QuantiFERON-TB Gold Plus检测CD8+ T细胞反应在结核病接触者中的意义：活动性疾病与近期感染的生物标志物探索

《Microbiology Spectrum》：QuantiFERON-TB Gold Plus CD8+ T cell responses in contacts with tuberculosis disease and recent tuberculosis infection

本研究通过回顾性分析新加坡结核病接触者诊所的大规模筛查数据，证实QuantiFERON-TB Gold Plus (QFT-Plus)检测中CD8+ T细胞反应（以TB2-TB1干扰素-γ (IFN-γ) >0.6 IU/mL为阈值）与活动性结核病(TB disease)和近期结核感染(Stringent Converters)显著相关。研究为利用QFT-Plus区分结核感染状态、识别需进一步检查或预防性治疗(TPT)的高危人群提供了重要循证依据。

　　

ABSTRACT

QuantiFERON-TB Gold Plus (QFT-Plus) 于2016年取代了QuantiFERON-TB Gold in-tube (QFT-GIT)，旨在通过利用结核分枝杆菌特异性CD8⁺ T细胞在宿主应对结核感染中的作用来提高检测灵敏度。QFT-Plus在QFT-GIT的TB抗原管基础上增加了第四管。有证据表明，结核分枝杆菌特异性CD8⁺ T细胞优先识别重度感染的细胞，这引发了人们对QFT-Plus CD8⁺ T细胞反应作为结核病和近期结核感染标志物的兴趣。本研究回顾性分析了2018年1月至10月期间在新加坡结核病接触者诊所接受筛查的接触者的QFT-Plus结果中的CD8⁺ 反应。研究发现，与所有其他结核感染者相比，活动性结核病接触者和严格转换者中TB2-TB1 IFN-γ >0.6 IU/mL的比例显著更高。我们的研究结果进一步证明，QFT-Plus检测所测量的CD8⁺ 反应可能预测结核病和近期结核感染。

INTRODUCTION

据估计，结核感染影响着全球17亿人。世界卫生组织终结结核病战略的一个支柱是进行有针对性的结核感染筛查，以确定有资格接受结核预防性治疗的人群。目前的结核病筛查测试，例如结核菌素皮肤试验和更特异的干扰素-γ释放试验，尚不能区分活动性结核病和结核感染，也无法识别近期获得的结核感染。QFT-Plus旨在通过利用结核分枝杆菌特异性CD8⁺ T细胞的作用来提高检测灵敏度。QFT-Plus包含一个额外的TB2管，其中含有较短的ESAT-6和CFP-10肽段以刺激CD8⁺ T细胞。鉴于CD8⁺ T细胞优先识别重度感染细胞的证据，利用QFT-Plus CD8⁺ T细胞反应来识别活动性结核病和近期结核感染引起了研究兴趣。研究人员使用TB2和TB1管之间干扰素-γ差值大于0.6 IU/mL作为CD8⁺ T细胞反应的指标。尽管新加坡是一个结核病中发病率国家，但作为新加坡结核病消除计划的一部分，新加坡于1998年对密切接触者实施了结核预防性治疗。

MATERIALS AND METHODS

本研究回顾性分析了2018年1月至10月在结核病接触者诊所接受筛查的接触者的QFT-Plus结果中的CD8⁺ 反应。结核病是新加坡的法定传染病。确定的密切接触者在结核病接触者诊所接受结核病和结核感染筛查。在研究期间，对免疫正常的5岁及以上接触者进行QFT-Plus检测。将筛查的接触者分为“活动性结核病”、“严格转换者”和“所有其他结核感染者”。严格转换者定义为在窗口期后QFT-Plus检测显示IFN-γ从小于0.35 IU/mL增加到大于0.7 IU/mL且无活动性结核病的接触者。比较了活动性结核病与所有其他结核感染者之间，以及严格转换者与所有其他结核感染者之间的定性和定量QFT-Plus反应。使用卡方检验、Fisher精确检验、Mann-Whitney U检验和逻辑回归分析进行统计学分析。

RESULTS

在研究期间，共有22,355名接触者到访诊所，其中19,397名接触者有有效的QFT-Plus结果。首次检测阳性率为13.9%，包括105例活动性结核病。在10,244名QFT-Plus阴性接触者中，有381名在窗口期后重复检测中转为阳性，包括13例活动性结核病。排除活动性结核病病例后，共有2,963名接触者被判定为结核感染，其中163名为严格转换者。与所有其他结核感染者相比，活动性结核病接触者在TB2管中阳性的比例显著更高，并且TB1和TB2管的中位IFN-γ水平也显著更高。同样，严格转换者在TB2管中阳性的比例以及TB1和TB2管的中位IFN-γ水平也显著高于所有其他结核感染者。重要的是，活动性结核病接触者和严格转换者中TB2-TB1 IFN-γ >0.6 IU/mL的比例显著高于所有其他结核感染者，中位TB2-TB1 IFN-γ值也显著更高。多变量分析显示，严格转换和活动性结核病与CD8⁺ 反应独立相关。

DISCUSSION

本研究在一个大规模接触者筛查人群中证实，QFT-Plus检测的CD8⁺ T细胞反应与活动性结核病和近期结核感染显著相关。这与CD8⁺ T细胞优先识别重度感染细胞的体外发现一致，提示QFT-Plus CD8⁺ 反应可能具有临床效用，可用于指示宿主体内的结核分枝杆菌活动性，指导是否需要进行结核病调查或治疗。此外，增强的CD8⁺ 反应可能有助于区分近期感染和远期感染，从而识别结核预防性治疗的候选者。本研究结果与一项显示活动性结核病中TB2-TB1 IFN-γ差值显著更高的荟萃分析一致，但与其他一些研究结果存在差异，可能与研究人群、设置和定义不同有关。本研究的优势在于大规模的国家筛查项目队列。局限性包括排除了免疫功能低下者，IFN-γ值的绝对差异较小可能影响临床效用，以及缺乏关于接触时间的详细信息。

CONCLUSION

总之，本研究显示QFT-Plus检测的CD8⁺ T细胞反应与活动性结核病和近期结核感染显著相关。这为利用该标志物识别可能受益于进一步结核病检查或适合接受结核预防性治疗的人群提供了更多证据。

ACKNOWLEDGMENTS

作者感谢新加坡结核病接触者诊所和陈笃生医院微生物实验室工作人员在研究期间的工作。