Blimp1在非小细胞肺癌免疫抑制微环境中的关键作用及机制研究

《BJC Reports》：The transcription factor Blimp-1 is suppressed by SLAMF1 and drives Treg cell-mediated immune evasion in non-small cell lung cancer

本研究聚焦非小细胞肺癌(NSCLC)免疫抑制微环境中转录因子Blimp1的关键作用。研究人员通过组织样本分析、PBMCs实验和分子机制探讨，发现Blimp1蛋白在肿瘤区域特异性高表达，且与Treg细胞功能调控密切相关。实验证实Slamf1/CD150对Blimp1具有负向调控作用，而PD-1抑制剂可降低Blimp1表达。该研究为理解NSCLC免疫逃逸机制提供了新视角，对优化免疫治疗策略具有重要意义。

　　

肺癌是全球癌症相关死亡的主要原因，其中非小细胞肺癌(NSCLC)占比高达85%。尽管免疫检查点抑制剂(如抗PD-1/PD-L1抗体)的应用显著改善了晚期NSCLC患者的预后，但仍有相当部分患者对其不产生应答。肿瘤微环境(TME)中的免疫抑制机制，特别是调节性T细胞(Treg)的异常活化，被认为是导致免疫治疗抵抗的关键因素之一。

近年来，研究发现转录因子B淋巴细胞诱导成熟蛋白1(Blimp1)在淋巴细胞分化和功能调控中发挥重要作用。Blimp1不仅参与CD8⁺ T细胞和CD4⁺ T细胞的效应功能调控，还在Treg细胞的稳定性和功能维持中起关键作用。然而，Blimp1在NSCLC肿瘤免疫微环境中的具体角色及其临床意义尚不明确。

为此，德国埃尔朗根-纽伦堡大学的研究团队开展了深入探讨。研究人员收集了173例NSCLC患者的手术标本，包括肿瘤区域(TU)、癌旁区域(PT)和远端正常组织(CTR)，通过蛋白质印迹、免疫组化、流式细胞术等多种技术手段，系统分析了Blimp1在NSCLC中的表达特征和功能机制。

关键技术方法

本研究主要采用以下实验方法：1）组织样本分析：收集NSCLC患者手术标本（肿瘤区、癌旁区和正常区），通过蛋白质印迹和免疫荧光检测Blimp1蛋白表达与定位；2）外周血单个核细胞(PBMC)实验：分离患者和健康对照者PBMC，进行抗CD3/CD28抗体刺激及细胞因子处理，通过流式细胞术分析T细胞亚群；3）分子机制研究：使用抗Slamf1和抗PD-1抗体处理PBMC，通过qPCR和多重细胞因子检测分析基因表达和细胞因子分泌。

Blimp1在NSCLC肿瘤微环境中的表达特征

研究发现，Blimp1蛋白在NSCLC肿瘤区域显著高表达，且与CD3⁺ T细胞共定位。免疫荧光双标显示，肿瘤区域存在Blimp1⁺CD3⁺ T细胞群体。

尽管Blimp1蛋白在肿瘤区域高表达，但其mRNA水平在该区域却呈下降趋势，提示可能存在转录后调控机制。同时，效应T细胞相关分子如T-bet、穿孔素(perforin)、CD8和CD4的mRNA表达在肿瘤区域也显著降低，表明肿瘤微环境中存在T细胞功能抑制。

Slamf1与Blimp1的调控关系

研究人员发现，淋巴细胞活化信号分子Slamf1(CD150)在肿瘤区域表达降低，且与肿瘤分级呈负相关。相反，Blimp1表达随肿瘤进展而增加，两者呈现负相关趋势。

Blimp1在T细胞亚群中的表达调控

通过PBMC实验发现，抗CD3/CD28抗体刺激可诱导NSCLC患者CD3⁺CD8⁺ T细胞中Blimp1表达。特别值得注意的是，在TGF-β1存在下，抗CD3/CD28刺激显著促进了Blimp1⁺Foxp3⁺ Treg细胞的生成。

细胞因子谱特征分析

研究发现，抗CD3/CD28刺激可诱导PBMC产生IL-6、IL-10、IFN-γ和IL-2等多种细胞因子。值得注意的是，免疫抑制性细胞因子IL-10与效应细胞因子IFN-γ和IL-2水平呈正相关，提示在免疫激活状态下，免疫抑制机制可能被同时触发。

IL-6R在Blimp1+ T细胞亚群的表达

进一步研究发现，在抗CD3/CD28刺激后，几乎所有的Blimp1⁺ Treg细胞都表达IL-6受体(IL-6R)，而仅有约50%的Blimp1⁺ Th1细胞表达IL-6R，提示IL-6信号可能 preferentially 影响Treg细胞功能。

Slamf1和PD-1对Blimp1的调控作用

通过抗体阻断实验发现，抗Slamf1抗体处理可显著上调Blimp1表达，并增加IL-10、IL-6、TGF-β1等免疫抑制因子的产生。相反，抗PD-1抗体处理降低了Blimp1表达水平。

研究结论与意义

本研究系统阐明了Blimp1在NSCLC免疫抑制微环境中的关键作用。研究发现Blimp1蛋白在肿瘤区域特异性高表达，主要定位于T细胞，特别是Treg细胞亚群。机制上，Slamf1对Blimp1表达起负向调控作用，而PD-1信号可能参与Blimp1表达的维持。

值得注意的是，Blimp1⁺ Treg细胞高表达IL-6R，且Blimp1表达与IL-10等免疫抑制因子产生密切相关，提示Blimp1可能在维持Treg细胞稳定性和免疫抑制功能中起重要作用。这为理解NSCLC免疫逃逸机制提供了新的视角。

临床意义上，本研究揭示了Blimp1作为NSCLC免疫治疗潜在靶点的重要性。研究发现抗PD-1治疗可降低Blimp1表达，而Slamf1激动剂可能通过抑制Blimp1来增强抗肿瘤免疫应答。这些发现为开发新的免疫治疗组合策略提供了理论依据，对改善NSCLC患者免疫治疗应答率具有重要指导意义。

该研究发表在《BJC Reports》期刊，为深入理解肿瘤免疫微环境调控机制提供了重要证据，也为开发新的免疫治疗策略指明了方向。未来研究需要进一步阐明Blimp1在T细胞亚群中的具体作用机制，以及靶向Blimp1在抗肿瘤免疫治疗中的潜在应用价值。