单细胞RNA测序揭示衰老小鼠白色脂肪组织中Fcgr2b+虚拟记忆样CD8 T细胞的积累及其细胞毒性与炎症潜能

《Aging Cell》：Single-Cell RNA Sequencing Identifies Accumulation of Fcgr2b?+?Virtual Memory-Like CD8 T Cells With Cytotoxic and Inflammatory Potential in Aged Mouse White Adipose Tissue

本研究通过单细胞RNA测序（scRNA-seq）技术，系统比较了生理性衰老与高脂饮食（HFD）诱导的肥胖对小鼠性腺白色脂肪组织（gWAT）基质血管组分（SVF）免疫细胞景观的影响。研究发现，衰老特异性导致gWAT中积累了一群表型独特的CD8 T细胞，其表达高水平的Cd44、Sell（CD62L）、Il7r（CD127）、Il2rb（CD122），缺乏Itga4（CD49d），并高表达抑制性受体Fcgr2b（CD32b），呈现出虚拟记忆（VM）样表型。功能分析显示，这些Fcgr2b+ CD49d- VM样CD8 T细胞具有细胞毒性（表达颗粒酶GZMM），并能通过分泌GZMM诱导小鼠成纤维细胞和巨噬细胞产生促炎因子（如IL-6、CXCL1、CCL2），从而驱动脂肪组织炎症。该研究揭示了衰老过程中脂肪组织免疫微环境调控CD8 T细胞分化的新机制，为理解衰老相关炎症（inflammaging）提供了新的细胞靶点。

　　

1 引言

衰老是一个不可避免的生物学过程，伴随着生理功能的进行性衰退，导致对疾病易感性增加和死亡风险上升。在衰老过程中，宿主免疫细胞不仅响应感染和癌症的能力下降，同时还会获得促炎表型，加剧组织病理变化。与衰老相关的慢性低度炎症，被称为“炎性衰老”（inflammaging），是年龄相关疾病（如2型糖尿病、代谢综合征、心血管疾病和癌症）的主要驱动因素。许多年龄相关疾病在肥胖个体中也常见，表明肥胖可能加速衰老进程。脂肪组织是衰老过程中显著受影响的器官之一，年龄相关的免疫细胞变化最早在此被检测到。体重增加、内脏脂肪量积累以及脂肪组织功能障碍与衰老和肥胖均相关。

脂肪组织（AT）是一种代谢活跃的内分泌器官，遍布全身，通过分泌脂肪因子和细胞因子在调节全身代谢中发挥核心作用。脂肪组织主要包括棕色脂肪组织（BAT）和白色脂肪组织（WAT）。BAT主要位于锁骨上和肩胛间区域，对产热至关重要；而WAT主要作为能量储存库。WAT的代谢活性和可塑性对能量供需变化高度敏感。WAT可进一步分为围绕内脏器官的内脏脂肪组织（VAT）和位于皮下的皮下脂肪组织（SCAT）。VAT的积累与心血管疾病、代谢紊乱和癌症风险增加密切相关。从结构上看，WAT是一个复杂且异质性的组织，由脂肪细胞、间充质基质细胞、内皮细胞和免疫细胞组成。虽然脂肪细胞在WAT的组织结构体积中占主导地位，但其细胞组成的相当大部分由非脂肪细胞构成，统称为基质血管组分（SVF）。脂肪组织SVF的功能变化，尤其是成纤维细胞和免疫细胞，在调节炎症和代谢稳态中起着关键作用。

衰老和饮食诱导的肥胖都会显著改变脂肪组织的异质性和功能。这些变化包括衰老相关分泌表型（SASP）蛋白的分泌、促炎表型的获得、以及VAT中T细胞、γδ T细胞、B细胞和炎症性巨噬细胞的积累。近年来，单细胞（sc）和单核（sn）RNA测序（RNAseq）等技术已被用于研究小鼠在衰老和饮食诱导肥胖过程中VAT（尤其是性腺白色脂肪组织gWAT）的这些变化。尽管近期研究揭示了脂肪组织中成纤维细胞、调节性T细胞（Tregs）和耗竭T细胞调控的重要见解，但对衰老和肥胖相关变化的比较分析仍然缺乏。为填补这一空白，本研究对来自年轻和年老、雄性和雌性小鼠gWAT的SVF进行了整合的scRNAseq分析。研究结果揭示了衰老和肥胖小鼠gWAT中CD8 T细胞记忆亚群的显著差异。具体而言，老年小鼠的记忆CD8 T细胞高表达抑制性受体Fcgr2b，表现出细胞毒性特征，并可能启动颗粒酶M（GZMM）介导的小鼠成纤维细胞和巨噬细胞的炎症反应。

2 结果

2.1 衰老和高脂饮食诱导小鼠gWAT功能障碍

高脂饮食（HFD）暴露或衰老诱导的内脏肥胖可影响代谢综合征和全身炎症的发展。为研究这些条件下脂肪组织功能障碍的相似性和差异性，研究人员评估了年轻小鼠（4-5月龄）喂食正常饮食（ND）或HFD（42%热量来自脂肪）12周、以及年老小鼠（21-24月龄）维持ND喂养下的代谢应激反应和循环脂肪因子水平。虽然年轻小鼠的HFD暴露和ND喂养年老小鼠的生理性衰老均显著增加了体重，但在HFD喂养的小鼠（雄性和雌性）和ND喂养的年老雌性小鼠中观察到gWAT质量的显著增加。雄性小鼠通常表现出比雌性小鼠显著更高的体重。值得注意的是，HFD喂养的年轻雄性小鼠比同龄雌性表现出更高的肥胖度，而年老雌性小鼠则比年老雄性小鼠表现出更明显的脂肪积累（gWAT质量）。在代谢应激反应中，只有HFD喂养的年轻小鼠与ND喂养的年轻小鼠相比表现出代谢综合征，这在葡萄糖耐量试验（GTT）和空腹血糖水平升高中得到体现。HFD喂养的年轻雄性小鼠在胰岛素耐量试验（ITT）中也显示出血清葡萄糖水平升高，尽管与ND喂养的年轻雄性小鼠相比差异未达到统计学显著性。此外，在衰老和HFD诱导的肥胖条件下，与同队列雌性相比，雄性小鼠在代谢应激测试中表现出显著更差的结果。

脂肪因子水平失调，主要是脂联素和瘦素，是脂肪组织功能受损的公认指标。为评估不同生理条件下的这些变化，研究人员测量了ND或HFD喂养的年轻小鼠以及ND维持的年老小鼠的血清脂肪因子水平。HFD喂养的年轻小鼠相对于ND喂养的年轻小鼠表现出血清瘦素水平显著升高和脂联素/瘦素比率降低。相反，与ND喂养的年轻雌性小鼠相比，年龄相关的瘦素水平变化在雌性小鼠中更为明显。所有实验组的雌性小鼠均显示脂联素水平升高；然而，在HFD或衰老条件下未观察到脂联素/瘦素比率的显著性别特异性差异，尽管只有ND喂养的年轻雌性小鼠与ND喂养的年轻小鼠相比表现出显著更高的脂联素/瘦素比率。结果表明脂肪因子和肥胖度存在性别特异性调控，雌性小鼠可能比雄性小鼠对代谢功能障碍发挥更强的保护作用。然而，这种保护作用似乎随着衰老和HFD诱导的肥胖而减弱。

2.2 年老小鼠表现出改变的脂肪组织细胞异质性

为表征HFD暴露和衰老过程中脂肪组织异质性的差异，研究人员对从ND喂养年轻、HFD喂养年轻和ND喂养年老小鼠（两种性别）的gWAT分离的SVF进行了scRNA-seq。来自每只小鼠的SVF经过分选去除死细胞，并将每组每性别内每只小鼠的等量活细胞合并，生成每性别三个不同的实验组（总共六个合并样本）。文库使用10x Genomics Chromium Single Cell 3‘平台制备，并进行Illumina测序。经过质量控制和过滤后，保留了32，806个细胞并使用Seurat进行整合。使用均匀流形近似和投影（UMAP）进行降维以可视化数据。基于经典和先前建立的标记基因表达进行细胞类型注释。HFD喂养的年轻小鼠和ND喂养的年老小鼠均显示脂肪干细胞样细胞（ASCs）群减少，尤其是在所有组的雄性中。ASCs的异质性已被证明因饮食、年龄、性别而异，并在调节肥胖中起重要作用。与先前文献一致，HFD喂养的小鼠显示巨噬细胞浸润增加，而ND喂养的年老小鼠则表现出gWAT中B细胞、CD8 T细胞、γδ T细胞、调节性T细胞（Tregs）和浆细胞（PCs）的更大积累。CD8 T细胞、γδ T细胞和Tregs的积累在ND喂养的年老雄性小鼠中更为明显，而B细胞积累在ND喂养的年老雌性小鼠中更高。这些发现突出了衰老和饮食诱导肥胖过程中脂肪组织免疫细胞异质性的显著差异。

2.3 年老小鼠中的CD8 T细胞表现出增强的细胞间通讯

在识别了衰老和肥胖过程中gWAT细胞异质性的改变后，研究人员接下来研究了细胞间通讯以识别相互作用的细胞类型。他们使用了CellChat，一种基于整理的配体-受体（L-R）相互作用推断细胞间信号网络的计算工具，来量化年轻小鼠（喂食ND或HFD）和ND喂养年老小鼠中的信号动态。CellChat分析在每组的聚合雄性和雌性样本上以及个体样本上进行。分析显示，与ND喂养年轻小鼠的CD8 T细胞相比，来自HFD喂养年轻小鼠和ND喂养年老小鼠的CD8 T细胞均显示出增加的传入信号强度，表明与gWAT其他细胞类型的相互作用程度更高。然而，在细胞间通讯的信号强度中未观察到性别相关变化。对传入信号的检查表明，在衰老和HFD条件下，CD8 T细胞与各种细胞群广泛接触。

虽然CellChat提供了细胞间通讯的全局视图，但它不能解析由组间L-R对差异表达引起的差异。因此，研究人员应用MultiNicheNet来基于差异表达的L-R基因对识别年龄和饮食特异性的通讯。由于MultiNicheNet需要每组至少两个样本以增加统计效力，该分析在每组内的聚合雄性和雌性样本上进行。该分析揭示，在衰老过程中，大多数SVF细胞通过MHC Ib类分子和Cd274（PD-L1）独特地向CD8 T细胞发出信号。除了MHC-Ib和Cd274介导的信号外，还观察到细胞类型特异性相互作用：Tregs、γδT细胞和内皮细胞（ECs）通过Il10、Bmp4/6和Inhbb向CD8 T细胞发出信号，而ILCs、NK细胞和中性粒细胞则通过Tgfb1发出信号。

为评估信号通路的全局变化，研究人员应用了CellChat的RankNet功能，该功能显示年龄相关的IL10、PARs（蛋白酶激活受体）、KLK（激肽释放酶相关肽酶）、CCL（趋化因子）、CEACAM（粘附分子）和MHC-I信号通路的富集。年老小鼠中MHC-I和IL10信号通路的富集提示CD8 T细胞细胞毒性和耗竭表型的发展。使用MultiNicheNet对年老CD8 T细胞受体表达的进一步分析揭示了Il15ra、Il10ra、Il7r、Ccr7、Acvr2a、Fcgr2b和Epha3的转录增加。值得注意的是，Il7r和Ccr7是初始和中央记忆（CM）CD8 T细胞的标志物，促进它们归巢到淋巴结构。考虑到公认的年龄相关初始CD8 T细胞下降，研究人员推测Il7r和Ccr7表达增加反映了年老gWAT中CM CD8 T细胞的积累。总体而言，细胞间通讯分析表明，年老gWAT微环境通过Cd274、MHC-Ib、Il10、Bmp4/6和Tgfb2介导的信号，将CD8 T细胞表型调控向免疫抑制表型。

2.4 年老小鼠中的CD8 T细胞表现出独特的表型景观

为进一步表征gWAT中CD8 T细胞的表型多样性，研究人员从SVF中提取并重新聚类了表达CD8a的细胞群。使用UMAP对2408个CD8 T细胞进行降维和重新分析，揭示了八个不同的簇。基于经典标记基因的表达分配簇身份。初始CD8 T细胞通过高表达干性和生存相关基因（包括Lef1、Tcf7、Foxp1和Il7r）以及Ccr7和Sell来识别。效应记忆（EM）T细胞（Tem）通过高表达记忆相关基因（Eomes、Cd44、Ccl5）和中间水平的耗竭标记物（Pdcd1、Ctla4）来区分。两个簇（Tex1和Tex2）代表耗竭CD8 T细胞，其特征是Tox、Nr4a2、Nr3c1、Ikzf3、Pdcd1和Ctla4表达升高，以及Tcf7表达降低。Tex1还高表达组织驻留标记物Cd69和Cxcr6，表明这些耗竭CD8 T细胞获得了驻留表型。效应记忆和耗竭CD8 T细胞均高表达Gzmk，这与之前的炎性衰老相关。Gzmk的转录水平在年老和肥胖小鼠中均较高。簇Tcm/vm1、Tcm/vm2和TGzmm显示出与经典或虚拟记忆样CD8 T细胞一致的特征。这些簇显示中央记忆（CM）标记物（Cd44、Ccr7、Sell）表达升高，并且缺乏Itga4（Cd49d）——一种在抗原暴露后上调的整合素，支持虚拟记忆（VM）样身份。VM CD8 T细胞不依赖于抗原刺激产生，依赖于细胞因子如IL-7、IL-15和IL-18维持，因此它们表达Il2rb、Il4ra、Il7r和Il18r1。在ND喂养的雄性小鼠中观察到的簇TGzmm进一步表达Gzmm和Prf1，提示这些VM样CD8 T细胞的细胞毒性功能。此外，CM/VM样CD8 T细胞表现出高水平的调节/抑制性受体表达，包括Fcgr2b、Acvr2a、Klrc1和Klrd1。Teff簇根据细胞毒性相关基因Tbx21、Zeb2、Gzmb、Prf1、Klrd1和Klrg1的高表达被注释为效应CD8 T细胞。正如预期，HFD喂养的小鼠和ND喂养的年老小鼠显示耗竭CD8 T细胞（Tex1）频率升高。然而，与ND或HFD喂养的年轻小鼠相比，年龄相关的变化在Tcm/vm1、Tcm/vm2和TGzmm簇中更为明显。

为验证scRNA-seq发现，研究人员在另一队列小鼠的gWAT分离的SVF上进行了多色流式细胞术。虽然与ND喂养的年轻小鼠相比，ND喂养的年老小鼠gWAT中初始（CD44^-CD62L^-）CD8⁺ T细胞浸润减少，但该差异未达到统计学显著性。正如预期，HFD喂养的雄性小鼠显示PD-1⁺ TOX⁺和PD-1⁺ TOX⁺ CD69⁺ TCF-7^lo CD8⁺ T细胞的显著积累，与scRNA-seq数据中观察到的耗竭表型一致。HFD喂养的雄性也显示EM（CD44⁺CD62L^-）CD8⁺ T细胞显著增加。由于耗竭CD8⁺ T细胞也表达CD44⁺CD62L^-表型，流式细胞术中CD8⁺ T细胞上PD-1⁺细胞频率增加可能导致对EM群体的高估。在年老小鼠中，观察到PD-1⁺ TOX⁺ CD8⁺ T细胞的显著积累。然而，PD-1⁺ TOX⁺ CD69⁺ TCF-7^lo CD8⁺ T细胞的频率在年老雄性中升高，但未达到显著性，表明HFD对向耗竭状态的转变施加了比生理性衰老更强的影响。值得注意的是，衰老与CM（CD44⁺CD62L⁺）和VM样（CD44⁺CD62L⁺CD122⁺CD49d^-）CD8⁺ T细胞亚群的显著增加相关，与scRNA-seq结果一致。这些VM样CD8⁺ T细胞表达更高水平的CD127（Il7r）并维持Eomes表达。与年轻对照相比，年老VM样CD8⁺ T细胞表现出显著升高的CD127水平，而EOMES水平基本保持不变。尽管这些蛋白表达变化在年老雌性小鼠中更为明显，但VM样CD8⁺ T细胞在衰老过程中的扩张提示这些细胞在衰老过程中脂肪组织中具有独特且潜在的关键作用。

2.5 轨迹分析揭示年老CD8 T细胞分化阶段失调

为探索年老gWAT中CD8 T细胞的分化动态，研究人员在ND喂养的年老小鼠（聚合雄性和雌性）上进行了RNA速率分析、Monocle轨迹推断和伪时间分析。RNA速率基于剪接和未剪接mRNA比率估计未来细胞状态，而Monocle基于沿伪时间的基因表达变化推断分化轨迹。两种方法均揭示了发育轨迹的相似趋势。Monocle推断的伪时间轨迹提示从Tcm/vm1簇向Tem簇的进展，这与先前报道的从CM到EM细胞的稳态、抗原非依赖性增殖一致。RNA速率和Monocle均预测记忆亚群随后可能转变为Tcm/vm2表型。Tem细胞可能分化为耗竭亚群（Tex1和Tex2），后者可能进一步转变为Tcm/vm2表型。此外，簇TGzmm似乎从Tcm/vm1分化而来，并且后期阶段的TGzmm和Tcm/vm1细胞可能汇聚向Tcm/vm2表型。

为进一步定义这些分化途径，研究人员将沿伪时间的前20个差异表达基因绘制成热图。最早伪时间点的细胞表现出Sell和Dusp10的高表达，指示初始表型。向CM/VM样表型的转变以Fcgr2b、Acvr2a和Il18r1表达增加以及Sell表达的持续为标志。TGzmm细胞从Tcm/vm1的分化以Fcgr2b高表达和Sell、Il18r1的中等水平为特征。耗竭表型（Tex1）的获得与Pdcd1和Nr4a2的上调相关。向Tcm/vm2亚群的分化以蛋白质合成相关基因（Eef1b2、Hspe1、Snrpe、H3f3a）的下调、Fcgr2b、Dusp10和Il18r1的中等表达、以及Bcl2的高表达为标志。这种转录谱提示Tcm/vm2细胞具有降低的翻译活性，同时维持生存潜力和免疫应答能力。为功能表征Tcm/vm2群体，研究人员进行了过表征分析和基因集富集分析（GSEA），揭示了蛋白质翻译、核糖体生物合成和氧化磷酸化通路的显著缺陷。同时，Lef1、Foxp1和Dusp10的表达提示静止或静息表型，而细胞因子受体（Il4r、Il7r、Il18r1）的表达暗示这些细胞可以对细胞因子作出反应。总体而言，轨迹分析不仅绘制了衰老脂肪组织中CD8 T细胞的分化途径，还识别了关键调控基因如Fcgr2b、Acvr2a、Il18r1，它们的表达动态可能主导衰老过程中CM/VM样CD8 T细胞的命运决定。

2.6 年老gWAT中Fcgr2b表达的CM/VM样CD8 T细胞积累驱动炎症

抑制性受体Fcgr2b先前已被涉及调控CD8 T细胞，其缺失与效应细胞积累相关。在本研究的数据集中，伪时间轨迹分析提示Fcgr2b在CD8 T细胞分化中具有调控作用，其表达主要局限于CM/VM样（Itga4^-）CD8 T细胞，而非EM细胞。与scRNA-seq数据一致，与ND或HFD喂养的年轻小鼠相比，ND喂养的年老小鼠显示CD44⁺CD62L⁺ CD8⁺ T细胞内Fcgr2b/CD32b⁺CD49d^-细胞的频率显著增加。此外，CM/VM样CD8⁺ T细胞相对于其他CD8 T细胞亚群表现出升高的GZMM表达。值得注意的是，衰老与GZMM的显著上调相关，ND喂养的年老雄性比ND喂养的年老雌性表现出更高的GZMM水平，表明GZMM产生存在性别特异性差异。配体-受体分析揭示，年老CD8 T细胞可以通过不同的信号轴与多种细胞类型（包括巨噬细胞和成纤维细胞）相互作用。考虑到GZMM与炎症的关联，研究人员接下来在体外探索了其对小鼠巨噬细胞和成纤维细胞的功能作用。用重组小鼠GZMM（rGZMM）刺激小鼠骨髓来源的巨噬细胞（BMDMs）（无论是否经LPS预刺激）以及循环和衰老的小鼠胚胎成纤维细胞（MEFs）。在所有细胞类型中，rGZMM处理显著增加了促炎蛋白（包括IL-6、CXCL1和CCL2）的分泌。这些发现表明，年老的CD44⁺CD62L⁺Fcgr2b⁺CD49d^- CD8⁺ T细胞在保留细胞毒性潜力的同时，也可能通过GZMM分泌促进脂肪组织炎症。这扩展了颗粒酶介导炎症的既定范式，该范式先前归因于表达GZMK的耗竭CD8 T细胞，提示GZMK和GZMM可能通过不同的CD8 T细胞亚群介导年老小鼠脂肪组织的炎症。

3 讨论

区分与衰老和肥胖相关的特定细胞变化对于理解它们各自对疾病的贡献以及开发靶向干预措施至关重要。使用scRNA-seq方法，研究人员描绘了生理性衰老和HFD诱导肥胖过程中VAT的异质性。观察到衰老不仅与gWAT中CD8 T细胞的显著积累相关，还与CD8 T细胞和SVF细胞之间相互作用的增强相关，这主要由MHC-I和IL10信号介导。虽然衰老和肥胖均导致耗竭CD8 T细胞的扩张，但衰老独特地促进了表型独特的CD8 T细胞群的积累，类似于VM样CD8 T细胞。这些细胞表达经典记忆相关标记物CD44、Sell、Il7r、Il2rb，并表现出Itga4表达降低，呈现VM表型。值得注意的是，该亚群还表达Fcgr2b、Acvr2a以及Gzmm，提示其在免疫调节、细胞毒性和炎症中的潜在作用。这些发现表明，衰老独特地塑造脂肪组织微环境，以促进具有调节和细胞毒性潜力的VM样CD8 T细胞表型。

年老和肥胖小鼠均显示向CD8 T细胞的信号增加。大部分信号在两种条件下均由MHC-Ib分子的结合介导。虽然MHC-I通常呈递自身肽，但衰老和肥胖过程中脂肪组织细胞衰老表型的发展可以解释与ND喂养年轻小鼠相比MHC-I信号增加的原因。MHC-Ib分子可以与CD8 T细胞上的抑制性或激活性受体相互作用，这种相互作用的结果可能塑造它们的功能反应。在本研究的数据集中，CM/VM样CD8 T细胞高表达抑制性受体Klrc1（NKG2A）和激活性受体Klrc2（NKG2C）的转录水平。鉴于NKG2A对MHC-Ib分子的结合亲和力高于NKG2C，这些相互作用可能有利于抑制性信号和CD8 T细胞的功能抑制。值得注意的是，大多数细胞类型，如B细胞、DCs、ILCs、Tregs、γδT细胞、PCs等，在年老和肥胖小鼠的gWAT中显示出与年轻对照相比增加的MHC-I信号，除了表达Pdgfra的ASCs。这表明ASCs可能易受CD8 T细胞介导的细胞毒性影响，尽管这需要进一步验证。

除了MHC-I介导的信号外，gWAT中的CD8 T细胞还通过Cd274（PD-L1）、Il10、Bmp4/6和Inhbb配体接收信号。相应地，在年老小鼠的CD8 T细胞中观察到它们的受体Epha3、Il10ra和Acvr2a的表达升高。PD-L1和IL10均已知诱导CD8 T细胞的免疫抑制状态。在本分析中，Epha3和Il10ra在效应和耗竭CD8 T细胞亚群中选择性表达，支持它们在促进T细胞功能障碍中的作用。虽然Epha3在CD8 T细胞中的作用尚未明确，但据报道它在恶性T细胞中上调。

值得注意的是，研究发现Acvr2a在表达Klrc1的CM/VM样CD8 T细胞簇中高表达。由于Acvr2a可以通过SMAD1/5和SMAD2/3通路发出信号，年老脂肪组织微环境中Bmp4、Inhbb和Tgfb1信号的相对平衡可能通过促进功能障碍状态或诱导干性来影响CD8 T细胞命运。衰老过程中VM CD8 T细胞频率的增加在外周血、脾脏和淋巴结中已有充分记载。在本研究的数据集中，进一步证明了它们在年老小鼠gWAT中的积累。CM和VM共享多个特征，包括Sell（CD62L）、Cd44、Il7r、Eomes的表达，但可以通过CD49d区分，后者在VM CD8 T细胞上缺失。因此，将VM CD8 T细胞识别为CD44⁺CD62L⁺ CD8⁺ T细胞群内的CD122⁺CD49d^-细胞。年老脂肪组织中CD49d^- VM样CD8 T细胞的积累可能由细胞因子介导的稳态扩张驱动。

过去十年的研究表明记忆CD8 T细胞上存在Fcgr2b表达，这与认为其仅表达于B细胞和先天免疫细胞的观念相反。在本研究中，证明了年老小鼠CM/VM样CD8 T细胞中Acvr2a和Fcgr2b的表达水平更高。Fcgr2b是唯一通过其胞质域中的免疫受体酪氨酸抑制基序（ITIM）发出信号的抑制性Fc受体。Morris等人报道Fcgr2b主要表达于效应记忆（CD44⁺CD62L^lo）CD8 T细胞，其与Fgl2结合可诱导凋亡并限制它们的扩张。微生物刺激也被显示可诱导记忆CD8 T细胞上的Fcgr2b表达，其与预先存在的抗原-抗体复合物结合据报道可在同源再攻击期间限制记忆细胞的扩张。重要的是，在多发性骨髓瘤患者和SARS-CoV-2患者的CD8⁺肿瘤浸润淋巴细胞中观察到升高的Fcgr2b表达。其他研究提示效应CD8 T细胞上的Fcgr2b表达损害对抗PD-1疗法的反应性，而其缺失增强CD8 T细胞干性。最近，在年老调节性CD8 T细胞上检测到Fcgr2b，提示其在衰老过程中具有更广泛的免疫调节功能。

在本研究的scRNA-seq数据中，与EM CD8 T细胞相比，Fcgr