三棱-莪术通过协同靶向ITGA5/CCN1抑制乳腺癌转移：聚焦血管生成与粘附的作用机制

《Phytomedicine》：Synergistic Targeting of ITGA5/CCN1 by Sparganii Rhizoma and Curcumae Rhizoma Suppresses Breast Cancer Metastasis via Angiogenesis and Adhesion

本文揭示了三棱黄酮（FSR）与莪术油（OCR）协同通过抑制整合素α5（ITGA5）介导的肿瘤新生血管形成和减弱细胞通讯网络因子1（CCN1）介导的血管内皮粘附增强，从而抑制乳腺癌转移的新机制。研究结合斑马鱼异种移植模型和小鼠自发转移模型，通过转录组测序（GO/KEGG分析）发现关键靶点，为中医药"活血化瘀"理论治疗肿瘤提供了分子水平证据。

　　

Highlight

抗体

Ki67 (27309-1-AP) 购自Proteintech；CD31 (28364) 购自Abcam；FITC CD4 (100405)、PE CD8 (100707)、PE F4/80 (123114) 和APC CD11b (101212) 购自Biolegend；ITGA5 (AF5200) 和CCN1 (DF6250) 购自Affinity；AKT (RA2003) 和P-AKT (RA2102) 购自Vazyme；VEGFA (A12303) 购自ABclonal；GAPDH (32233) 购自Santa；N-钙黏蛋白 (14215S) 购自CST；β-连环蛋白 (11574) 购自SAB；山羊抗小鼠/兔IgG二抗购自碧云天。

FSR + OCR 在斑马鱼移植瘤模型中抑制血管生成

根据《中华人民共和国药典》（ChP），采用高效液相色谱法（HPLC）对OCR和FSR的成分进行了鉴定。莪术醇、吉马酮、呋喃二烯和β-榄香烯作为OCR的检测指标，而原儿茶酸、芦丁、阿魏酸和山奈酚作为FSR的检测指标。结果证实OCR和FSR均符合相关药典标准（图1 A-D）。为了评估FSR + OCR在体内对血管生成和肿瘤转移的抑制作用，我们建立了一个斑马鱼移植瘤模型。将荧光标记的MDA-MB-231细胞显微注射到48小时大的斑马鱼胚胎的卵黄囊中。与对照组相比，FSR + OCR处理显著抑制了斑马鱼肠道下血管（SIVs）的生成（图1E, F）。此外，FSR + OCR处理组的斑马鱼体内肿瘤细胞的扩散和转移也明显减少（图1G, H）。这些结果表明，FSR + OCR能够有效抑制斑马鱼模型中的肿瘤血管生成和转移。

讨论

尽管乳腺癌的诊断、治疗和预防取得了显著进展，但其高转移率和高死亡率仍然是一个重大的公共卫生挑战，困扰着医学专业人士，并对全球健康构成严重威胁。转移性乳腺癌导致了约90%的乳腺癌相关死亡，其中肺部是常见的转移部位。我们的研究表明，FSR和OCR的组合虽然在不同剂量下并未显著抑制肿瘤生长，但中高剂量能有效抑制肿瘤血管生成和转移。转录组测序通过基因本体（GO）和京都基因与基因组百科全书（KEGG）分析揭示了潜在的药物靶点，包括整合素α5（ITGA5）和细胞通讯网络因子1（CCN1），这些靶点通过GO和KEGG分析得到了进一步验证。

结论

总之，FSR + OCR的组合通过破坏ITGA5介导的肿瘤新生血管形成和减弱CCN1介导的血管内皮粘附增强来抑制乳腺癌转移。这项研究将中医"血瘀"理论与血管生物学研究相结合，并在分子水平上解读了三棱-莪术药对的协同抗转移机制。