优化内镜监测：采样方法与时间点对微生物监测效果的影响分析

《Journal of Hospital Infection》：Optimizing endoscope surveillance: how sampling methods and time points affect microbiological surveillance

本研究针对内镜再处理后的微生物监测效果受采样时机与方法影响的问题，通过前瞻性多中心研究比较了常规冲洗采样法（CFSM）与冲洗-刷洗-冲洗采样法（FBFSM）在高水平消毒后即时与过夜干燥后两个时间点的监测效果。结果显示，FBFSM法微生物检出率显著高于CFSM法（P=0.015），而过夜干燥后采样合格率（87.7%）显著高于即时采样（79.3%），表明干燥环节对降低残留微生物污染至关重要。该研究为优化内镜再处理质量监控方案提供了关键实证依据，对预防医院感染具有重要意义。

　　

在现代化医疗体系中，柔性胃肠内镜已成为内科和外科诊疗不可或缺的工具。然而，与之相关的医院感染问题始终如影随形。数据显示，与柔性内镜相关的医院获得性感染发生率高于任何其他可重复使用的医疗器械。尽管医疗机构普遍遵循再处理指南，但内镜相关感染事件仍时有发生，特别是耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌（CRE）等多重耐药菌的传播更是敲响了警io。

这一问题的背后隐藏着复杂的成因网络：再处理操作不当、生物膜形成、结构设计缺陷以及内镜损伤等都可能是罪魁祸首。其中，生物膜形成——尤其是在清洁、高水平消毒（HLD）和干燥后储存期间形成的管腔内生物膜——被认为是导致持续污染的关键因素。生物膜能够保护嵌入的微生物免受消毒剂影响，增加对再处理的抵抗力，并成为病原体传播的温床。

更令人担忧的是，世界胃肠病学组织（WGO）2023年指南指出，广泛引用的内镜操作感染传播风险（1/180万）很可能被严重低估。建立内镜检查与后续感染之间的直接因果关系十分困难，即使确认了这种联系，漏报情况也相当普遍。报告的内镜污染率差异巨大，从0.4%到49%不等，但各研究之间的比较受到采样技术、微生物培养方法和定义污染的参考阈值不一致的限制。

在这一背景下，华中科技大学同济医学院附属协和医院感染性疾病科的研究团队开展了一项前瞻性多中心研究，深入探讨了采样方法和时间点如何影响内镜微生物监测效果，该研究发表在《Journal of Hospital Infection》上。

研究方法主要包括以下几个方面：研究在武汉一家三级甲等综合医院的三个胃肠内镜单元进行，采集了254个内镜活检通道样本。采样在两个时间点进行：高水平消毒后立即采样和过夜干燥后采样。采用两种采样技术：常规冲洗采样法（CFSM）和冲洗-刷洗-冲洗采样法（FBFSM）。微生物学分析包括菌落计数、病原体鉴定和分类，同时对抗生素敏感性进行测试，并评估了分离菌株的生物膜形成能力。

研究结果

微生物培养结果

研究共收集了254个内镜活检通道样本，消毒后消化内镜的总体合格率为83.4%（212/254）。高水平消毒后采集的样本合格率为79.3%（140/176），而过夜干燥后采集的样本合格率更高，达到86.0%（72/84）。FBFSM法的总体合格率显著低于CFSM法（X² = 5.895，P = 0.015），这种差异在两个采样时间点的亚组中也是一致的。

配对比较结果

对57个内镜（37个胃镜和20个结肠镜）在同一器械上两个时间点采用两种采样方法进行采样。威尔科克森符号秩检验显示，无论是高水平消毒后（Z = -5.176，P < 0.0001）还是干燥后（Z = -4.184，P < 0.0001），FBFSM法的微生物检出量均显著高于CFSM法。

病原体检出情况

高水平消毒后培养阳性的样本中，最常检出的高关注度微生物（HCOs）是肠杆菌科（17.5%）、假单胞菌属（15.8%）、革兰阳性球菌（15.8%）和嗜麦芽窄食单胞菌（14.0%）。在干燥柜中过夜储存后，高关注度微生物的检出率显著下降：肠杆菌科（8.8%）、假单胞菌属（7.0%）和嗜麦芽窄食单胞菌（7.0%），与高水平消毒后采集的样本相比，流行率降低了约50%。

抗生素敏感性与生物膜形成

对所有高关注度微生物进行抗生素敏感性测试（AST），耐药谱与已知模式一致。生物膜形成实验显示，在肠杆菌科、嗜麦芽窄食单胞菌和假单胞菌属中，具有强生物膜形成能力的菌株比例均超过50%，分别为53.3%、83.3%和66.7%。

讨论与结论

研究结果表明，内镜再处理过程中的干燥环节对减少残留微生物污染至关重要。过夜干燥可显著提高采样合格率，并降低高关注度微生物（特别是假单胞菌属和革兰阳性球菌）的检出率。这一发现支持了胃肠病学会澳大利亚分会（GESA）指南中的强调：充分干燥内镜通道对于防止细菌生长和感染传播至关重要。

同时，FBFSM法显示出比CFSM法更高的敏感性，表明刷洗辅助的采样方法能更有效地检测出残留微生物。这一发现与之前使用人工污染内镜通道的研究一致，表明刷洗与冲洗相结合比单独冲洗更能有效清除附着的微生物，特别是在存在生物膜的情况下。

值得注意的是，检测到的病原体中超过50%具有强生物膜形成潜力，表明其存在较高的生物膜定植风险。特别是嗜麦芽窄食单胞菌表现出最高比例的强生物膜生产者，这与其在无生命表面持久存在的已知能力一致。肠杆菌科和假单胞菌属的高生物膜形成潜力率进一步表明，这些微生物可能有助于内镜在高水平消毒后持续存在和潜在再污染。

这些发现强调了在设备相关污染背景下，高关注度微生物的生物膜形成潜力的临床相关性，并凸显了需要针对生物膜韧性加强再处理策略。研究结果支持将标准化干燥程序和更敏感的采样技术纳入内镜再处理的常规质量控制协议中，为预防内镜相关感染提供了重要科学依据。