抗牛星状病毒与牛诺如病毒双价病毒样颗粒的研制及小鼠免疫原性评价

《Microbial Pathogenesis》：Development and immunogenicity evaluation of bivalent virus-like particles against bovine nebovirus and bovine norovirus in mice

本研究成功构建了同时表达牛星状病毒（BNeV）和牛诺如病毒（BNoV）VP1蛋白的双价病毒样颗粒（VLPs），并在小鼠模型中证实其可有效诱导高水平中和抗体（BT50）和细胞免疫应答（CD3+CD8+ T细胞），为开发新型双价疫苗奠定重要基础。

　　

Highlight

细胞、病毒和实验动物

使用Sf9昆虫细胞培养于特定培养基中，用于生成重组杆状病毒。先前报道中从牛腹泻粪便中获得的星状病毒Bo/LN-13/18/CH和诺如病毒Bo/MILQ-1/17/CH的完整VP1基因已登记于GenBank。实验采用雌性BALB/c小鼠（无特定病原体级），所有动物实验均按照相关指南进行。

重组质粒的构建与鉴定

为提高VP1蛋白在细胞中的表达水平和稳定性，我们对BNeV和BNoV的VP1基因进行了密码子优化。BNeV VP1的密码子适应指数（CAI）提升至0.93，平均GC含量为60.4%；BNoV VP1的CAI达到0.97，GC含量为60.6%。通过双酶切验证重组质粒（图1A），电泳条带显示pFastBac-Dual-BNeV、pFastBac-Dual-BNoV和pFastBac-Dual-BNeV-BNoV的构建结果符合预期。

讨论

BNeV和BNoV经常共同感染犊牛，导致混合感染。这类共感染会严重损伤犊牛肠道黏膜，为其他病毒（如牛轮状病毒和冠状病毒）的继发感染创造条件。继发感染会加剧临床症状，增加治疗难度和死亡率，给全球畜牧业造成重大经济损失。尽管疫苗接种被认为是控制这些病毒最有效的策略，但目前尚无商业疫苗可用。