德国前瞻性出生队列研究揭示幼儿急性胃肠炎病原谱：症状期与无症状期肠道病原体检测对比分析

《Infection》：Detection of enteric pathogens in young children before and during acute gastroenteritis: results from a prospective German birth cohort study (LoewenKIDS)

本研究针对幼儿急性胃肠炎(AGE)病原学诊断的临床意义难题，通过前瞻性队列设计首次对89名2岁以下儿童配对采集症状期与无症状期粪便样本，采用多重实时RT-PCR技术检测25种肠道病原体。研究发现病毒性病原体（尤其是诺如病毒GII型、星状病毒和札如病毒）与AGE症状显著相关(OR 3.9)，而细菌和寄生虫在无症状儿童中携带率高且与症状无显著关联。该研究为高收入国家儿童AGE的病原学诊断提供了重要循证依据，对优化临床诊疗策略具有指导意义。

　　

在全球范围内，急性胃肠炎(AGE)仍是儿童健康的重要威胁，尤其在5岁以下儿童中，腹泻位居全球死亡原因第三位。尽管在高收入国家，随着轮状病毒疫苗的普及，病毒性胃肠炎的流行病学格局发生显著变化，但病原体检测结果的临床解读仍面临挑战——许多肠道病原体可在健康儿童中无症状携带，导致症状发作时检测到的病原体难以确定其致病性。

为解决这一难题，德国路德维希-马克西米利安大学等机构的研究团队在《Infection》期刊发表了题为"Detection of enteric pathogens in young children before and during acute gastroenteritis: results from a prospective German birth cohort study (LoewenKIDS)"的研究论文。该研究创新性地采用前瞻性出生队列设计，对同一批儿童在健康状态和发病状态下的肠道病原体情况进行配对比较，为理解各类病原体在AGE中的真实作用提供了独特视角。

研究方法的核心在于利用LoewenKIDS出生队列资源，选取89名2岁以下发生AGE的儿童，每名儿童均配有症状期粪便样本和症状出现前8周内采集的无症状期对照样本。研究人员采用Seegene公司的Allplex?胃肠道病原体检测面板，通过多重实时逆转录聚合酶链式反应(RT-PCR)技术，系统检测了6种病毒、13种细菌和6种寄生虫，共25种肠道病原体。检测不仅关注病原体存在与否，还通过循环阈值(Ct值)分析病原体载量。统计分析采用配对设计，通过混合效应模型比较同一儿童症状期和无症状期样本的差异，并计算比值比(OR)评估病原体与症状的关联强度。

微生物学发现在AGE样本中的分布

在89份AGE样本中，82%检测到至少一种病原体，43%存在多种病原体共检测现象，最多同时检测到4种病原体。病毒检出率最高(64%)，其次为细菌(46%)和寄生虫(7%)。具体病原体中，肠致病性大肠杆菌(EPEC)(28%)、腺病毒(27%)和诺如病毒GII型(25%)最为常见。

无症状样本的微生物学发现

无症状样本中，60%检测到至少一种病原体，29%存在共检测。细菌检出率(43%)与症状期无显著差异，病毒检出率(32%)则显著低于症状期。值得注意的是，除轮状病毒外，所有在症状期检测到的病原体均可在无症状样本中发现，其中EPEC(31%)、腺病毒(19%)和艰难梭菌(16%)携带率较高。

症状期与无症状期样本的比较分析

聚类分析显示症状期和无症状期样本的病原体谱高度重叠，但病毒性病原体与AGE症状显著相关(OR 3.9, 95% CI 2.1-7.3)，而细菌(OR 1.1)和寄生虫(OR 1.5)无此关联。个体水平分析显示，72%的AGE患儿有新增病原体检出，28%无新增病原体但仍有症状发作。

病毒检测情况

诺如病毒(GI和GII基因型)是AGE中最常见的病毒(36%)，其检测与症状显著相关。病毒载量分析显示，诺如病毒GII型、星状病毒和札如病毒在症状期的载量显著高于无症状期(p<0.01)。腺病毒虽在27%的AGE样本中检出，但无症状携带率也达19%，且载量无显著差异，提示其临床意义有限。

细菌和寄生虫检测情况

细菌病原体中最常见的EPEC和艰难梭菌在症状期和无症状期的检出率和载量均无显著差异。寄生虫中仅检测到脆弱双核阿米巴，且与症状无显著关联。多数细菌和寄生虫检测均伴随其他病原体共检测现象。

讨论与结论部分强调，本研究通过独特的配对设计揭示了病毒性病原体（尤其是诺如病毒GII型、星状病毒和札如病毒）在德国幼儿AGE中的主要致病作用，而细菌和寄生虫的检测结果需谨慎解读，因它们在健康儿童中常见且与症状无强关联。这一发现对高收入国家儿童AGE的临床管理具有重要指导意义：病毒性胃肠炎应主要采取对症支持治疗，避免不必要的抗生素使用。

研究同时指出当前微生物检测方法的局限性——针对某些细菌（如EPEC和EAEC）的单基因检测可能无法准确区分致病株和非致病株，未来需开发更精准的分型方法。此外，28%的AGE病例未发现新增病原体，提示非感染因素或现有技术未覆盖的病原体也可能参与发病。

该研究的优势在于前瞻性设计、配对样本比较和综合病原体检测面板，但也存在样本量有限、人群特异性（无严重合并症儿童）和地理局限性等不足。尽管如此，它为理解儿童AGE的病原学提供了宝贵证据，为优化诊疗指南和预防策略奠定了科学基础。