中药左金丸通过调节PPARγ介导的脂肪组织棕色化与脂质代谢改善动脉粥样硬化斑块稳定性

《Frontiers in Pharmacology》：Zhuriheng pills improve adipose tissue dysfunction and inflammation by modulating PPARγ to stabilize atherosclerotic plaques

本研究揭示中药复方左金丸（ZRH）通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）通路，显著改善ApoE?/?小鼠动脉粥样硬化（AS）斑块稳定性。其机制涉及促进脂肪组织棕色化（上调UCP-1）、调节巨噬细胞M2极化、改善血浆脂质组学（如降低TAG、DAG、HexCer，升高Acar、PG、PA），并在细胞共培养模型中验证其多组分协同抗炎与脂质代谢调控作用，为ZRH防治AS提供药理学依据。

　　

左金丸改善动脉粥样硬化斑块稳定性的作用验证

研究通过高脂饮食（HFD）喂养ApoE^?/?小鼠18周并结合短期复合刺激（寒冷、脂多糖LPS、去氧肾上腺素）建立易损斑块模型。左金丸（ZRH）干预后，血清总胆固醇（TC）、甘油三酯（TG）、低密度脂蛋白（LDL）水平显著降低，高密度脂蛋白（HDL）升高，炎症因子白介素-1β（IL-1β）分泌减少。全主动脉油红O染色及主动脉根部切片显示，ZRH有效减小斑块面积，增加胶原沉积，减少巨噬细胞浸润和脂质含量，降低斑块易损指数。

左金丸促进脂肪组织棕色化及巨噬细胞M2极化

组织学分析发现，ZRH显著减轻附睾白色脂肪组织（eWAT）、棕色脂肪组织（BAT）和血管周围脂肪组织（PVAT）的脂肪细胞肥大，并上调BAT和腹股沟白色脂肪组织（iWAT）中解偶联蛋白1（UCP-1）的表达。免疫组化与免疫荧光结果显示，ZRH增强PVAT中M2型巨噬细胞标志物CD206⁺/CD86⁺比值，并上调BAT和eWAT中PPARγ蛋白表达，表明ZRH通过PPARγ通路促进脂肪组织棕色化和抗炎微环境形成。

左金丸调节血浆脂质组学谱

基于UHPLC-Q-Exactive-MS/MS的脂质组学分析显示，模型小鼠血浆中甘油三酯（TAG）、二酰甘油（DAG）、神经酰胺（Cer）、葡萄糖神经酰胺（HexCer）含量显著上升，而酰基肉碱（Acar）、磷脂酸（PA）、磷脂酰甘油（PG）等下降。ZRH干预后，15种潜在脂质标志物（如TAG(12:0-14:0-14:0)、HexCer(d28:0/12:1)、Acar(10:1)等）水平趋于正常，且甘油磷脂代谢通路被显著富集。相关性分析表明，这些脂质分子与斑块易损指数密切关联。

左金丸含药肠吸收液（IAS）及活性单体调控巨噬细胞极化

在LPS诱导的RAW264.7巨噬细胞模型中，ZRH-IAS及其去除甘松（DeGZ-IAS）或肉豆蔻（DeRDK-IAS）的组分均能抑制一氧化氮（NO）、IL-1β分泌，促进抗炎因子IL-10释放。RDK来源单体（如R5、R8）在抑制炎症方面作用突出，而GZ来源单体（如G8、G9）亦表现出显著活性。流式细胞术证实ZRH-IAS可提高CD206⁺/CD86⁺比值，诱导巨噬细胞向M2型极化。

左金丸IAS及单体抑制脂肪细胞脂质积累

在棕榈酸（PA）诱导的3T3-L1脂肪细胞模型中，ZRH-IAS显著减少脂质沉积和甘油三酯含量，降低瘦素（Lep）分泌，提升脂联素（APN）和环氧化酶2（COX-2）水平。单体实验表明，G2、G3、G4、G5、G6、G8、G9、R1、R2、R5、R6、R8均具有抑制脂质积累作用，其中GZ单体效果更优。

共培养模型中ZRH-IAS及潜在质量标志物（MIX）的协同作用

通过间接（条件培养基）和直接（Transwell）共培养模型，发现ZRH-IAS和五种单体混合物（MIX，含G3、G8、G9、R5、R8）可逆转脂肪细胞-巨噬细胞恶性交互作用：在间接共培养中，ZRH-IAS和MIX抑制巨噬细胞NO、IL-1β、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）分泌，促进IL-10释放；在直接共培养中，二者减少脂肪细胞脂质积累、Lep和COX-2，增加APN。MIX在部分指标上效果优于ZRH-IAS，提示其作为质量标志物（Q-markers）的潜力。

PPARγ通路在ZRH作用机制中的关键角色

使用PPARγ抑制剂GW9662进行干预，发现ZRH-IAS对脂质代谢和炎症的改善作用被逆转，PPARγ和UCP-1蛋白表达上调也被抑制。然而，MIX对UCP-1的调控在单独培养时显著，共培养时作用减弱，且不受GW9662影响，表明ZRH通过多组分协同激活PPARγ通路，而MIX可能通过其他途径（如直接调控UCP-1）发挥作用。综上，左金丸通过多靶点、多通路调控脂质代谢、炎症反应及脂肪功能，为动脉粥样硬化防治提供了整合调节的新策略。