贝伐珠单抗通过调控Nrf2/HO-1与RIPK1/MLKL通路减轻大鼠肾脏缺血再灌注损伤的机制研究

《Journal of Molecular Histology》：Bevacizumab alleviates kidney damage by modulating inflammation, necroptosis and apoptosis: a preclinical study of renal ischaemia/reperfusion injury in rats

本研究针对肾缺血再灌注损伤（IRI）这一临床关键问题，评估了贝伐珠单抗（Bevacizumab）的肾脏保护潜力。研究人员通过大鼠模型发现，贝伐珠单抗预处理能显著改善肾功能指标（肌酐、KIM-1），降低炎症（TNF-α, IL-1β, NF-κB）、氧化应激（F8-isoprostane, SOD）及细胞死亡（caspase-3, RIPK1, MLKL）水平，并改善组织病理损伤。其作用机制与激活Nrf2/HO-1通路及抑制RIPK1/MLKL通路有关，为防治急性肾损伤（AKI）提供了新策略。

　　

肾脏缺血再灌注损伤（IRI）是肾脏和心脏手术中引发的一个严峻临床问题，常常导致急性肾损伤（AKI）。贝伐珠单抗（Bevacizumab）是一种人源化单克隆抗体，它能与循环中的可溶性血管内皮生长因子A（VEGF-A）亚型结合，从而抑制VEGF分子通路的激活，并产生抗血管生成效应。本研究在大鼠肾脏IRI模型中评估了贝伐珠单抗的肾脏保护潜力。

研究人员将24只斯普拉格-杜勒（Sprague–Dawley）大鼠分为四组：假手术组、IRI组、IRI+生理盐水组以及IRI+贝伐珠单抗组。假手术组仅接受开腹手术而不诱导IRI；其余三组则经历30分钟的双侧肾缺血，随后进行24小时的再灌注。在缺血前60分钟，IRI+生理盐水组和IRI+贝伐珠单抗组的大鼠分别通过腹腔注射给予生理盐水（作为贝伐珠单抗的溶剂）和0.1 mg/kg的贝伐珠单抗。

通过酶联免疫吸附测定（ELISA）检测了肾脏损伤标志物（肌酐和肾损伤分子-1(KIM-1)）、炎症与氧化应激标志物（肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、核因子κB(NF-κB)、F₈-异前列腺素(F₈-isoprostane)和超氧化物歧化酶(SOD)）以及凋亡标志物（半胱天冬酶-3(caspase-3)）。此外，还通过免疫组织化学（IHC）评估了核因子E2相关因子2(Nrf2)和混合系列蛋白激酶样结构域(MLKL)的表达，通过实时荧光定量聚合酶链式反应（RT–qPCR）检测了受体相互作用蛋白激酶1(RIPK1)和血红素氧合酶-1(HO-1)的mRNA水平，并进行了组织学检查和分子对接分析。

与假手术组相比，IRI组和IRI+生理盐水组表现出肌酐、KIM-1、NF-κB、TNF-α、IL-1β、F₈-异前列腺素、caspase-3、RIPK1和MLKL的显著升高，以及SOD的降低。组织学结果也显示出明显的肾脏结构损伤。相反，贝伐珠单抗治疗显著减轻了肾脏损伤、炎症标志物水平、细胞死亡以及组织病理学改变。在贝伐珠单抗治疗的大鼠中，Nrf2和HO-1的核转位增加。分子对接分析进一步揭示，贝伐珠单抗与Kelch样ECH关联蛋白1(Keap1)存在相互作用。

综上所述，贝伐珠单抗通过激活Nrf2/HO-1通路和抑制RIPK1/MLKL通路，减轻炎症、坏死性凋亡、凋亡和坏死，从而对肾脏IRI发挥保护作用。