论

HDV感染的早期检测依赖于快速、高灵敏度的诊断技术。本研究开发的间接ELISA可在30分钟内检测血清或血浆中的抗-HDV，为临床提供高效工具。目前HDV血清学检测主要依赖HDAg或抗-HDAg作为靶标，但商业化试剂盒选择有限。本研究通过APTES修饰的抗原固定策略，显著提升了检测性能，为HDV诊断提供了新思路。

结论

基于化学交联法的ELISA技术具备超高灵敏度和快速检测优势，应积极推广至临床实践，以改善HDV感染的诊断与治疗。