通过微流控技术制备的含细胞的水凝胶微球，采用乙二醇和海藻糖实现低温保存

《Biomacromolecules》：Ethylene Glycol and Trehalose Cryopreservation of Cell-Laden Hydrogel Microspheres Enabled by Microfluidic Fabrication

细胞负载水凝胶微球的微流控制备及无DMSO/FBS冷冻保存策略研究，通过GelMA和ALG材料成功实现均一微球制备，U251细胞存活率>80%，iPSCs及多种细胞的存活率>90%，开发12%乙二醇-4%山梨糖（E/T）保存剂有效维持干细胞多能性，为3D细胞培养技术提供临床转化方案

　　

负载细胞的水凝胶微球在3D细胞培养应用中受到了广泛关注，然而针对这些系统的有效冷冻保存方法仍需进一步研究。本研究开发了一种微流控平台，用于制备单分散的负载细胞微球，并探索了一种不使用二甲基亚砜（DMSO）和胎牛血清（FBS）的冷冻保存方法。该平台能够快速制备明胶甲基丙烯酸酯（GelMA）和海藻酸钙（ALG）微球，实验结果显示：在GelMA微球中的U251细胞存活率超过80%，而在ALG微球中的U251细胞和诱导多能干细胞（iPSCs）存活率均超过90%。研究发现了一种不含DMSO和FBS的冷冻保护剂（12%乙二醇，4%海藻糖；E/T），该保护剂在GES、U251、HepG2、A549和3T6细胞中的解冻后存活率均保持在90%以上，iPSCs的存活率也超过80%。重要的是，E/T不仅有效保护了负载iPSC的微球，还防止了DMSO诱导的细胞凋亡，并保持了细胞的多能性。这项工作建立了一种不使用DMSO/FBS的负载细胞水凝胶微球冷冻保存的系统性方案，为推进3D细胞培养技术提供了具有临床应用价值的策略。