犬猫肿瘤手术切缘评估新策略：横切与切线切缘联合评估的比较研究

《Frontiers in Veterinary Science》：Combined cross-sectional and tangential margin evaluation of different tumor types in dogs and cats

本文比较了横切法（cross-sectioning）与切线切缘法（tangential sectioning）在评估犬猫肿瘤手术切缘中的差异。研究发现，传统横切法存在高达50%的假阴性率，而切线法虽能全面评估切缘却无法测量肿瘤游离距离（HTFD）。作者提出联合使用两种方法，为兽医肿瘤学提供了更精准的病理评估方案（R0/R1分级），对临床决策具有重要指导意义。

　　

引言：肿瘤组织学评估在兽医临床中具有关键作用，其核心任务包括肿瘤诊断和手术切缘状态判定——即确定切缘是否被肿瘤细胞浸润。目前兽医学界最常采用的横切法（cross-sectioning）具有操作简便、成本较低的优势，并能测量组织学肿瘤游离距离（histologic tumor-free distances, HTFD）。然而，该方法仅能评估不到1%的手术切缘面积，可能导致阳性切缘的漏诊。相比之下，切线切缘法（tangential sectioning）通过对手术切缘进行平行于切除面的连续切片，可实现接近360°的全面评估，显著降低漏诊风险，但其操作耗时更长、成本更高，且无法进行HTFD测量。尽管文献中偶有提及联合使用两种方法的建议，但尚未有研究系统比较这两种切片技术在犬猫各类肿瘤中的应用效果。因此，本研究旨在通过同一标本的对比分析，评估两种方法的一致性差异。

材料与方法：研究纳入来自伯尔尼大学兽医教学医院13只犬和6只猫的20个肿瘤样本，所有病例均接受根治性手术切除。每个标本依次进行横切和切线切片处理：首先沿肿瘤最短轴进行横切，包含肿瘤及肉眼所见最窄的肿瘤游离切缘；随后对横切面两侧的剩余组织进行切线切片，将获得的3-5毫米组织条带置于组织盒中。记录两种方法所需的组织盒数量、切片时间等参数。组织经石蜡包埋、切片和HE染色后，由两位认证兽医病理学家盲法评估。切缘状态采用R分级标准：R0代表完全切除（HTFD>0毫米），R1为不完全切除（肿瘤细胞达切缘），R2为肉眼可见肿瘤残留（本研究未出现）。同时记录肿瘤类型、分级及HTFD测量值。采用Cohen's Kappa统计评估两种方法的一致性。

结果：横切法仅在1/20（5%）的肿瘤（猫乳腺腺癌）中检测到阳性切缘（R1），而切线法发现11/20（55%）的肿瘤存在切缘浸润，包括横切法检出的病例。两种方法的一致性分析显示Kappa值仅为0.0826（95%CI: -0.0774-0.2426），表明一致性极低。特别值得注意的是，横切法判定为切缘阴性（R0）的19例样本中，有10例（50%）经切线法复核确认为阳性切缘（R1），存在显著假阴性风险。在这10例不一致病例中，80%的肿瘤其横切法测量的HTFD≤3毫米，但仍有2例（犬低级别肥大细胞瘤和猫注射部位肉瘤）在HTFD>3毫米的情况下，切线法仍检测到切缘浸润，提示肿瘤不对称生长特性影响评估准确性。

资源消耗方面，横切法平均需3.5个组织盒（中位数4个）和5.5分钟切片时间，而切线法平均需16.5个组织盒（中位数15个）和30分钟切片时间。组织处理过程中，切线切片因表面不规则需进行400-800微米的修块（facing），而横切片仅需<100微米修块，这可能影响切线法对表浅肿瘤细胞的检测灵敏度。

讨论：本研究首次通过同一标本的直接对比，揭示横切法在犬猫多类型肿瘤切缘评估中存在50%的假阴性风险，这一结果与既往犬肥大细胞瘤研究（假阴性率23.1%）相互印证，但本研究因纳入肿瘤类型更广泛（包括软组织肉瘤STS、乳腺肿瘤、猫注射部位肉瘤FISS等），更能体现临床实际情况。尤其对于FISS等具有浸润性生长特性的肿瘤，即使横切显示较宽HTFD（如5毫米），切线法仍可能发现局灶性切缘浸润，凸显联合评估的必要性。

尽管切线法显著提高检测灵敏度，但其成本效益比仍是临床推广的挑战。本研究创新性提出联合方案：通过横切保障HTFD测量，同时结合切线法实现切缘全面筛查。该策略有效平衡诊断准确性与临床实用性，特别适用于解剖结构复杂或生物学行为侵袭性强的肿瘤类型。

研究局限性包括样本量较小（20例）、缺乏随访数据验证临床相关性，以及组织固定收缩对HTFD测量的影响。未来需开展长期随访研究，明确不同切缘状态与局部复发风险的关联，进一步优化评估标准。

结论：横切法单独用于犬猫肿瘤切缘评估存在显著局限性，而联合切线法可大幅提升诊断准确性。尤其对于可进行二次手术或具有侵袭性生物学行为的肿瘤（如FISS），联合评估方案能为临床决策提供更可靠依据，最终改善患畜预后。建议病理实验室根据肿瘤类型和临床需求，个性化选择或组合使用两种切片技术。