二维FAIMS-TIMS分离技术用于探测肽的结构多样性,分辨率可超过6500

《Analytical Chemistry》:Two-Dimensional FAIMS-TIMS Separation for Probing Structural Diversity of Peptides with Resolution Exceeding 6500

【字体: 时间:2025年10月22日 来源:Analytical Chemistry 6.7

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  二维离子分离平台结合r-FAIMS、TIMS和TOF-MS实现BK+2H+离子30+构象分离,验证FAIMS与TIMS正交性,总分辨力超6500,适用于大分子结构解析。

  
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通过将高灵敏度、高分辨率的跑道型场不对称波形离子迁移谱(r-FAIMS)与陷阱离子迁移谱(TIMS)和飞行时间质谱技术相结合,开发了一种二维气相离子分离平台。该平台用于研究双电荷缓激肽(BK+2H+)2+离子的构象多样性。使用完全优化的TIMS技术可以分辨出(BK+2H+)2+离子的四种构象;而当使用纯氮气作为载气并设置2.6 kV的色散电压(DV)时,r-FAIMS技术能够分辨出在不同补偿电压(CV)下产生的六种构象。通过对所有通过r-FAIMS分离出的峰进行进一步的TIMS分析,可以识别出近30种(BK+2H+)2+离子构象。研究发现,尽管这些离子的迁移率基本相同,但它们的补偿电压(CV)值却存在显著差异。在常规TIMS光谱中通常被环境噪声掩盖的多个TIMS峰,在经过CV筛选后的TIMS光谱中能够被清晰地检测出来。这些实验结果充分证明了r-FAIMS和TIMS在分离机制上的高度正交性。二维r-FAIMS-TIMS分离系统的整体分辨能力基本上等于r-FAIMS与TIMS各自分辨能力的乘积。基于r-FAIMS和TIMS测量数据之间的相关性进行的理论计算表明,该组合技术的总分辨能力超过6500,这使得这种新型仪器平台在大型生物分子的结构解析中表现出极高的效率。

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