化学蛋白质组学分析显示，三碘甲状腺原氨酸能够与细胞蛋白质发生共价结合

《ACS Chemical Biology》：Chemoproteomic Profiling Reveals that Triiodothyronine Covalently Labels Cellular Proteins

T3通过共价结合调控细胞代谢蛋白互作机制研究，成功开发新型光亲和探针发现T3独立光照射即可与细胞蛋白共价结合，运用CO/IP-SILAC策略鉴定超千个候选蛋白，包括ATP1A1、HSP90AB1等，并验证SDHA蛋白上半胱氨酸残基为共价结合位点，颠覆传统甲状腺激素信号传导模式，为激素生物学和靶向治疗提供新思路。

　　

甲状腺激素三碘甲状腺原氨酸（T3）是哺乳动物发育和代谢的关键调节因子，其作用早已被广泛认可。在这项研究中，我们首次设计并合成了一种基于T3的光亲和探针，用于识别活细胞中的T3相互作用蛋白。研究结果表明，T3能够独立于光照作用与细胞蛋白发生共价结合。为了验证这种共价标记，我们使用了一种荧光素修饰的T3探针（FIT3），并结合CO/IP和SILAC技术对共价标记的蛋白质进行了分析。以琥珀酸脱氢酶亚基A（SDHA）作为研究目标，通过位点分析发现半胱氨酸残基可能是T3中的亲核反应介导的共价修饰位点。此外，我们还使用了两种在T3结构上不同位置带有炔烃点击接头（alkyne click handles）的活性探针，进一步扩展了对共价T3靶标的鉴定范围。该方法共发现了1000多种候选蛋白，包括ATP1A1、HSP90AB1和PRDX1等，其中部分目标通过Western blotting得到了验证。这些发现揭示了甲状腺激素作用的一种新机制——即通过共价修饰蛋白质来发挥作用，这一发现挑战了传统的甲状腺激素信号传导范式，并为激素生物学及潜在治疗靶点的研究提供了新的见解。