基于邻近杂交的CRISPR-Cas12a蛋白检测新技术及其在CRP诊断中的应用

《Journal of Analysis and Testing》：Novel Proximity-Based CRISPR-Cas12a Assay for Protein Detection and its Application in CRP Diagnosis

本研究开发了一种新型等温邻近CRISPR-Cas12a检测方法，通过DNA-抗体生物缀合物策略将CRP蛋白识别转化为DNA信号，实现荧光和试纸条双模式检测。该方法检测限达0.57 ng/mL（荧光）和2.63 ng/mL（试纸条），在临床血清样本中展现出高特异性和实用性，为床旁蛋白诊断提供了新方案。

　　

精准灵敏的蛋白生物标志物检测对疾病早期诊断和治疗监测至关重要。本研究创新性地开发了一种等温邻近CRISPR-Cas12a检测技术，用于检测炎症关键标志物C反应蛋白(CRP)。该技术采用DNA-抗体生物缀合策略，将蛋白质识别信号转化为DNA信号，并通过多级信号放大级联反应实现信号增强。抗体探针的邻近杂交可激活Cas12a的反式切割活性，在荧光和商用试纸条上产生可检测信号。研究实现了双模式检测，荧光检测限为0.57 ng/mL，试纸条检测限为2.63 ng/mL，线性检测范围达0.1–100 μg/mL。该方法对血液中干扰物质表现出高特异性，临床血清样本验证表明其在生理条件下具有优异的稳健性和实用性。该技术不仅提升了CRP检测性能，更为多种蛋白生物标志物的定量分析提供了通用技术框架，为床旁检测(POCT)领域的临床蛋白诊断提供了创新解决方案。