优化油橄榄叶提取物以增强功能性酸奶的抗氧化活性：响应面法的应用与生物活性评估

《South African Journal of Botany》：Optimizing olive ( Olea europaea L.) leaf extract for enhanced antioxidant activity in functional yogurt

本研究通过响应面法（RSM）优化油橄榄叶多酚提取工艺，显著提升其抗氧化活性（DPPH抑制率达79.03%），并成功应用于酸奶体系，使酸奶多酚含量提高至16.13 mg GAE/100 g，抗氧化能力提升67.87%。细胞毒性实验（resazurin法）证实提取物在50–400 μg/mL浓度范围内对RAW 264.7巨噬细胞无显著毒性，为开发功能性乳制品提供安全有效的天然添加剂方案。

　　

¹Highlight²

植物材料与牛奶

本研究采用突尼斯品种Chétoui油橄榄（Olea europaea L.）叶片，该品种以高多酚含量著称。叶片于2023年2月采摘自突尼斯哈马姆-利夫Borj Cédria生物技术中心实验站（坐标：36°42′35.4″N, 10°25′42.1″E）树龄15–20年的成熟植株。为减少环境胁迫对生物活性化合物的影响，采摘于清晨进行。

初步研究

热图聚类分析（图1）显示：DPPH自由基清除率、总酚含量（TPC）和总黄酮含量（TFC）测定结果表明，中等超声功率（60%）结合20%提取比率可获得最高抗氧化活性与生物活性化合物提取效率。在DPPH实验中，10%比率与60%功率组合在25分钟时达到最大抑制率（84.01%），而40%功率下20%与30%比率虽具较强活性，但抗氧化效能随提取时间延长而降低。

讨论

响应面法优化表明，溶剂组成、提取时间、温度及超声/微波辅助技术等因素显著影响橄榄叶多酚提取效率。溶剂选择尤为关键：甲醇-水混合物（80:20）适用于微波辅助提取（Taamalli等，2012），而本研究通过系统优化证实水基溶剂在超声辅助下的高效性。

结论

本研究成功通过响应面法优化橄榄叶多酚提取工艺，证实中等超声功率与20%水叶比率可获得最高抗氧化化合物得率。将该提取物添加至酸奶中显著提升其抗氧化特性，为消费者带来潜在健康益处。研究成果凸显橄榄叶提取物作为食品工业功能性成分的应用价值。

（注：根据要求已去除文献引用标识[ ]及图示标识Fig.1，专业术语保留英文缩写与原始符号格式）