乙型肝炎核心相关抗原在隐匿性HBV感染及其相关肝细胞癌中的诊断价值

《International Journal of Infectious Diseases》：The diagnostic value of hepatitis B core-related antigen in occult HBV infection and its related hepatocellular carcinoma

血清HBcrAg联合检测对隐匿性乙肝感染（OBI）的诊断价值及对HBsAg阴性肝癌风险和复发预测的研究。

　　隐匿性乙型肝炎病毒（HBV）感染（OBI）近年来引起了临床医学界的广泛关注。这种感染状态指的是在常规实验室检测手段下，患者的血清HBsAg呈阴性，但其肝脏中仍存在具有复制能力的HBV DNA。OBI的诊断与监测对于预防HBV相关肝癌（HCC）的发生、发展及复发具有重要意义。本研究旨在探讨血清HBcrAg（乙型肝炎核心相关抗原）在OBI诊断中的价值，以及其在评估OBI相关HCC风险和预后中的作用。

### OBI的临床意义与挑战

OBI的诊断在临床实践中面临一定挑战。首先，由于HBsAg的阴性状态，常规的HBV检测方法难以发现病毒的存在。其次，即使在HBsAg阴性的人群中，HBV DNA的定量检测也常常呈现出低浓度的阳性结果，这使得OBI的识别变得复杂。此外，目前的诊断方法如巢式PCR虽然具有较高的灵敏度，但操作复杂，难以在临床常规实验室中广泛应用。相比之下，高灵敏度HBV DNA检测（hsHBV DNA）虽然更易操作，但其阳性率仅为巢式PCR的10%-20%。因此，OBI常被低估或忽略。

为了克服这些困难，研究人员不断探索新的诊断标志物。其中，HBcrAg作为一种新型的血清标志物，因其在HBV感染中的特异性与灵敏性，被认为具有较大的应用潜力。HBcrAg来源于cccDNA（共价闭合环状DNA），是HBV复制和持续感染的重要指标。它与肝内HBV DNA总量、pgRNA（前基因组RNA）水平、cccDNA的转录活性以及肝纤维化和肝炎活动程度密切相关。因此，HBcrAg不仅能够反映病毒的复制状态，还能提示肝脏的病理变化。

### HBcrAg在OBI诊断中的表现

本研究通过分析HBsAg阴性人群的血清样本，发现HBcrAg在OBI的诊断中表现出较高的敏感性和特异性。具体而言，通过ROC曲线分析，HBcrAg的曲线下面积（AUC）达到了0.878，表明其在诊断OBI方面的表现优于其他传统标志物，如pgRNA和anti-HBc。此外，将HBcrAg与hsHBV DNA、pgRNA等指标联合使用时，其诊断性能进一步提升，敏感性可达78.9%，而特异性仍保持在100%。这一结果提示，HBcrAg不仅可以单独用于OBI的诊断，还能与其他指标结合，形成更为可靠的检测路径。

在实际应用中，研究团队还设计了一套基于HBcrAg的实验室检测流程，以提高OBI诊断的便捷性和准确性。该流程结合了hsHBV DNA和pgRNA的检测，使得诊断既具有高灵敏度，又能够满足临床操作的需求。通过对37例HBsAg阴性患者的验证，该检测路径显示出良好的临床适用性，能够在保证诊断准确性的前提下，降低检测成本和复杂度。

### HBcrAg与OBI相关HCC的关系

除了诊断OBI，HBcrAg在评估OBI相关HCC的发生风险和预后方面也展现出重要价值。研究结果显示，HBsAg阴性HCC患者中，HBcrAg阳性者的比例高达79%，远高于其他非HCC组。这一发现表明，OBI与HCC之间存在密切的关联，HBcrAg可能是评估这种风险的重要指标。

进一步的多因素Logistic回归分析显示，HBcrAg阳性是OBI相关HCC发生的一个独立危险因素。调整后的比值比（OR）为3.57，且具有统计学意义（P=0.037）。这意味着，HBcrAg的水平越高，OBI患者发展为HCC的风险也越高。此外，定量分析表明，HBcrAg水平与HCC的发生率呈剂量依赖关系，即HBcrAg水平越高，HCC的发生率越高。这一发现与之前的研究结果一致，进一步验证了HBcrAg在HCC风险评估中的价值。

在HCC患者的临床特征分析中，HBcrAg阳性者的肿瘤体积更大、分期更晚，这表明HBcrAg可能在一定程度上反映了疾病的严重程度。然而，HBcrAg与Edmondson分级（肿瘤组织学分级）之间未表现出显著相关性，说明该标志物主要与肿瘤的大小和分期有关，而与组织学特征的关联性较弱。

### HBcrAg对OBI相关HCC复发的预测作用

本研究还发现，HBcrAg的水平与OBI相关HCC的复发风险密切相关。通过对65例HBsAg阴性HCC患者的随访分析，发现HBcrAg阳性者在术后2年内复发的比例显著高于HBcrAg阴性者。具体而言，术后84个月时，HBcrAg阳性组的复发率达到了50.0%，而阴性组仅为11.8%。这一结果表明，HBcrAg的水平可以作为术后复发的预测指标，有助于临床医生制定更为精准的随访策略。

Kaplan-Meier生存分析进一步支持了这一结论，显示HBcrAg阳性组的复发风险显著高于阴性组（HR=4.995，P=0.016）。这一结果提示，HBcrAg的检测不仅能够帮助识别OBI患者，还能预测其HCC复发的可能性，从而为临床干预提供依据。

为了排除随访时间不足可能带来的偏倚，研究团队还对术后不同时间段的复发情况进行分析。结果显示，复发组的HBcrAg阳性率在术后第一年、第二年和第三年分别为85.7%、88.2%和88.9%，均显著高于非复发组（P<0.05）。这表明，HBcrAg的水平在术后早期就可能反映出HCC的复发风险，因此，对于HBcrAg阳性患者，应在术后2年内加强临床随访，以及时发现复发迹象并采取相应措施。

### HBcrAg在OBI相关HCC中的潜在机制

除了临床应用，研究还探讨了HBcrAg在OBI相关HCC发生和发展中的潜在机制。已有研究表明，HBcrAg水平升高可能与某些致癌信号通路的激活有关，例如通过基因芯片分析发现，与HBcrAg相关的信号通路中存在多种与肿瘤发生相关的基因表达异常。这些发现进一步说明，HBcrAg不仅是一个诊断标志物，还可能在HBV感染导致的肝癌发生过程中发挥关键作用。

### 研究的意义与展望

本研究通过系统的临床和实验室分析，揭示了HBcrAg在OBI诊断和OBI相关HCC风险评估中的重要价值。研究结果表明，HBcrAg在OBI诊断中的表现优于传统的HBV标志物，同时，其在预测HCC复发方面也具有显著的临床意义。这些发现为OBI和OBI相关HCC的诊断、治疗、随访和预后评估提供了新的理论和实验依据。

此外，研究还强调了早期诊断和持续监测在改善OBI相关HCC患者预后中的关键作用。由于OBI患者可能在常规检测中被忽视，因此，提高对HBcrAg的检测和应用，有助于更早发现潜在的高风险人群，从而采取有效的干预措施，降低肝癌的发生率和复发风险。

未来的研究方向可能包括进一步优化HBcrAg的检测方法，使其更加简便、经济，便于在临床中广泛应用。同时，探索HBcrAg与其他生物标志物的联合应用，以提高诊断和预测的准确性。此外，深入研究HBcrAg在HBV感染和肝癌发生过程中的分子机制，也将有助于开发新的治疗策略和预防措施。

总之，HBcrAg作为一种新型的血清标志物，在OBI的诊断和HCC的风险评估中展现出广阔的应用前景。随着研究的深入和技术的进步，HBcrAg有望成为临床医学中评估HBV感染状态和肝癌风险的重要工具，为患者提供更精准的个体化诊疗方案。