基于适配体的微尺度热泳荧光传感器快速检测土霉素新方法

《Microchemical Journal》：A simple aptamer fluorescence sensor for rapid Oxytetracycline detection

本文报道了一种基于适配体和微尺度热泳（MST）技术的荧光传感器，通过FAM标记的DNA适配体探针实现对土霉素（OTC）的快速、高灵敏检测。该方法利用红外激光加热下荧光信号的归一化变化（Fnorm = Fhot/Fcold），检测限低至0.5 nM，在复杂样本（如牛奶、尿液）中展现优异选择性，为抗生素残留监测提供了新颖解决方案。

　　

Section snippets

Chemicals and reagents

所有3′端标记FAM的DNA适配体序列（见Table S1）由生工生物工程（上海）股份有限公司合成纯化。土霉素（OTC）、四环素（TC）、氯霉素、氨苄青霉素、L-组氨酸等试剂购自生工生物，卡那霉素和奎宁采购自Sigma-Aldrich公司。所有其他试剂均为分析纯，超纯水（18.2 MΩ·cm）由Purelab Elga超纯水系统制备。

Principle of aptamer fluorescence sensor for OTC with MST analysis

该适配体MST传感器采用3′端FAM标记的适配体作为荧光探针。如图1所示，MST分析中红外激光在毛细管内产生局部温度梯度，系统记录加热过程中的归一化荧光（F_norm = F_hot/F_cold）。游离适配体与OTC结合复合物在激光加热下呈现差异化荧光响应，通过比值信号输出实现定量检测。

Conclusion

本研究成功构建了基于适配体的MST荧光传感器，通过理性截短和突变优化获得高亲和力FAM标记探针。该均相检测方法动态范围达0.5 nM-10 μM，检测限为0.5 nM，并在实际样本中验证了其可靠性，为抗生素残留监测提供了高效技术平台。