人参皂苷Rg3通过miR-139-5p/AURKA轴抑制肝细胞癌有氧糖酵解的作用机制研究

《Cellular Signalling》：Ginsenoside inhibits aerobic glycolysis in hepatocellular carcinoma through the hsa-miR-139-5p/AURKA axis

本研究揭示了人参皂苷（Rg3）通过调控hsa-miR-139-5p/AURKA信号轴抑制肝细胞癌（HCC）有氧糖酵解的新型作用机制。通过体内外实验证实，Rg3可靶向下调miR-139-5p表达，进而抑制 Aurora激酶A（AURKA）活性，最终通过调控P53、GLUT1/4等关键因子逆转肿瘤细胞的"瓦博格效应"（Warburg effect），为临床肝癌辅助化疗提供了新的理论基础和实验依据。

　　

亮点

研究目的

人参皂苷Rg3作为具有抗肿瘤和免疫增强特性的重要小分子化合物，主要应用于肝细胞癌（HCC）的临床辅助化疗。本研究旨在探索Rg3在HCC中的活性靶点及作用机制，为临床药物研究提供新的基础数据。

研究方法

采用浓度梯度的Rg3处理HepG-2细胞，通过CCK-8法检测细胞活性并计算IC₅₀值。运用流式细胞术检测细胞凋亡诱导效应及药物在细胞内的周期分布。使用酶联免疫吸附测定（ELISA）试剂盒检测细胞处理后的乳酸（LC）和葡萄糖（GLU）含量。通过高通量数据分析筛选HCC相关糖酵解基因，分析生物标志物与临床数据的相关性，并采用荧光素酶报告基因实验验证基因结合靶点。利用实时定量PCR（qRT-PCR）和蛋白质印迹（WB）技术评估临床样本和细胞亚群中基因及蛋白的表达水平。最后通过小鼠移植瘤模型验证细胞实验的可靠性。

研究结果

浓度梯度的Rg3处理可抑制LC和GLU的分泌，并通过诱导细胞凋亡来抑制细胞增殖。高通量数据分析筛选出6个生物标志物，其中miR-139-5p在肿瘤组织和细胞中呈现高表达。免疫荧光实验证实其与极光激酶A（AURKA）存在靶向结合关系。Rg3通过靶向miR-139-5p抑制肿瘤增殖，并逆转AURKA的表达水平。实验显示Rg3可诱导细胞凋亡，降低AURKA、GLUT1和GLUT4的表达水平，同时升高P53的表达。当联合使用miRNA抑制剂和AURKA过表达（OE-AURKA）载体时，可显著激活P53蛋白表达，逆转miRNA抑制剂和OE-AURKA引起的糖酵解活化，并诱导细胞凋亡。体内实验结果表明，Rg3通过靶向miR-139-5p抑制细胞凋亡和糖酵解蛋白表达，与体外实验结果高度一致。

研究结论

Rg3能够有效抑制HepG-2细胞增殖，并首次揭示了其通过miR-139-5p/AURKA信号轴抑制HCC有氧糖酵解的新型作用机制。