深绿木霉（Trichoderma asperelloides）通过拮抗Leucoagaricus gongylophorus对切叶蚁（Atta sexdens）微群体生存影响的生物防治研究

《Fungal Biology》：Biocontrol of Leucoagaricus gongylophorus by Trichoderma asperelloides with implications to ant mini-colony survival

本文探讨了深绿木霉（Trichoderma asperelloides）作为生防因子，通过体外拮抗（如抗生作用和挥发性化合物）显著抑制切叶蚁（Leaf-cutting ants, LCAs）的共生真菌Leucoagaricus gongylophorus生长（抑制率>94%），并间接导致Atta sexdens微群体死亡率高达60%，为热带地区LCAs的综合治理提供了可持续的生物防治策略。

　　

^{Section snippets}

^INTRODUCTION

切叶蚁（下文简称LCA）属于Atta和Acromyrmex属（蚁科：Attini），它们侵袭多种植物并在农业地区造成严重损害，特别是在单一栽培以及松树（Pinus）和桉树（Eucalyptus）种植园中。其影响对一至三年生的幼苗最为严重，导致落叶、幼苗死亡、生长减缓以及对害虫的抵抗力下降，所有这些都造成了再造林区域的显著生产力损失。

^{Trichoderma sp. isolates and Leucoagaricus sp. isolation}

从玉米种植土壤（南纬17°01'28.4"，西经49°11'24.4"）中分离出七株Trichoderma sp.分离株（编号为Tricho 4, Tricho 5, Tricho 7, Tricho 10, Tricho 11, Tricho 14和Tricho 18），分离地点为巴西戈亚斯州Hidrolandia市，未使用任何化学农药（SisGen编号A5AA260）。分离株通过系列稀释法使用PDA培养基加氯霉素（150 mg/L）获得。这些Trichoderma sp.分离株纯化后保存在PDA斜面上，置于4°C条件下。

^{Molecular characterization}

分析确认了来自A. sexdens rubropilosa巢穴的Leucoagaricus分离株为L. gongylophorus。其与L. gongylophorus凭证标本JSC041011-20（Hiesecke等人，2021）的序列相似性达99.8%。

多位点分析显示，所有四株Trichoderma分离株均与T. asperelloides具有高度同源性（图1）。这四株分离株的RPB2和TEF-1基因序列相同，并且这些序列与T. asperelloides模式菌株的相应序列100%一致。

^DISCUSSION

害虫防治产品必须有效且环境安全，因此有必要纳入替代方法，例如具有杀菌活性的天然物质、合成衍生物或微生物（Araújo等人，2022）。本研究从玉米种植区鉴定出T. asperelloides分离株。我们本研究的目标是评估T. asperelloides对热带切叶蚁Atta spp.的共生真菌L. gongylophorus的生防潜力。体外实验表明，所选T. asperelloides分离株（Tricho 4, Tricho 5, Tricho 7, Tricho 11）对L. gongylophorus表现出强烈的拮抗活性，在双重培养测定中使其菌落生长减少超过94%。此外，T. asperelloides的抗生作用和挥发性化合物释放导致L. gongylophorus生长减少超过80%。更重要的是，暴露于这些分离株显著破坏了蚂蚁微群体，导致死亡率高达60%，并伴随废物产量的减少，这可能与T. asperelloides对花园共生真菌的拮抗作用有关。总之，这些T. asperelloides分离株对L. gongylophorus表现出强大的抗真菌活性，可作为管理LCA群体的可持续生物策略。