可编程的发夹式Argonaute-纳米孔检测系统，用于多重霉菌毒素分析

《Analytical Chemistry》：Programmable Hairpin Argonaute–Nanopore Detection System for Multiplex Mycotoxin Analysis

可编程纳米孔检测系统PHAND通过整合TtAgo蛋白介导的DNA发夹探针库，实现便携式多组分小分子有害物质同步检测，成功应用于黄曲霉毒素B1、奥曲霉毒素A和扎拉烯酮的三重检测，验证了其在真实食品样品中的实用价值。

　　

食品样品常常同时受到多种小分子有害物质的污染。然而，传统的检测方法通常只能检测到一种污染物，这是由于缺乏准确且多路复用的信号转换和输出机制。在这项研究中，我们提出了一种多功能检测平台——“可编程发夹状Argonaute–纳米孔检测系统”（PHAND），该系统结合了Thermus thermophilus Argonaute（TtAgo）介导的切割技术以及模块化的DNA发夹探针库，实现了对多种分析物的多路复用和便携式检测。在特定目标存在的情况下，引导DNA会被释放出来激活TtAgo蛋白，这些蛋白会切割相应的发夹探针并产生独特的纳米孔信号。当这些信号阻断α-溶血素纳米孔时，会产生正交的、特征性的电流阻断信号。利用PHAND系统，我们成功实现了对三种主要霉菌毒素——黄曲霉毒素B₁、赭曲霉毒素A和玉米赤霉酮的同时检测，且具有高灵敏度和特异性。在添加了这些毒素的真实样品中的验证实验表明，该方法具有令人满意的回收率，并证实了其实际应用价值。所开发的PHAND系统支持对小分子有害物质的便携式和多路复用检测，为快速食品安全筛查提供了潜力。